CHƯƠNG 2 : NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
2.2. Phương pháp
2.2.3. Bố trí các nhóm thi ghiệm và quy trình nuôi tôm
Để đánh giá khả năng lưu trú của bào tử B. aquimaris SH6 trong ruột tơm và
hoạt tính probiotic của chúng đối với tôm thẻ chân trắng (L. vannamei) với các chỉ số cụ thể như: tăng trọng lượng, tăng hàm lượng astaxanthin, màu sắc và các chỉ tiêu miễn dịch, chúng tôi thiết kế và thực hiện thí nghiệm với 4 nhóm thí nghiệm gồm: “ĐC”, “Carophyll”, “SH6 spore”, “SH6 carotenoid” trong thời gian 28 ngày, các thời điểm thu mẫu và số lượng mẫu được trình bày chi tiết trong các phần thiết kế thí nghiệm. Mỗi nhóm thí nghiệm gồm 70 tơm được nuôi trong 2 bể. Tơm được ni tại phịng Sinh học Nano và Ứng dụng - Phịng thí nghiệm Trọng điểm Cơng nghệ enzyme và protein - Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, nhiệt độ trong phịng được kiểm sốt và
giữ liên tục ở khoảng 26-28°C, pH 7,5-8,5. Bể ni tơm được sục khí liên tục để đảm bảo cung cấp đủ oxy cho tôm, nước nuôi tôm được lọc liên tục và thay định kỳ 5 ngày (tối đa 30 % nước). Quy trình kỹ thuật ni tơm đươc tham khảo trong một số nguồn tài liệu, sách “Kỹ thuật nuôi tôm thẻ chân trắng” của tác giả Thái Bá Hồ, và một số nghiên cứu đã có về tơm thẻ chân trắng và tối ưu hóa theo điều kiện sẵn có ở phịng thí nghiệm [3, 48]. Mơ hình bể ni tơm trong điều kiện phịng thí nghiệm được thể hiện trong Hình 2.4 .
Hình 2.4 : Mơ hình bể ni tơm trong quy mơ phịng thí nghiệm
Cụ thể, mỗi bể tơm có dung tích 45 l, chứa 25 l nước với độ mặn 16‰ được vận hành bằng hệ thống sục khí liên tục đảm bảo lượng oxy hòa tan trong nước đủ cung cấp cho tơm trong suốt q trình ni; bơm tuần hồn được lắp đặt (nối với thiết bị chứa bông lọc) để lọc nước bể ni tơm một cách tuần hồn và liên tục, loại bỏ các chất cặn bã trong bể nuôi tôm như: phân tôm, thức ăn thừa, lưu ý tắt bơm trong khoảng 1 h đầu cho tôm ăn để tránh hiện tượng lọc bỏ thức ăn của tơm. Hệ thống các bể ni tơm được bố trí trong phịng thí nghiệm như Hình 2.5. Tơm được cho ăn trong 28 ngày với thức ăn đã mã hóa (xem mục 2.2.2) 3 lần/ngày, mỗi ngày 2-3 g. Quan sát, theo dõi tình trạng
sức khỏe, vận động và khả năng ăn của tôm hàng ngày để đảm bảo phát hiện kịp thời những thay đổi về sức khỏe của tơm để có những điều chỉnh phù hợp.
Hình 2.5: Bể ni tơm trong điều kiện phịng thí nghiệm.
A - Đại diện hệ thống các bể ni tơm quy mơ phịng thí nghiệm. B - Đại diện một bể ni tơm có hệ thống sục khí và bơm
Phương pháp và nguyên tắc thu mẫu:
Tiến hành thu mẫu tôm một cách ngẫu nhiên tại các thời điểm xác định, phụ thuộc vào tính chất mỗi thí nghiệm, 03 mẫu tơm trên một nhóm thí nghiệm. Sử dụng bộ dụng cụ (dao, kéo, kẹp, …) đã khử trùng để giải phẫu tôm, các bộ phận cần thiết được giải phẫu cẩn thận, cho vào ống eppendoft 2 ml vô trùng, sử lý ngay lập tức hoặc bảo quản lạnh ở -80°C để đảm bảo duy trì tính chất mẫu.