Chƣơng 1 : TỔNG QUAN
2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu
2.4.4 Kỹ thuật định danh vi khuẩn
Định danh các lồi Streptococci + Streptococcus nhóm viridans (α):
- Nhuộm Gram: hình ảnh cầu khuẩn Gram dương xếp chuỗi hoặc xếp đơi, kích thước 0,6-1µm
- Trên môi trường thạch máu cừu: khuẩn lạc trong, có vịng tan máu α
- Không di động - Catalase (-)
- Esculin (-) hoặc (+)
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20 Strep hoặc máy định danh tự động Phoenix.
- Nhuộm Gram: hình ảnh cầu khuẩn Gram dương thường xếp chuỗi hoặc xếp đơi, kích thước 0,6-1µm .
- Trên mơi trường thạch máu, vi khuẩn phát triển thành khuẩn lạc nhỏ, trịn, lồi, màu hơi xám, có vịng tan máu hồn tồn β - Catalase (-)
- Không di động - VP (-)
- Barcitracin (+) đối với liên cầu nhóm A
- Xác định kháng nguyên bằng thử nghiệm ngưng kết với kháng huyết thanh liên cầu để xác định nhóm A, B, C, D, G - Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20 Strep hoặc máy
định danh tự động Phoenix.
Staphylococci
- Nhuộm Gram: Hình ảnh cầu khuẩn Gram dương xếp bốn hoặc xếp đám hình chùm nho, kích thước 0,8-1,0 µm.
- S. aureus
+ Trên mơi trường thạch máu, khuẩn lạc trịn, ướt, bóng, có sắc tố vàng, có vịng tan máu hồn tồn.
+ Catalase (+) + Coagulase (+)
+ Lên men đường mannitol + Tan máu β
+ Catalase (+) + Coagulase (-)
+ Không lên men đường mannit + Không tan máu β
+ Xác định tính chất sinh vật học bằng API Staph hoặc máy định danh tự động Phoenix.
Streptococcus pneumoniae
- Nhuộm Gram: Hình ảnh song cầu Gram dương hình ngọn nến, thường xếp thành đơi, ít khi đứng riêng lẻ, đường kính khoảng 0,5- 1,25µm.
- Trên môi trường thạch máu, khuẩn lạc trịn, bóng, trong như giọt sương, xung quanh có có vịng tan máu α
- Optochin (+) đường kính vịng vơ khuẩn >14mm - Catalase (-)
- Bị ly giải bởi muối mật
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API Strep hoặc máy định danh tự động Phoenix.
Enterococci:
- Nhuộm Gram: Hình ảnh cầu khuẩn Gram (+), xếp thành đôi hoặc chuỗi ngắn.
- Trên môi trường thạch máu khuẩn lạc nhỏ, bóng, xung quanh có vịng tan máu α hoặc γ. Một vài chủng E. faecalis có thể gây tan
máu β trên môi thạch máu (máu thỏ, máu ngựa, máu người), nhưng không tan máu cừu
- Esculin (+)
- Catalase (-)
- Phát triển trong môi trường canh thang muối 6,5%
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20 Strep hoặc máy định danh tự động Phoenix.
Enterobacteriaceae (họ vi khuẩn đường ruột)
- Nhuộm Gram: Hình ảnh trực khuẩn Gram âm, kích thước 2-4 µm x 0,4-0,6 µm.
- Trên mơi trường đặc có ba dạng khuẩn lạc dạng S, R, M, đường kính 2-3 mm
- Oxydase (-)
- Lên men đường glucose - Không sinh nha bào
- Sinh hơi hoặc không sinh hơi khi lên men đường - Có thể di động hoặc khơng di động
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20E hoặc máy định danh tự động Phoenix.
Pseudomonadaceae
- Nhuộm Gram: Hình ảnh trực khuẩn Gram âm, thẳng hoặc hơi cong - Di động (+) trừ Burkholderia mallei
- Hiếu khí
- Mọc trong khoảng nhiệt độ 4-430 C
- Catalase (+)
- Trên môi trường đặc, P. earuginosa có thể gặp 2 loại khuẩn lạc: một loại to, nhẵn, bờ trải, giữa lồi; một loại khác thì xù xì; cũng có khi gặp loại thứ ba, khuẩn lạc nhày. Tính chất đặc trưng của trực khuẩn mủ xanh là sinh sắc tố và chất thơm.
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20 NE hoặc máy định danh tự động Phoenix.
Acinetobacter
- Nhuộm Gram: Cầu trực khuẩn Gram âm, thường đứng ở dạng đôi hoặc chuỗi dài ngắn khác nhau.
- Trên môi trường thạch máu: khuẩn lạc lồi, nhẵn, đôi khi hơi nhày, màu hơi trắng xám. Đường kính khuẩn lạc A. baumannii từ 1-3mm, các Acinetobacter khác khuẩn lạc nhỏ hơn
- Không di động - Oxydase (-)
- Catalase (+)
- Citrate (-)
- Nitrate (-)
- Xác định tính chất sinh vật học bằng API 20NE hoặc máy định danh tự động Phoenix.