CHƢƠNG 4 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.2 ĐIỀU CHẾ CÁC PHẦN CHIẾT TỪ HẠT NA
Phƣơng pháp chiết ảnh hƣởng rất lớn đến việc phân lập các hợp chất hữu cơ thuộc lớp chất hữu cơ mong muốn. Trong nghiên cứu này, nhằm đạt đƣợc sự làm giàu sơ ộ các hợp chất acetogenin theo độ phân cực trong các phần chiết riêng biệt, nguyên liệu hạt Na đƣợc xử lí theo hai quy trình chiết: quy trình chung chiết với MeOH và quy trình chiết cho sàng lọc sinh học các phần chiết của Viện nghiên cứu Ung thƣ quốc gia Hoa Kỳ (NCI) với hỗn hợp CH2Cl2/MeOH 1:1. Các phần chiết MeOH và CH2Cl2/MeOH đƣợc phân tách hai pha lỏng chọn lọc giữa nƣớc với các dung mơi có độ phân cực tăng dần: n-hexan, diclometan và etyl axetat.
Các quy trình này phân tách các hợp chất trong hạt cây Na thành ba nhóm hợp chất có độ phân cực khác nhau:
Nhóm các hợp chất ít phân cực và các chất dễ ay hơi trong phần chiết n-hexan;
Nhóm các hợp chất phân cực trung bình trong phần chiết diclometan;
Nhóm các hợp chất phân cực trung bình trong phần chiết etyl axetat;
Nhóm các hợp chất phân cực trong phần chiết nƣớc.
Hiệu suất điều chế các phần chiết đƣợc nêu trong các Bảng 4.1 và 4.2
Để đánh giá chi tiết về các acetogenin trong các phần chiết nhận đƣợc từ hai phƣơng pháp, các phần chiết diclometan AS1D và AS2D đã đƣợc phân tách theo hai qui trình khác nhau, sau đó các chất đƣợc phân lập từ AS1D đƣợc đánh giá so sánh với các chất trong các phân đoạn phân tách từ AS2D bằng phân tích TLC.
Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu cơ – K22
Bảng 4.1. Hiệu suất thu nhận các phần chiết từ hạt Na (phƣơng pháp chiết 1)
STT Phần chiết Kí hiệu Khối lƣợng (g) Hiệu suất (%)
1 n-Hexan AS1H 66,8 5,57
2 Diclometan AS1D 30,1 2,51
3 Etyl axetat AS1E 3,6 0,30
Bảng 4.2. Hiệu suất thu nhận các phần chiết từ hạt Na (phƣơng pháp chiết 2)
STT Phần chiết Kí hiệu Khối lƣợng (g) Hiệu suất (%)
1 n-Hexan AS2H 176,7 5,89
2 Diclometan AS2D 14,4 0,48
Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu cơ – K22
Quy trình điều chế các phần chiết từ hạt Na đƣợc trình bày ở Sơ đồ 4.1
Sơ đồ 4.1. Quy trình điều chế các phần chiết từ hạt quả Na
Nguyên liệu hạt Na tƣơi
1. Phơi khô, sấy ở 40-50 o
C 2. Nghiền thành bột mịn
Bột hạt khô
1. Ngâm chiết với MeOH (CH2Cl2/MeOH), nhiệt độ phòng 2. Cất loại MeOH (hoặc CH2Cl2/MeOH) dƣới áp suất giảm 3. Thêm nƣớc cất Dịch nƣớc (AS) 1. Chiết bằng n-hexan 2. Làm khô bằng Na2SO4 3. Cất loại n-hexan Dịch nƣớc AS1H (AS2H) 1. Chiết bằng diclometan 2. Làm khô bằng Na2SO4 3. Cất loại diclometan Dịch nƣớc
1. Chiết bằng etyl axetat 2. Làm khô bằng Na2SO4 3. Cất loại etyl axetat
AS1E (AS2E) Dịch nƣớc Phần chiết nƣớc Cất kiệt nƣớc AS1D (AS2D)
Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu cơ – K22