Phương pháp phân tích mẫu thực vật nổ

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) bước đầu đánh giá chất lượng môi trường nước và đa dạng thực vật nổi khu vực (Trang 31 - 32)

* Xác định thành phần loài thực vật nổi

Sau khi thu mẫu định tính đem quan sát và chụp ảnh dưới kính hiển vi quang học có độ phóng đại 100 - 1000 lần tại Phịng thí nghiệm Bộ mơn Thực vật, Khoa Sinh học, trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội. Trước khi phân tích mẫu nước lắc nhẹ lọ đựng mẫu cho sinh vật trộn đều nhau, sau đó lấy ống pipet pastear nhựa hút mẫu. Cho vào lame từ 1-2 giọt rồi đậy lamelle lại và quan sát dưới kính hiển vi. Định loại mẫu thực vật nổi bằng phương pháp so sánh hình thái, kích thước dựa trên các khóa định loại đã được công bố [1, 21, 27, 28, 30].

Một số mẫu TVN (ĐR01, 02, 03, 10, 11, 12, 13, 14) được chụp bằng kính hiển vi điện tử quét Nova nanosem 450 (fei) tại phòng Hiển vi điện tử, Khoa Vật lý, Trường Đại học Khoa học Tự Nhiên Hà Nội. Kính hiển vi này sử dụng các chùm electron quét trên bề mặt mẫu vật cộng với độ phóng đại lớn, kính cho ra hình ảnh ba chiều rõ nét các cấu trúc bề mặt với đơn vị nanomet. Trước khi quan sát TVN bằng kính hiển vi điện tử quét Nova nanosem 450, mẫu tảo silic được xử lý bằng phương pháp đốt. Lấy một lượng lắng ở lọ tương đương với 6ml đưa vào bình Keldal có dung tích 100ml. Nhỏ thêm vài giọt axit HCl 30% lắc đều để khử Ca2+. Thêm 18 ml axit H2SO4 đậm đặc, lắc đều sau đó đun trên ngọn lửa đèn cồn hoặc bếp điện trong thời gian 15- 20 phút, cho tiếp vài hạt tinh thể NaNO3 cho tới khi toàn bộ phần đun chuyển sang màu trắng và dung dịch bên trong trong suốt hoặc có màu vàng trong là được, sau đó để nguội, cho tồn bộ hỗn hợp trên vào ống ly tâm 50 ml có chứa nước cất để rửa mẫu. Ly tâm ở tốc độ 2500 vòng/phút và để lắng lấy phần cặn bên dưới. Bổ sung thêm nước cất và lặp lại các bước rửa mẫu 5 lần. Mẫu sau khi tẩy rửa chỉ còn lại vỏ tảo Silic, các tạp chất vô cơ khác và dùng để quan sát dưới kính hiển vi điện tử quét SEM [17].

* Xác định mật độ thực vật nổi: Đi ̣nh lượng mẫu TVN bằng buồng đếm Goriaev với

dung tích 0,0009ml, chia thành 225 ơ vng nhỏ có diện tích 1/400mm2, chiều cao mỗi ô là 1/10mm. Lấy một giọt mẫu nhỏ vào buồng đếm, đậy lamen và soi dưới

kính hiển vi. Đếm 3 lần rồi lấy giá trị trung bình. Mật độ TVN được tính theo cơng thức [14]

Số lượng tế bào trong 1 lít mẫu =Số lượng tế bào trong một buồng đếm x Thể tích mẫu 0,0009x 20 lít (Thể tích nước lọc qua lưới)

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) bước đầu đánh giá chất lượng môi trường nước và đa dạng thực vật nổi khu vực (Trang 31 - 32)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(104 trang)