CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN VỀ CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU
2.5. Phương pháp phân tích
2.5.1. Xác định khối lượng EPS thu được
EPS trong dịch thu lại sau ly tâm được tinh sạch bằng cách kết tủa trong Ethanol lạnh với tỷ lệ thể tích là 2 ethanol : 1 mẫu và để ở nhiệt độ -20oC qua đêm. Mẫu sau kết tủa được ly tâm với lực ly tâm 4000rpm ở 4oC (Rotina 420R, Hettich Zentrifugen) trong 15 phút để thu EPS tinh sạch. Khối lượng của EPS được xác định bằng phương pháp trọng lượng sau khi sấy khô tới trọng lượng không đổi ở nhiệt độ từ 50oC tới 60oC.
2.5.2. Phân tích hàm lượng protein, polysaccharide và acid nucleic trong polymer ngoại bào ngoại bào
EPS trong dịch sau ly tâm được kết tủa trong ethanol lạnh với quy trình, ly tâm (Rotina 420R, Hettich Zentrifugen), loại bỏ phần dịch lỏng. Phần EPS kết tủa được hòa tan trong nước cất tới thể tích ban đầu. Dung dịch này được sử dụng để phân tích protein, polysaccharide và nucleic acids. Protein được phân tích bằng phương pháp Lowry với dung dịch chuẩn là BSA (Bovine Serum Albumin) [24]. Cacbonhydrate được xác định theo phương pháp Phenol – axit Sulfuric với dung dịch chuẩn là glucose [25]. Axit nucleic được phân tích bằng phương pháp Dyphenylamin.
2.5.3. Đo phổ hồng ngoại
Xác định nhóm chức trong EPS bằng phổ hồng ngoại IR: EPS được tinh sạch bằng cách kết tủa trong ethanol, sau đó sấy khô ở nhiệt độ 50oC. 0,1 - 0,2 mg mẫu sau khi đã sấy khô được trộn và nghiền kỹ với 100mg KBr. Sau đó, ép mẫu trên máy có lực ép 5 tấn để tạo viên. Mẫu sau khi tạo viên được cho lên cửa sổ máy quang phổ hồng ngoại để xác định thành phần nhóm chức.
2.5.4. Phân tích xác định Cu2+ bằng phương pháp phổ hấp phụ nguyên tử AAS theo
TCVN 6193: 1996
- Phân tích xác định Cu2+ bằng phương pháp phổ hấp phụ nguyên tử theo TCVN 6193: 1996 trên thiết bị AAS- Thermo Fisher – Solar M6, tại Khoa Môi Trường- Trường Đại học Tài nguyên và Môi trường Hà Nội.
- Phân tích xác định Cu2+ bằng phương pháp đo quang trên thiết bị đo quang phổ UV-VIS, tại phòng giải pháp công nghệ cải thiện môi trường – Viện Công nghệ Môi trường