Xác định độ không đảm bảo thành phần
- Trong nghiên cứu này, với bình định mức cấp A 10 mL có dung sai ±0,2 mL (từ thông tin kỹ thuật đƣợc cung cấp), các giá trị phân bố
K Cmẫu ΔC S0; Sst H m Độ tinh khiết (P) Khối lƣợng chuẩn Độ chụm Độ chụm Độ chụm Thể tích (V) Độ chụm Thể tích Độ chụm Hiệu chuẩn Hiệu chuẩn Thể tích nƣớc Khối lƣợng mẫu
khơng giống nhau trên tồn khoảng chia, do đó, giả định phân bố hình tam giác thì độ khơng đảm bảo đo là
√
- Tƣơng tự, với bình định mức 25 mL cấp A có dung sai ±0,08 mL, độ khơng đảm bảo đo là
√
- Cân phân tích với khả năng đọc trong khoảng ±0,0001 g. Từ bảng phân bố chuẩn, với độ tin cậy 95%, độ khơng đảm bảo đƣợc tính là .
- Khi độ tinh khiết của chất chuẩn đƣợc chứng nhận có độ chính xác ±a, giả định phân bố hình chữ nhật, độ khơng đảm bảo
√
- Độ chụm (độ lặp lại): giá trị độ lệch chuẩn (SD) của q trình phân tích lặp lại có thể sử dụng trực tiếp làm độ không đảm bảo chuẩn. Độ không đảm bảo chuẩn đƣợc tính từ các giá trị độ khơng đảm bảo thành phần theo nguyên tắc tƣơng tự nhƣ lan truyền sai số.
Tính tốn độ khơng đảm bảo chuẩn tổng hợp
Độ không đảm bảo đo chuẩn tổng hợp đƣợc ƣớc lƣợng từ độ không đảm bảo chuẩn thành phần theo lan truyền độ khơng đảm bảo và đƣợc tính theo cơng thức 2.6.
√( ) ( ) ( ) (
) ( )
Báo cáo kết quả với độ không đảm bảo đo mở rộng
Kết quả hàm lƣợng chất phân tích trong mẫu (Cmẫu) đƣợc báo cáo dƣới dạng:
Với: U là độ không đảm bảo đo mở rộng đƣợc xác định từ độ không đảm bảo chuẩn tổng hợp với hệ số phủ k = 2 (ở độ tin cậy 95%), U = 2 .
2.3. Hóa chất và thiết bị
Hóa chất 2.3.1.
- Natri pyrophosphat (Na4P2O7, Sigma, 95%)
Các loại hóa chất khác
- L-Arginin (C6H14N4O2) (Fluka, hàm lƣợng > 99,5%) - L - Histidin( C6H9N3O2) ( Fluka, hàm lƣợng 99,5%) - Natri hydroxyd (NaOH), (Merck, Đức)
- L-Ascorbic (Sigma, 99%)
- Acid clohydric (HCl) (Merck, Đức)
- Acid acetic (CH3COOH), (PA, Merck, Đức)
- Nƣớc nƣớc deion: là nƣớc cất hai lần đƣợc lọc qua bộ lọc siêu tinh khiết có cột trao đổi cation, anion và màng lọc 0,2 μm.
Các hóa chất sử dụng trong nghiên cứu đều thuộc loại tinh khiết phân tích (P.A).
Chuẩn bị các dung dịch hóa chất 2.3.2.
Pha dung dịch chuẩn gốc Natri polyphosphat và Natri pyrophosphat 1000 ppm
Cân chính xác 0,0294g Natri tripolyphosphat hoặc 0,0263g Natri pyrophosphat, chuyển vào bình định mức 25,0 mL, thêm khoảng 15mL nƣớc deion, lắc đều đến khi tan hết chất rắn, sau đó định mức đến vạch bằng nƣớc deion.
Dung dịch chuẩn gốc 1000 ppm đƣợc bảo quản trong chai PE ở nhiệt độ phòng trong vòng một tháng.
Các dung dịch chuẩn làm việc đƣợc chuẩn bị từ dung dịch chuẩn gốc bằng cách pha loãng với nƣớc deion.
Pha dung dịch đệm
Các dung dịch đệm điện di Arg/ace; His/ace; và Arg/asc đƣợc pha bằng cách cân một lƣợng chính xác hợp phần bazơ là Arg hoặc His, chuyển vào bình định mức, thêm khoảng 15mL nƣớc deion, lắc đều cho chất rắn tan hết, định mức đến vạch. Sau đó, dung dịch đƣợc chỉnh đến pH cần thiết bằng acid acetic hoặc acid ascorbic.
Tất cả các dung dịch đều đƣợc rung siêu âm và chỉnh lại giá trị pH trƣớc khi sử dụng. Dung dịch đệm đƣợc pha mới hàng ngày.
Thiết bị dụng cụ 2.3.3.
Thiết bị phân tích sử dụng trong nghiên cứu là hệ CE-C4D tự chế, bán tự động (Hình 2.4) đƣợc thiết kế lắp đặt với sự tài trợ của Công ty 3Sanalysis và đối tác tại khoa Hóa học, trƣờng Đại học Basel, Thụy Sĩ.