Xỏc định muối maleat kiềm húa dung dịch nước của chế phẩm bằng dung dịch NaOH loóng; tỏch riờng clopheninamin bazơ bằng ete (chiết 3 lần). Lấy một phần lớp nước (cú chứa muối maleat) thờm dung dịch resorcinol trong axit sunfuric đặc. Đun cỏch thủy 15 phỳt; khụng xuất hiện màu. Lấy phần cũn lại của lớp nước, thờm nước brom, đun cỏch thủy 15 phỳt, để nguội rồi thờm dung dịch resorcinol trong axit sunfuric đặc và đun cỏch thủy như trờn thỡ xuất hiện màu xanh.
Dung dịch chế phẩm, thờm dung dịch axit picric (1%), cú kết tủa picrat pheninamin; lọc lấy kết tủa rửa và kết tinh lại trong etanol 50%; lấy kết tủa sấy khụ; đo độ chảy được 196-2000
C [3].
Tớnh chất
Clopheninamin maleat là bột tinh thể trắng, khụng mựi. Tan trong nước pH = 4-5; etanol 96 %, cloroform; ớt tan trong ete, benzen.
Clopheninamin maleat chuyển húa nhanh và nhiều. Cỏc chất chuyển húa gồm cú desmethyl - didesmethyl- clopheninamin và một số chất chưa được xỏc định, một hoặc nhiều chất trong số đú cú hoạt tớnh.
Dƣợc lý và cơ chế tỏc dụng: Clopheninamin maleat là một khỏng histamin cú rất ớt tỏc dụng an thần. Như hầu hết cỏc khỏng histamin khỏc, clopheninamin
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
maleat cũng cú tỏc dụng phụ chống tiết axetylcholin, nhưng tỏc dụng này khỏc nhau nhiều giữa cỏc cỏ thể.
Tỏc dụng khỏng histamin của clopheninamin maleat thụng qua phong bế cạnh tranh cỏc thụ thể H1của cỏc tế bào tỏc động.
Dược động học
Clopheninamin maleat hấp thu tốt khi uống và xuất hiện trong huyết tương trong vũng 30 - 60 phỳt. Nồng độ đỉnh huyết tương đạt được trong khoảng 2,5 đến 6 giờ sau khi uống. Khả dụng sinh học thấp, đạt 25 - 50%. Khoảng 70% thuốc trong tuần hoàn liờn kết với protein. Thể tớch phõn bố khoảng 3,5 lớt/kg (người lớn) và 7 - 10 lớt/kg (trẻ em).
Nồng độ clopheninamin maleat trong huyết thanh khụng tương quan đỳng với tỏc dụng khỏng histamin vỡ cũn một chất chuyển húa chưa xỏc định cũng cú tỏc dụng. Thuốc được bài tiết chủ yếu qua nước tiểu dưới dạng khụng đổi hoặc chuyển húa, sự bài tiết phụ thuộc vào pH và lưu lượng nước tiểu. Chỉ một lượng nhỏ được thấy trong phõn. Thời gian bỏn thải là 12 - 15 giờ ở người bệnh suy thận mạn kộo dài tới 280 - 330 giờ. Một số viờn nộn clopheninamin maleat được bào chế dưới dạng tỏc dụng kộo dài, dưới dạng viờn nộn 2 lớp. Lớp ngoài được hũa tan và hấp thu giống như viờn nộn thụng thường. Lớp trong chỉ được hấp thu sau 4 - 6 giờ. Tỏc dụng của những viờn nộn kộo dài bằng tỏc dụng của hai viờn nộn thụng thường, uống cỏch nhau khoảng 6 giờ.
Chỉ định
Viờm mũi dị ứng mựa và quanh năm.
Những triệu chứng dị ứng khỏc như: mày đay, viờm mũi vận mạch do histamin, viờm kết mạc dị ứng, viờm da tiếp xỳc, phự mạch, phự quincke, dị ứng thức ăn, phản ứng huyết thanh; cụn trựng đốt; ngứa ở người bệnh bị sởi hoặc thủy đậu.
Hiện nay, clopheninamin maleat thường được phối hợp trong một số chế phẩm bỏn trờn thị trường để điều trị triệu chứng ho và cảm lạnh. Tuy nhiờn, thuốc khụng cú tỏc dụng trong điều trị triệu chứng nhiễm virus.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Chống chỉ định
Quỏ mẫn với clopheninamin maleat hoặc bất cứ thành phần nào của chế phẩm, người bệnh đang cơn hen cấp, người bệnh cú triệu chứng phỡ đại tuyến tiền liệt, glocom gúc hẹp, loột dạ dày chớt, tắc mụn vị - tỏ tràng.
Người cho con bỳ, trẻ sơ sinh và trẻ đẻ thiếu thỏng
Thận trọng
Clopheninamin maleat cú thể làm tăng nguy cơ bớ tiểu tiện do tỏc dụng phụ chống tiết axetylcholin của thuốc, đặc biệt ở người bị phỡ đại tuyến tiền liệt, tắc đường niệu, tắc mụn vị tỏ tràng, và làm trầm trọng thờm ở người bệnh nhược cơ.
Tỏc dụng an thần của clopheninamin maleat tăng lờn khi uống rượu và khi dựng đồng thời với cỏc thuốc an thần khỏc.
Cú nguy cơ biến chứng đường hụ hấp, suy giảm hụ hấp và ngừng thở, điều đú cú thể gõy rắc rối ở người bị bệnh tắc nghẽn phổi hay ở trẻ em nhỏ. Phải thận trọng khi cú bệnh phổi mạn tớnh, thở ngắn hoặc khú thở.
Cú nguy cơ bị sõu răng ở những người bệnh điều trị thời gian dài, do tỏc dụng chống tiết axetylcholin, gõy khụ miệng.
Thuốc cú thể gõy ngủ gà, chúng mặt, hoa mắt, nhỡn mờ, và suy giảm tõm thần vận động trong một số người bệnh và cú thể ảnh hưởng nghiờm trọng đến khả năng lỏi xe hoặc vận hành mỏy. Cần trỏnh dựng cho người đang lỏi xe hoặc điều khiển mỏy múc.
Trỏnh dựng cho người bệnh bị tăng nhón ỏp như bị glocom.
Dựng thuốc thận trọng với người cao tuổi (> 60 tuổi) vỡ những người này thường tăng nhạy cảm với tỏc dụng chống tiết axetylcholin.
Chỉ dựng cho người mang thai khi thật cần thiết. Dựng thuốc trong 3 thỏng cuối của thai kỳ cú thể dẫn đến những phản ứng nghiờm trọng (như cơn động kinh) ở trẻ sơ sinh.
Thời kỳ cho con bỳ clopheninamin maleat cú thể được tiết qua sữa mẹ và ức chế tiết sữa. Vỡ cỏc thuốc khỏng histamin cú thể gõy phản ứng nghiờm trọng với trẻ bỳ mẹ, nờn cần cõn nhắc hoặc khụng cho con bỳ hoặc khụng dựng thuốc, tựy thuộc mức độ cần thiết của thuốc đối với người mẹ.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Tƣơng tỏc thuốc
Cỏc thuốc ức chế monoamin oxydat làm kộo dài và tăng tỏc dụng chống tiết axetylcholin của thuốc khỏng histamin.
Etanol hoặc cỏc thuốc an thần gõy ngủ cú thể tăng tỏc dụng ức chế hệ thần kinh trung ương của clopheninamin maleat. Clopheninamin maleat ức chế chuyển húa phenytoin và cú thể dẫn đến ngộ độc phenytoin.
Quỏ liều và xử trớ
Liều gõy chết của clopheninamin maleat khoảng 25 - 50 mg/kg thể trọng. Những triệu chứng và dấu hiệu quỏ liều bao gồm an thần, kớch thớch nghịch thường hệ thần kinh trung ương, loạn tõm thần, cơn động kinh, ngừng thở, co giật, tỏc dụng chống tiết axetylcholin, phản ứng loạn trương lực và trụy tim mạch, loạn nhịp.
éiều trị triệu chứng và hỗ trợ chức năng sống, cần chỳ ý đặc biệt đến chức năng gan, thận, hụ hấp, tim và cõn bằng nước, điện giải.
Rửa dạ dày hoặc gõy nụn. Sau đú, cho dựng than hoạt tớnh và thuốc tẩy để hạn chế hấp thu.
Khi gặp hạ huyết ỏp và loạn nhịp, cần được điều trị tớch cực. Cú thể điều trị co giật bằng tiờm tĩnh mạch diazepam hoặc phenytoin và phải truyền mỏu trong những ca nặng.
Một số chế phẩm tại Việt Nam
- Chế phẩm viờn nộn: Coldacmin, Panactol enfant, Tro-padol-Flu, Triam-Fort ... - Chế phẩm viờn đạn: Calmezin, Amecol C, Coldacmin, Corypadol... - Chế phẩm siro: Dibigen....
- Chế phẩm gúi bột: ACE, Babyplex, Pamin... - Cỏc chế phẩm kết hợp với cỏc thuốc khỏc
1.3.3. Một số loại chế phẩm chứa paracetamol và clopheninamin maleat trờn thị trường hiện nay trường hiện nay
1.3.3.1. Thuốc Detazofol
SĐK: VNA-4212-01
Dạng thuốc: Viờn nộn Đúng gúi: hộp 10 vỉ x 20 viờn/vỉ
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Nhà sản xuất: Cụng ty cổ phần Dược phẩm H Nội.
Nhúm dược lý: Thuốc giảm đau, hạ sốt, nhúm chống viờm khụng steroit, thuốc điều trị gỳt và cỏc bệnh xương khớp
Thành phần: paracetamol, clopheniamin maleat.
1.3.3.2. Thuốc slocol
Dạng thuốc: Viờn nộn Đúng gúi: Hộp 1 chai x 100 viờn nộn.
Hộp 25 vỉ x 10viờn nộn.
Nhà sản xuất: Cụng ty cổ phần Dược phẩm Hậu Giang .
Nhúm Dược lý: Thuốc giảm đau, hạ sốt, nhúm chống viờm khụng steroit, thuốc điều trị gỳt và cỏc bệnh xương khớp
Thành phần: paracetamol, clopheninamin maleat.
1.3.3.3. Thuốc coldtefyy
Dạng thuốc: Viờn nộn Đúng gúi: Hộp 25 vỉ x 4 viờn.
Hộp 25 vỉ x 10viờn nộn.
Nhà sản xuất: Cụng ty cổ phần Dược phẩm Phỳ Thọ tại Hà Nội. Nhúm Dược lý: Thuốc giảm đau, hạ sốt, nhúm chống viờm
Thành phần: Mỗi viờn nộn chứa: paracetamol 500mg, Clopheninamin maleat 4mg.
1.3.3.4. Thuốc pamin
SĐK: VNA-4516-01
Dạng thuốc: Viờn nộn Đúng gúi: Vỉ 10 viờn
Nhà sản xuất: Cụng ty cổ phần Dược phẩm Hậu Giang .
Nhúm Dược lý: Thuốc giảm đau, hạ sốt, nhúm chống viờm khụng steroit, thuốc điều trị gỳt và cỏc bệnh xương khớp
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
1.3.3.5. Thuốc pacemin
SĐK: VNB-0036-02
Dạng thuốc: Viờn nang Đúng gúi: Hộp 10 vỉ x 10 viờn nang
Nhà sản xuất: Cụng ty cổ phần Dược phẩm Hà Tõy
Nhúm Dược lý: Thuốc giảm đau, hạ sốt, nhúm chống viờm khụng steroit, thuốc điều trị gỳt và cỏc bệnh xương khớp
Thành phần: Paracetamol: 325mg, clopheninamin maleat: 4mg.
Cỏc thuốc trờn đều cú cụng dụng: Trị núng sốt, cảm, sổ mũi, nghẹt mũi, viờm mũi dị ứng, nhức đầu đau dõy thần kinh, đau răng và đau nhức cơ khớp
Chống chỉ định: Quỏ mẫn với thành phần thuốc, người suy tế bào gan.
1.4. Phƣơng phỏp xỏc định riờng paracetamol và clopheninamin maleat
1.4.1. Phương pháp xác định paracetamol
1.4.1.1. Xác định paracetamol dạng nguyờn liệu
Hũa tan 0,3000 gam chế phẩm vào hỗn hợp gồm 10 mL nước và 30 mL axit sunfuric loóng. Đun hồi lưu trong 60 phỳt, sau đú làm lạnh, thờm nước thành 100 mL. Lấy 20 mL dung dịch trờn thờm 40 mL nước, 40 gam nước đỏ, 15 mL axit clohidric loóng và 0,1 mL dung dịch feroin. Chuẩn độ bằng dung dịch amoni ceri sunfat 0,1M cho đến khi xuất hiện màu vàng. Tiến hành phõn tớch mẫu trắng song song với mẫu thật trong cựng điều kiện [2, 3, 21].
1mL dung dịch amoni ceri sunfat tương đương với 7,56 mg paracetamol.
1.4.1.2. Xác định paracetamoldạng viờn nộn
Cõn 20 viờn nộn, tớnh khối lượng trung bỡnh của bột thuốc trong một viờn thuốc, đem nghiền mịn, trộn đều. Cõn chớnh xỏc một lượng bột thuốc tương đương với khoảng 0,15 gam paracetamol cho vào bỡnh định mức 200 mL, thờm 50 mL NaOH 0,1N, thờm 100 mL nước cất, khuấy 15 phỳt thờm nước đến vạch. Lắc đều rồi lọc bỏ 10 mL dung dịch đầu. Lấy chớnh xỏc 10 mL dung dịch lọc vào bỡnh định mức 100 mL rồi thờm nước pha loóng đến vạch định mức, lắc đều. Lấy 10 mL dung dịch vừa pha cho vào bỡnh định mức 100 mL, thờm 10 mL NaOH 0,1N, thờm nước
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
đến vạch định mức lắc đều. Đo độ hấp thụ của dung dịch thu được ở bước súng 257 nm (cu vột dày 1cm). Mẫu trắng là dung dịch NaOH 0,1N. Dựa vào độ hấp thụ quang A, tớnh được hàm lượng paracetamol [18].
1.4.2. Phương pháp xác định clopheninamin maleat. 1.4.2.1. Xác định định tớnh
Sử dụng phương phỏp sắc ký lớp mỏng.
Bản mỏng: Silicagel GF254, sấy 105oC trong 30 phỳt trước khi sử dụng. Dung mụi khai triển: Axit axetic 1M – metanol – etyl axetat (20 : 30 : 50)
Dung dịch thử: Lắc kỹ một lượng bột viờn tương đương khoảng 5 mg clopheninamin maleat với cloroform , lọc, bay hơi dịch lọc đến cắn. Hũa tan cặn trong 1 mL cloroform.
Dung dịch đối chiếu: Dung dịch clopheninamin maleat chuẩn đối chiếu 0,5% trong cloroform.
Cỏch tiến hành: Chấm riờng biệt lờn bản mỏng 2 àL mỗi dung dịch trờn. Sau khi triển khai, lấy bản sắc ký ra, để khụ ngoài khụng khớ và quan sỏt dưới ỏnh sỏng tử ngoại ở bước súng 254 nm. Hai vết chớnh trờn sắc ký đồ của dung dịch thử phải tương ứng về vị trớ và màu sắc với hai vết chớnh trờn sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu. Sau đú, phun dung dịch kali iodobismuthat lờn bản sắc ký. Vết chớnh thu được trờn sắc ký đồ của dung dịch thử phải tương ứng về vị trớ và màu sắc với vết chớnh trờn sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu.
Phương phỏp sắc ký lớp mỏng . Bản mỏng: Silicagel GF254
Dung mụi khai triển: Dietylamin – cloroform – xyclohexan (10 : 40 : 50)
Dung dịch (1): Lắc kỹ một lượng bột viờn tương đương khoảng 50 mg clopheninamin maleat với cloroform, lọc, bay hơi dịch lọc đến cắn. Hũa tan cắn trong 1 mL cloroform.
Dung dịch (2): Pha loóng 1 thể tớch dung dịch (1) với cloroform thành 500 thể tớch.
Cỏch tiến hành: Chấm riờng biệt lờn bản mỏng 10L mỗi dung dịch trờn. Triển khai sắc k ý đến khi dung mụi đi được khoảng 12 cm. Lấy bản sắc k ý ra, để
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
khụ ngoài khụng khớ và quan sỏt dưới ỏnh sỏng tử ngoại ở bước súng 254 nm. Bất kỳ vết phụ nào trờn sắc ký đồ của dung dịch (1) khụng được đậm màu hơn vết trờn sắc ký đồ của dung dịch (2) (0,2%). Loại bỏ cỏc vết tại điểm xuất phỏt [2, 3, 21].
1.4.2.2. Xác định định lượng
Cõn 20 viờn, tớnh khối lượng trung bỡnh viờn và nghiền thành bột mịn. Tiến hành theo một trong hai phương phỏp sau đõy:
Phương phỏp 1
Tiến hành theo phương phỏp quang phổ hấp thụ tử ngoại .
Cõn chớnh xỏc một lượng bột viờn tương đương khoảng 3 mg clopheninamin maleat cho vào bỡnh gạn cú chứa sẵn 20 mL dung dịch axit sunfuric 0,05M, lắc kỹ 5 phỳt, thờm 20 mL ete, lắc kỹ và lọc lớp axit vào một bỡnh gạn thứ hai. Chiết lớp ete thờm 2 lần, mỗi lần với 10 mL dung dịch axit sunfuric 0,05M. Rửa phễu và lọc bằng dung dịch axit sunfuric 0,05M. Tập trung dịch lọc và dịch rửa, kiềm húa bằng dung dịch natri hydroxyt 1M đến khi làm xanh giấy quỳ đỏ, thờm lượng thừa 2 mL dung dịch natri hydroxyt 1M. Lắc đều, chiết 2 lần, mỗi lần với 50 mL ete, rửa mỗi dịch chiết ete với 20 ml nước. Tập trung dịch chiết ete, chiết 3 lần với 20 mL, 20 mL và 5 mL dung dịch axit sunfuric 0,25M. Tập trung dịch chiết axit vào bỡnh định mức 50 mL, thờm dung dịch axit sunfuric 0,25M tới vạch định mức, lắc đều. Lấy chớnh xỏc 10 mL dung dịch này pha loóng với dung dịch axit sunfuric 0,25M vừa đủ 25 mL. Lắc đều và lọc. Đo độ hấp thụ của dung dịch thu được ở bước súng 265 nm, cốc đo dày 1 cm, dựng dung dịch axit sunfuric 0,25M làm mẫu trắng.
Tớnh hàm lượng clopheninamin maleat, C16H19ClN2.C4H4O4, theo A (1%,1 cm). Lấy giỏ trị A (1%, 1 cm) là 212 ở bước súng cực đại 265 nm.
Phương phỏp 2
Tiến hành theo phương phỏp sắc ký lỏng.
Pha động: Hỗn hợp metanol – nước (60 : 40) cú chứa 0,34g kali dihydrophotphat; 0,3g trietylamin hydroclorit; 0,15g natri laurylsunfat và 0,1mL axit photphoric trong mỗi 100 mL dung dịch, điều chỉnh tỉ lệ nếu cần.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Dung dịch chuẩn: Cõn chớnh xỏc và hũa tan vào nước một lượng clopheninamin maleat chuẩn để thu được dung dịch cú nồng độ khoảng 0,8 mg/mL. Tiếp tục pha loóng dung dịch này bằng dung dịch axit photphoric 0,1% để thu được dung dịch cú nồng độ khoảng 8 àg/mL.
Dung dịch thử: Cõn 20 viờn, tớnh khối lượng trung bỡnh viờn và nghiền thành bột mịn. Cõn chớnh xỏc một lượng bột viờn tương ứng với khoảng 2 mg clopheninamin maleat vào bỡnh định mức 250 mL, thờm 25 mL metanol, siờu õm cho bột phõn tỏn hoàn toàn, thờm 1 mL axit photphoric, pha loóng với nước vừa đủ đến vạch, trộn đều.
Điều kiện sắc ký: Cột thộp khụng gỉ (15 cm x 4,6 mm) được nhồi pha tĩnh silicat liờn kết với cỏc nhúm phenyl (hạt 5 -10 m).
Detector quang phổ tử ngoại đặt ở bước súng 214 nm. Tốc độ dũng: 2 mL/phỳt.
Thể tớch tiờm: 10 L.
Kiểm tra tớnh thớch hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn, hệ số đối xứng của pic clopheninamin maleat khụng được lớn hơn 2,0 và độ lệch chuẩn tương đối của cỏc diện tớch đỏp ứng từ lần tiờm lặp lại khụng quỏ 2,0%.
Tiến hành sắc ký lần lượt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Tớnh hàm lượng clopheninamin maleat, C16H19ClN2.C4H4O4, cú trong viờn dựa vào diện tớch pic trờn săc ký đồ thu được từ dung dịch thử, dung dịch chuẩn và hàm lượng C16H19ClN2.C4H4O4của clopheninamin maleat chuẩn [18, 21].
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Chƣơng 2
NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU 2.1. Nội dung nghiờn cứu
Áp dụng phương phỏp phõn tớch trắc quang dựng phổ toàn phần kết hợp với thuật toỏn của chương trình lọc Kalman để xõy dựng qui trỡnh định lượng đồng thời