Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4).

Một phần của tài liệu VNRAS-12-DDVN5-TAP-1-CHUYEN-LUAN-HOA-DUOC-PHAN-OP (Trang 36 - 40)

Bàn mỏng: Siỉica gel GF254

Dung môi khơi triển: Toỉuen - aceton - cloro/orm (10:25 : 65). Dung dịch thử: Lẩy một lượng bột viên tương ứng với 0,1 g

paracetamol, hòa tan vừa đủ với 100 mỉ ethanoỉ 96 % (TT).

Dung dịch đổi chiểu (ỉ): Dung dịch có chứa 0,1 %

paracetamol chuẩn trong ethanoỉ 96 % (77).

Dung dịch đổi chiếu (2): Hòa tan 0,25 g 4 ’~cỉoroacetanỉỊỉd

(77) và 0,1 g paracetamol chuẩn Long vừa đủ 100 ml

ethanoỉ 96 % (77). ^

Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên bản mỏng 40 pl mỗi

dung dịch thử, đung địch đối chiếu (1), dung dịch đổi chiểu (2). Cho dung môi khai triển vào bình sắc kỷ khơng lót giây và đặt ngay bản mỏng vừa chấm các dung dịch vào bình. Triển khai sắc ký đến khi dung môi đi được 15 cm. Lấy bản mỏng ra để khơ hồn tồn ở nhiệt độ phòng. Quan sát dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 254 nm. v ết chính thu được trên sắc ký đồ của dung dịch thừ phải tương ứng về vị trí, kích thước, màu sắc với vểt thu được trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiểu (1).

Phép thừ chỉ có giá trị khi trên sấc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) cho hai vểt tách rõ ràng riêng biệt, vết tương ứng với 4-cloroacetanilid phải có giá trị Rf cao hơn.

Tạp chất liên quan

Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3). VIÊN SÙI PARACETAMOL

Chuẩn bị các dung dịch ngay trước khi dùng và tránh ánh sáng ' I

Pha động: Hỗn hợp gom 250 thể tích methơnoỉ (77) cộ .1

chứa 4,6 g/1 dung dịch tetrahutyỉamonì hvdmxyd 40 %: [

375 thể tích dung dịch dinatri hydrophosphat 0,05 M

375 thể tích dung dịch natri dihydrophosphat 0,05 M. w I

Dung dịch thử: Cân chính xác một lượng bột thuốc tương! I

tương với khoảng 0,2 g paracetamol vào binh định mứqẳf ị 10 ml, thêm 8 ml pha động, lắc siêu âm, thêm pha động! Ị

vừa đủ thể tích, lấc đều, lọc. V. (

Dung dịch đối chiếu (ỉ): Pha loãng 1,0 ml dung dịch thừ ' *

thành 20,0 ml bàng pha động. Pha loẫng 1,0 ml dung dịch • 1

thu được thành 20,0 mỉ bằng pha động.

Dung dịch đổi chiếu (2): Chửa 0,002 % 4-aminophenol

(77) và 0,002 % paraceĩamol chuân trong pha động.

Dung dịch đối chiếu (3): Pha loãng dung dịch chứa 0,02 % . 4 '-cỉoroacetaniỉid (77) trong methanoỉ (77) băng pha động7 ì

đê thu được đung dịch chứa 0,00002 % 4 ’-cloroacetanilid i

Điều kiện sắc ký: ì

Cột kích thước (25 cm X 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh B (5 pm). Cột Zorbax Rx CS là phù hợp.

Nhiệt độ cột: 35 °c. (L

Detector quang phổ từ ngoại đặt ờ bước sóng 245 nm. L Tốc độ dịng: 1,5 ml/min.

Thể tích tiêm: 20 Ịil,

Cách tiến hành: 7' I

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống: Tiến hành sắc ký dung Ị dịch đối chiếu (2), độ phân giài giữa 2 pĩc tương ứng với! ị 4-aminophenol và paracetamol khơng nhị hơn 4,0. ì

Tiến hành sắc ký dung dịch thừ với thời gian bằng 12 lần

thời gian lưu cùa pic paracetamol. . ■

Yêu cầu:

Trên sắc ký đồ thu đưực từ dung dịch thử: Pic tương ứng với

4-aminophenol khơng được có điện tích lớn hơn diện tích pic 4-aminophenol thu được trên sắc ký đồ của dung dịch •;, đối chiểu (2) (0,1 %). Pic tương ửne với 4 ’-cloroacetanilid ; khơng được có diện tích lớn hơn diện tích pic chính trêũ ■ Ị sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (3) (10 ppm). Bẩt kỳ p i c Ị tạp nào khác khơng được có diện tích lớn hơn diện tích pic: f chỉnh trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) (0,25Vũ). . i

Định Iưọng /;)!

Cân 20 viên, tỉnh khối lượng trung bình viên và nghiên ị thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,150 g paracetamol cho vào bình địnhJỊ mức 200 ml, thêm từ từ 50 ml dung dịch natri hydroxydỆ ị 0 J M và chờ cho dung dịch hêt sùi bọt, thêm 100 ml nưởCtìgị

lắc kỳ 15 min. Thêm nước đển định mửc, lắc đều. Lọc, loại ặ. Ị bỏ 20 ml dịch lọc đầu. Pha loãng 10,0 ml dịch lọc thành V ị

100,0 ml với nước. Lấy chính xác 10 mi dung dịch này ■V

cho vào bình đinh mức dung tích 100 ml, thêm 10 ml dung .

dịch natrì hydroxyd 0, ỉ M. Pha loãng VỚI nước đén định,-Ị; ì

mức. Đo độ hấp thụ ánh sáng (Phụ lục 4.1) của dung dịcỊcd í thu được ỏ' bước sóng 257 nm, cốc đo dày 1 cm. Dùngvỵ Ị

dung dịch natrỉ hydroxyd0,0ỉ M làm mẫu trắng. Tính hàm. ỉ. ị lượng paracetamol, C8H9N 0 2, theoA O %, lem). Lấy7l5L ị là giá trị A (1 %, lcm), ờ bước sóng 257 nm.

DƯỢC ĐIÊN VIỆT NAM v t l

p ự ợ c ĐIÊN VIỆT NAM V

Bảo quản

Ị}ể nơi mát, trong đơ đựng kín, tránh ánh sáng.

Loại thuốc

Giấm đau, hạ sốt.

Hàm lượng thường dùng

500 mg.

VIÊN NÉN PARACETAMOL VÀ CAFEIN

Tabeỉlae Paracetamoỉi et Coffeỉni

Là viên nén chứa paracetamol và cafein.

Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc viên nén1' (Phụ lục l .20) và các ycu cầu sau đây:

Hàm lượng paracetamol, C8HạN02, và cafein, C8Hl0N4O2, từ 90,0 % đến 110,0 % so với lượng ghi trcn nhãn.

Định tính

Trong phân Định lượng, thời gian lưu tưcmg đôi cùa các pic chính paracetamol và caíein so với pic chuẩn nội trên sắc ký đồ thu được cùa dung dịch thử và dung dịch chuẩn phải phù họp với nhau.

Độ hòa tan (Phụ lục 11.4)

Thiết bị: Kiểu cánh khuấy. Mơi tncờng hịa tan: 900 ml nước.

Tốc độ quay: 100 r/min. Thời gian: 60 min. Cách tiến hành:

Pha động, dung dịch chuân nội, hơn hợp dung mói. dung dịch chuẩn gốc, điêu kiện sắc ký và cách tiên hành thực

hiện như mô tả trong phần Định lượng.

Dung dịch chuẩn: Hút chính xác 20,0 ml dung dịch chuẩn

gốc vào bình định mức 50 ml, thêm chính xác 3,0 ml dung dịch chuẩn nội và 20 ml nước, trộn đều, để yên khoảng 30 s. Pha loãng bàng hỗn hợp dung môi đến định mức, trộn đêu, Dung dịch này sừ dụng trong vòng 8 h.

Dung dịch thử: Lấy một phần dung dịch môi trường sau

khi hòa tan, lọc, bỏ 20 ml dịch lọc đầu. Lấy một thể tích chính xác dịch lọc cho vào bình định mức 50 ml sao cho dung dịch thu được cỏ nồng độ paracetamol 0 ,1 ing/mi và nơng độ cafein 0,ì J mg/ml, J được xác định ở dung dịch

chn gơc. Thêm chính xác 3,0 ml dung dịch chuân nội và 20 mỉ hổn hợp dung môi, trộn đều, để yên khoáng 30 s, Pha lỗng bẩng hỗn hợp dung mơi đến định mức, trộn đều. Tính hàm lượng cùa paracetamol, C8H9N 0 2, và cafein, QtHt0N4O2, đã hòa tan trong mỗi viên từ tỷ số giữa diện nch pic paracetaniol hoặc caíein và diện tích pic chuẩn nội hên sắc ký đồ của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và nồng dộ paracetamoỉ và caíein trong dung dịch chuẩn.

Yêu cầu: Khơng được ít hơn 75 % (Q) lượng paracetamol,

C8H9N 0 2, và caícin, C8H |DN40 2, so với lượng ghi trên nhàn được hòa tan trong 60 min.

Định Iưọtig

Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3).

Pha động: Nước - methanoỉ - acidacetic băng (69 : 28 : 3)

điều chỉnh ti lộ nếu cần.

Dung dịch chuân nội: Chuẩn bị dung dịch acid benzoic

trong methanoỉ (TT) có nồng độ khoảng 6 mg/ml.

Hỗn hợp dung mơi: Methanoỉ - acid acetìc băng (95 : 5). Dung dịch chuản gốc: Hịa tan chính xác một lượng

paracetamol chuẩn và caíein chuẩn trong hỗn hợp dung môi để thu được dung dịch có nồng độ 0,25 mg/ml cùa paracctamol và 0,25.7 mg/ml của cafein, J là tỷ lệ lượng ghi trên nhãn cùa cafein vả lượng ghi trên nhãn cùa paracetamol trong viên.

Dung dịch chuẩn: Hút chính xác 20,0 ml dung dịch chuẩn

gôc và 3,0 ml dung dịch chuẩn nội vào bình định mức 50 ml, pha loãng bàng hỗn hợp dung môi đến định mức, trộn đều. Dung dịch thu được cỏ nồng độ paracetamol khoảng 0, l mg/ml và nồng độ cafein khoảng 0, \J mg/ml.

Dung dịch thừ: Cân 20 viên, tính khối lượng trung binh

viên, nghiền thành bột mịn. Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng khoảng 250 mg paracetamol vào bình định mức 100 ml, thêm khoảng 75 ml hồn hợp dung môi, lắc trên máy lắc 30 min. Pha loãng bằng hỗn họp dung môi đến định mức, trộn đều. Hút chính xác 2,0 ml dung dịch này và 3,0 ml dung dịch chuẩn nội vào bình định mức 50 ml, pha lỗng bàng hỗn hợp dung mơi đến định mức, trộn đều.

Điêu kiện sảc ký:

Cột kích thước (10 cm X 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh c (5 pm).

Nhiệt độ cột: 45 ° c ± l °c.

Detector quang phổ từ ngoại đặt ở bước sóng 275 nm. Toe độ dịng: 2 ml/min.

Thể tích ticm: 10 pl.

Cách tiến hành:

Kiểm tra tính phù họp cùa hệ thống: Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn. Hộ số đối xứng của pic tương ứng với paracetamol và cein khơng được lớn hơn l,2. Độ phân giải giữa pic tương ứng với paracetamol, cafein và pic chuẩn nội khônu được nhỏ hơn 1,4. Độ lệch chuân tương đối cùa các diện tích đáp ứng từ 6 lần tièm lặp lại không được lớn hơn 2,0 %.

Tiến hành sắc ký lần lượt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Thời gian lưu tương đổi cùa paracetamol khoảng 0,3, của cafein khoảng 0,5 và của acid bcnzoic là 1,0. Tính hàm lượng paracetamol C8H9N 0 2, và caíein, C8H10N4O2, cỏ trong một đơn vị chế phẩm từ tỷ số giữa diện tích pic paracetamol hoặc cafein và diện tích pic chât chuẩn nội trên sắc ký đồ của dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng CKH9N 0 2 của paracetamol chuẩn và C8H 10N4O2 cùa cafein chuẩn.

Bảo quản

Trong bao bì kín ờ nhiệt độ từ 15 °c đến 30 °c.

Loại thuốc

Giảm đau, hạ sốt.

Hàm lượng thường dùng

200 mg paracetamol, 50 mg cafein. 500 mg paracetamol, 65 mg cafein.

VIÊN NẾN PARACETAMOL VÀ CLORPHENIRAMIN

VIÊN NÉN PARACETAMOL VẢCLORPHENIRAMIN CLORPHENIRAMIN

Tabeỉlae Paracetamoli et Chỉorpheniramỉnỉ

Là viên nén chửa paracetamoi và clorpheniramin maleat. Chế phẩm phải đảp ứng các yêu cầu trong chuyên luận ‘Thuốc viên nén” (Phụ lục 1.20) và các yêu câu sau đây:

Hàm lượng paracetamol, C8H9N 0 2, từ 90,0 % đển 110,0 % so với lượng ghi trên nhãn.

Hàm lượng clorpheniramin maleat,c,^H^ƠN^C^Ch,

tử 90,0 % đển 110,0 % so với lượng ghi trên nhãn.

Định tính

A. Trong phần Định lượng paracetamol, thời gian hru của pic chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu của pic paracetamol trên sắc ký đồ của dung dịch chuẩn.

B. Trong phần Định lượng clorpheniramin maleat, thời gian lưu của pic chính trên sắc ký đồ của đung dịch thử phải tương ứng với thời gian lưu của pic clorpheniramin maleat trên sắc ký đồ của dung dịch chuẩn.

Độ hòa tan (Phụ lục 11.4)

Thiết bị: Kiểu cánh khuấy. Mơi trườỉĩg hịa tan: 900 ml nước.

Tốc độ quay: 50 r/min. Thời gian: 45 min. Cách tiến hành:

Dung dịch thử: Sau thời gian hòa tan qui định, lấy một

phẩn dịch hòa tan, lọc, bỏ dịch lọc đầu. Trộn 9,0 ml dịch lọc với 1,0 ml dung dịch acidphosphoric ỉ %.

Dung dịch chuẩn: Tiến hành như mô tả trong mục Định

lượng paracetamol và Định lượng clorpheniramin maleat. Pha loãng (nếu cẩn) với dung dịch acid phosphoric 0, ỉ % để thu đưọ'c các dung dịch có nồng độ paracetamol và

clorpheniramin maleat tương ứng với nồng độ paracetamơl và clorpheniramin maleat trong dung dịch thử.

Xác định hàm lượng paracetamol, CgH9N 0 2 và c lorphenừamin maleat, C[6Hi9CIN2.C4H40 4, bằng phương pháp sắc ký lỏng như phân Định lượng paracetamol và Định lượng clorpheniramin maleat.

Yêu cầu: Khơng được ít hơn 75 % (Q) lượng paracetamol,

CsHọN02, và clorpheniramin m aleat, C lâH 19C IN 2.C 4H 404,

so với lượng ghi trên nhãn được hòa tan trong 45 min.

Tạp chất Hên quan

Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3).

Chuần bị các dung dịch ngay trước khi dùng vả tránh ánh sáng.

Pha động: Hôn hợp gơm 250 thể tích methanoỉ (TT) có

DƯỢC DIÉN VIỆT NAM V chứa 4,6 g/1 dung dịch tetrabutylamoni hydroxyd 40 % ì

375 thể tích dung dịch dinatrì hydrophosphat 0,05 A/và Ị 375 thể tích dung dịch natri dihydrophosphat 0,05 M.

Dung dịch thứ: Cân chính xác một lượng bột thc tương ị

tương với khoảng 0,2 g paracetamol vào bình định mức 1 10 ml, thêm 8 ml pha động, lăc siêu âm, thêm pha động I vừa đủ thể tích, lắc đểu, lọc.

Dung dịch đối chiếu (ỉ): Pha loàng 1,0 ml dung dịch thủ I

thảnh 20,0 ml bàng pha động. Pha loãng 1,0 ml dung dịch I thu được thành 20,0 ml bằng pha động.

Dung dịch đối chiếu (2): Chứa 0,002 % 4-aminophenoỉ : (TT) và 0,002 % paracetamol chuân trong pha động.

Dung dịch đối chiêu (3)\ Pha loãng dung dịch chứa 0,02 % i 4 '-cỉoroacetaniỉid (TT) trong methanoỉ (TT) bằng pha động

để thu được dung dịch chứa 0,00002 % 4 ’-cloroacetanilid.

Diều kiện sắc kỷ:

Cột kích thước (25 cm X 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh B (5 pm). Cột Zorbax Rx C8 lả phù hợp.

Nhiệt độ cột: 35 °c.

Dctector quang phổ từ ngoại đặt ờ bước sóng 245 nm. Tốc độ dịng: 1,5 ml/min.

Thể tích tiêm: 20 Ịil. Ị

Cách tiến hành:

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký dung dịch đối chiểu (2), độ phân giải giữa 2 pic tương ứng với 4-aminophenol vả paracetamol khơng nhị hơn 4,0. - Tiến hành sắc ký dung địch thử với thời gian bàng 12 làn ị thời gian lưu của pic paracetamol.

Yêu câu: i

Trên sắc ký đồ thu được tù dung dịch thử: Pic tương ứng với ■ 4-aminopheno! khơng được có diện tích lớn hơn diện tích pic 4-aminophenol thu được trên sác kỷ đồ của dung dịch đối chiêu (2) (0,1 %). Pic tương ứng với 4 ’-cloroacetanilid khơng được có diện tích lớn hơn diện tích pic chính trên sắc ký đo của dung dịch đối chiếu (3) (10 ppm). Bất kỳ pic tạp nào khác khơng được có diện tích lớn hơn diện tích pic chính trên sắc ký đồ cùa dung dịch đối chiếu (1) (0,25 %).

Độ đồng đều hàm lượng (Phụ lục 11.2)

Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3).

Pha động, điều kiện sắc kỷ, cách tiến hành như mô tả trong

mục Định lượng clorpheniramin maleat.

Dung dịch thử: Lấv 1 viên nghiền thành bột mịn rồi chuyển Ị

vào bình định mức 250 ml, thêm 25 ml methanoỉ (TT), siêu âm cho bột phân tán hoàn toàn, thêm 1 ml acỉdphosphoric

(Tỉ), pha loãng với nước vừa đủ đến vạch, trộn đều. Dung dịch chuân: Tiến hành như mô tả trong mục Định

lượng clorpheniramin maleat. Pha loãng (nếu cần) để có được nồng độ clorpheniramin maleat tương ứng với nồng độ clorpheniramin maleat trong dung địch thử.

Tính hàm lượng ctorpheniramin malcat, C1ỐHI9C1N2.C4H404, trong một viên dựa vào diện tích pic trên sẳc ký đồ thu được từ dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng Ci6H19C1N2.C4H40 4 cùa clorpheniramin maleat chuẩn.

Định lượng paracetamol

Phương pháp sắc ký lòng (Phụ lục 5.3). 734

phơ độnơ: Nước - methanoỉ - ơcid acetic băng (79 : 20 : 1),

điêu chỉnh tỉ lệ nếụ cần.

dịch chuân: Cân chính xác khoảng 50 mg

paracetamol chuẩn vào bỉnh định mức 100 ml, thêm 4 ml

ethanoỉ /77), lăc cho tan hồn tồn, pha lỗng với dung đích ơcìdphosphohc ồ, ỉ % đến định mức, trộn đều. Dung dịch thứ: Cân 20 viên, tính khơi lượng trung bình

viên vả nghiền thành bột mịn, Cân chính xác một lượng bột viên tương ứng với khoảng 100 mg paracetamol vào bình định mức 50 ml, thêm khoảng 7,5 ml methanoỉ (77), siêu âm cho bột phân tán hoàn toàn, thêm 0,5 ml acid phosphoric (77), pha loãng với nước đến định mức, trộn

đều. Hút 25,0 ml dịch lọc cho vào bình định mức 100 ml, pha loẵng với nước đến định mức, trộn đều.

Biều kiện sắc kỷ:

Cơt kích thước ( i 5 em X 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh B (5 pm đến 10 Ịitn).

Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước sóng 280 nm. Tổc độ địng: 1 ml/min.

Thể tích tiêm: 10 pỉ.

Cách tiến hành:

Kiểm tra tính phù hợp của hệ thong: Tiến hành sắc ký với dung dịch ehuân, hệ sổ đối xứng của pic paracetamol không được lớn hem 2,0 và độ lệch chuẩn tương đổi của các diện tích pic đáp ứng từ 6 lần tiêm lặp lại không quá 2,0 %. Tiến hành sắc ký lần lượt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử.

Tính hàm lượng paracetamol, CgH9N 0 2, có trong viên dựa vào diện tích pic trên sắc ký đồ thu được từ dung dịch thừ, dung dịch chuẩn và hàm lượng C8H9N 0 2 của paracetamol chuẩn.

Định lượng dorphemramin maleat

Phương pháp sắc ký lồng (Phụ lục 5.3).

Pha động: Hồn hợp methanoỉ - nước (60 : 40) có chứa

0,34 g kaỉi dihỵdrophosphat (TT); 0,3 g trĩethylamin hydrocỉorid (77); 0,15 g natri lauryỉsuỉfat (77) và 0,1 ml acỉd phosphoric (TT) trong mỗi 100 ml dung dịch, điều

chỉnh tỉ lệ nêu cân.

Dung dịch chuẩn: Cân chính xác và hòa tan trong nước

một lượng clorpheniramin maleat chuẩn đế thu được dung địch có nồng độ khoảng 0,8 mg/ml. Tiếp tục pha loãng dung dịch này bằng dung dịch ơcid phosphoric 0,ỉ % để thu được dung dịch có nồng độ khoảng 8 Ịig/ml.

Dung dịch thử: Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình

Một phần của tài liệu VNRAS-12-DDVN5-TAP-1-CHUYEN-LUAN-HOA-DUOC-PHAN-OP (Trang 36 - 40)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(120 trang)