.3 Phương pháp pha loãng thập phân

Một phần của tài liệu Nghiên cứu xử lý tổng coliform trong bùn thải bằng phương pháp chiếu xạ gamma co 60 và vi sóng viba (Trang 56 - 59)

- Tiến hành c y mẫu

Chuẩn bị môi trường VRBL để chuẩn bị đổ đĩa.

Chuyển 1ml dung dịch mẫu ở các nồng đ pha loãng trên vào đĩa petri vô trùng. Mỗi nồng đ pha loãng thực hiện trên 3 đĩa Petri.

Đổ kho ng 10ml môi trường VRBL vào đĩa petri.

Lắc tròn đĩa petri xuôi và ngược chiều kim đồng hồ, mỗi chiều 3-5 lần để tr n đều dung dịch mẫu với môi trường.

Để ở nhiệt đ phòng trong 1-2 giờ để hồi phục các tế bào bị tổn thương.

Sau đ cho môi trường đông hoàn toàn, đổ thêm 10mlVRBL.

Để đông hoàn toàn, lật ngược đĩa và nuôi ủ ở 37 ± 1oC trong 24 ± 3h. Ghi vào đáy đĩa petri các thông tin: nồng đ pha loãng, ngày c y…

Đếm các đĩa c số khuẩn lạc dưới 100 sau 24h nuôi c y.

Khuẩn lạc Coliform c màu đỏ tía, đường kính 0,5mm, đôi khi được bao quanh bởi 1 vùng hơi đỏ do tủa.

Tính giá trị trung bình từ các đĩa c cùng nồng đ pha loãng để tính số Coliform trong 1 gam mẫu.

- Công thức tính mật đ Coliform

Mật đ tế bào vi sinh vật trong mẫu ban đầu tính từ số liệu của đ pha loãng Di được tính theo công thức (2-2).

X = Aix Di/V (CFU/g) (2-2)

Trong đ : X là Mật đ Coliform nghi ngờ (CFU/g); Ai là số khuẩn lạc trung bình/đĩa; Dilà đ pha loãng; V là dung dịch huyền phù tếbào cho vào mỗi đĩa (ml).

2.2.3.2Phương pháp thử nghiệm khẳng định Coliforms

-Địa điểm phân tích mẫu tại Trung tâm Khoa học và Công nghệ Sinh học – Trường Đại học Khoa học tự nhiên Tp.HCM -Thiết bị, dụng cụ: Ống nghiệm Ống Durham Đèn cồn Tủ c y vô trùng Tủ m

-Môi trường và hóa ch t

Môi trường BGBL: Cân 40g b t môi trường BGBL + 1000 ml nước c t, khu y đều, phân phối vào các ống nghiệm, h p khử trùng ở 1210C, trong 15-21 phút.

Cồn 96%

-Tiến hành c y chuyền

Dùng que c y vòng c y chuyền sang các ống nghiệm chứa môi trường BGBL (trường hợp khẳng định Coliforms tổng số) và ống Durham úp ngược.

Ủ các ống BGBL ở 37±1oC trong 24 – 48 giờ. -Đọc kết qu

Kết qu khẳng định là (+) khi vi khuẩn tăng trưởng làm đục môi trường và sinh hơi trong ống Durham.

Tính tỉ lệ khẳng định là tỉ số giữa số khuẩn lạc cho kết qu (+) với số khuẩn lạc được dùng trong thử nghiệm khẳng định.

- Công thức khẳng định lại mật đ Coliform:

Coliform tổng = X xn (CFU/g) (2-3)

Trong đ : X là lượng Coliform nghi ngờ(CFU/g); n là tỷ lệ khẳng định ( bằng số ống nghiệm cho kết qu (+) so với khuẩn lạc được dùng trong thí nghiệm )

2.2.4 Phương pháp dùng sóng Viba xử lý Coliform trong bùn thải

-Địa điểm phân tích mẫu: Trung tâm Khoa học và Công nghệ Sinh học – Trường Đại

học Khoa học tự nhiên Tp.HCM. -Thiết bị, dụng cụ:

Phễu thủy tinh Lọ thủy tinh Cân phân tích Lò Viba

Đồng hồ b m giờ

Nguyên tắc:Với tần số thường là 2,45GHZ, s ng vi ba dễ bị h p thụ bởi nước. Các s ng bên trong lò sẽ được phát ở đúng tần số để c thể đi sâu vào trong mẫu và truyền hầu hết năng lượng cho lượng nước bên trong mẫu. Các loại ch t rắn ít nước hầu như không h p thụ s ng vi ba. S ng vi ba làm n ng mẫu bằng cách xoay các phân tử nước qua lại 2,5 tỷ lần trong m t giây. Và trong quá trình xoay qua xoay lại, các phân tử nước sẽ cọ xát vào

nhau. Điều này tạo ra ma sát, là nguồn s n sinh nhiệt năng. Kh năng diệt khuẩn của vi s ng chính là nhờ vào lượng nhiệt năng này. Vi s ng làm n ng c bên trong và bên ngoài mẫu cùng m t lúc nên đ m b o rằng vi khuẩn bị diệt hoàn toàn với 1 kho ng thời gian tiếp xúc đủ lớn.

Hình 2.4 Lò Viba SHARP R-21A1(S)VNThông sốkỹthuật:

Một phần của tài liệu Nghiên cứu xử lý tổng coliform trong bùn thải bằng phương pháp chiếu xạ gamma co 60 và vi sóng viba (Trang 56 - 59)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(61 trang)