Tiờ́n hành định lượng đụ̀ng thời PAR và CPM trong thuốc viờn nộn Pacemin do cụng ty cổ phần dược phẩm Hà Tõy sản xuất, ngày 14/01/2011; lụ số: VD-5430- 08; Hạn sử dụng: 26/01/2014. Thành phần theo cụng bố là 325 mg PAR và 4 mg CPM/viờn.
- Xử lý mẫu thuốc: Cõn 10 viờn thuốc, tớnh khối lượng trung bỡnh mỗi viờn (m = 0,4516g). Đem nghiền nhỏ thành bột mịn, rồi lấy chớnh xỏc một lượng bột tương đương 1/10 viờn (chứa 32,5 mg PAR và 0,4 mg CPM) cho vào bỡnh định mức 250 mL, thờm khoảng 50 mL dung dịch HCl 0,1M, lắc kỹ và định mức đến vạch bằng dung dịch HCl 0,1M. Đem lọc, bỏ khoảng 100 mL dung dịch đầu, lấy 38,5 mL dung dịch lọc đem định mức thành 100 mL thu được dung dịch gốc chứa hàm lượng tương đương PAR là 50 g/mL, CPM là 0,615 g/mL.
Sau đú tiếp tục lấy cỏc thể tớch dung dịch gốc đem pha loóng bằng dung mụi HCl 0,1M cho đến khi dung dịch thuốc cú tỉ lệ nồng độ lần lượt PAR:CPM là 12:0,148; 10:0,123; 8:0,098; và 6: 0,074.
- Thực hiợ̀n phép đo độ hấp thụ quang trờn mỏy UV-VIS 1700 SHIMADZU trong khoảng bước súng từ 210 - 300 nm, cứ 0,5 nm ghi 1 giỏ trị.
- Từ kết quả đo đụ̣ hṍp thụ quang , sử dụng chương trỡnh lọc Kalman đờ̉ tớnh toỏn chúng tụi thu được kết ở bảng 3.20.
Bảng 3.20.Kờ́t quả xác định hàm lượng PAR và CPM trong thuốc Pacemin
STT V(dd1) (mL) C0PAR (g/mL) C0CPM (g/mL) CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) RE% CPAR RE% CCPM 1 3,0 6,0 0,074 5,990 0,067 -0,167 -9,297 2 4,0 8,0 0,098 7,988 0,083 -0,150 -15,684 3 5,0 10,0 0,123 9,983 0,112 -0,170 -8,862 4 6,0 12,0 0,148 12,000 0,132 0,000 -10,811
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trong đú:
V(dd1): là thể tớch (mL) của dung dịch gốc đem pha loóng thành 25mL. C0PAR, C0CPM là hàm lượng PAR, CPM trong cỏc mẫu thuốc.
CPAR, CCPMlà hàm lượng PAR, CPM xỏc định được trong cỏc mẫu thuốc. RE% CPAR, RE% CCPMlà sai số cho phộp xỏc định hàm lượng PAR và CPM.
Nhận xột: Từ kết quả xỏc định hàm lượng PAR và CPM ở bảng 3.20 cho thấy,
hàm lượng PAR trong thuốc Pacemin xỏc định được mắc sai số dưới 1% và hàm lượng CPM xỏc định được mắc sai số lớn hơn 15%.
Qua cỏc kết quả trờn cho thấy đối với cỏc cấu tử cú hàm lượng nhỏ trong thuốc khi xỏc định cũn gặp nhiều khú khăn do mắc phải sai số lớn bờn cạnh đú cỏc cấu tử cú hàm lượng lớn được xỏc định một cỏch dễ dàng và chớnh xỏc vỡ sai số rất nhỏ. Chớnh vỡ vậy để phộp phõn tớch được đỏnh giỏ đỳng và chớnh xỏc hơn khi xỏc định đồng thời cỏc cấu tử cú hàm lượng khỏc nhau trong cựng một loại thuốc chỳng tụi đó sử dụng phương phỏp thờm chuẩn.
3.10. Đỏnh giỏ độ đỳng của phép phõn tích theo phƣơng phỏp thờm chuẩn
Đỏnh giỏ độ đỳng của phương phỏp bằng cách thờm vào dung dịch mõ̃u phõn tớch một lượng chính xác PAR , CPM đã biờ́t nụ̀ng đụ̣ . Sau đú đem quét phụ̉ và tính độ thu hồi PAR, CPM trong mõ̃u bằng phương phỏp lọc Kaman, qua đó đánh giá được đụ̣ tin cọ̃y của phép phõn tích.
3.10.1. Độ thu hụ̀i PAR và CPM trong thuốc viờn nộn Slocol
Pha cỏc dung dịch chuẩn PAR và CPM có nụ̀ng đụ̣ là 25 μg/mL, lṍy 10 mL dung dịch gốc thuốc Slocol cho vào 7 bỡnh định mức 25 mL, đỏnh số thứ tự, sau đú tiờ́n hành thờm lõ̀n lượt thờ̉ tích các dung dịch chuẩn PAR và CPM như bảng 3.21, tiếp theo là định mức bằng dung dịch HCl 0,1M đến vạch. Cỏc thớ nghiệm được lặp lại từ 3 đến 5 lần rồi lấy giỏ trị trung bỡnh, mỗi mẫu thờm, thực hiện đồng thời 3 lần với cựng 1 thể tớch.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.21. Thành phần cỏc dung dịch chuõ̉n PAR và CPM thờm vào dung dịch thuốc Slocol Mẫu VThuốc (mL) VCPM (mL) VPAR (mL) CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) 1 10,0 2,0 - 8,000 2,064 2 10,0 4,0 - 8,000 4,064 3 10,0 6,0 - 8,000 6,064 4 10,0 8,0 - 8,000 8,064 5 10,0 10,0 - 8,000 10,064 6 10,0 - 1,0 9,000 0,064 7 10,0 - 2,0 10,000 0,064 Trong đó:
VPARlà thể tớch PAR cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u. VCPMlà thể tớch CPM cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u.
VThuốc là thể tớch dung dịch gốc thuốc Slocol chứa hàm lượng tương đương
PAR: 50 g/mL và CPM : 0,4 g/mL.
CPAR, CCPMlà hàm lượng PAR và CPM trong thuốc sau khi thờm chuẩn.
Sau khi chuẩn bị mẫu xong đem quét phụ̉ ở bước sóng từ 210-300 nm, từ kờ́t quả đo độ hấp thụ quang , tiến hành xác định hàm lượng PAR , CPM theo chương trỡnh lọc Kaman, qua đó tính đụ̣ thu hụ̀i của chúng. Kờ́t quả được trình bày ở bảng 3.22.
Bảng 3.22.Kờ́t quả xỏc định độ thu hồi PAR, CPM trong mõ̃u thuốc Slocol
Mẫu CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) C[PAR] (g/mL) C[CPM]
(g/mL) Rev%CPAR Rev%CCPM
1 8,000 0,068 8,999 - 99,90 - 2 8,000 0,068 9,991 - 99,55 - 3 8,000 0,068 - 2,065 - 99,86 4 8,000 0,068 - 4,047 - 99,48 5 8,000 0,068 - 6,050 - 99,70 6 8,000 0,068 - 8,046 - 99,73 7 8,000 0,068 - 10,040 - 99,72
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trong đú: CPAR, CCPM là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc khi chưa thờm chuẩn.
C[PAR], C[CPM]là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc sau khi thờm chuẩn. Rev(%) là độ thu hồi của PAR hoặc CPM.
Nhọ̃n xét: Kết quả tính toán thu được ở bảng 3.22 cho thấy độ thu hồi của PAR từ 99,55% đến 99,90% và độ thu hồi của CPM từ 99,48% đến 99,86%.
3.10.2. Độ thu hụ̀i PAR và CPM trong thuốc viờn nộn Detazofol
Pha cỏc dung dịch ch uẩn PAR và CPM có nụ̀ng đụ̣ là 25 μg/mL, lṍy 5 mL dung dịch gốc thuốc Detazofol cho vào 7 bỡnh định mức 25 mL, đỏnh số thứ tự, sau đú tiờ́n hành thờm lõ̀n lượt thờ̉ tích các d ung dịch chuẩn PAR và CPM như bảng 3.23, tiếp theo là định mức bằng dung dịch HCl 0,1M đến vạch . Cỏc thớ nghiệm được lặp lại từ 3 đến 5 lần rồi lấy giỏ trị trung bỡnh.
Bảng 3.23.Thành phần cỏc dung dịch chuõ̉n PAR và CPM thờm vào dung dịch thuốc Detazofol
Mẫu V(mL) Thuốc VCPM (mL) VPAR (mL) CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) 1 5,0 2,0 - 8,000 2,040 2 5,0 4,0 - 8,000 4,040 3 5,0 6,0 - 8,000 6,040 4 5,0 8,0 - 8,000 8,040 5 5,0 10,0 - 8,000 10,040 6 5,0 - 1,0 9,000 0,040 7 5,0 - 2,0 10,000 0,040 Trong đó:
VPARlà thể tớch PAR cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u. VCPMlà thể tớch CPM cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u.
VThuốc là thể tớch dung dịch gốc thuốc Detazofol chứa hàm lượng tương
đương PAR: 40 g/mL và CPM : 0,2 g/mL.
CPAR, CCPMlà hàm lượng PAR và CPM trong thuốc sau khi thờm chuẩn.
Sau khi chuẩn bị mẫu xong đem quét phụ̉ ở bước sóng từ 210-300 nm, từ kờ́t quả đo đụ̣ hṍp thụ quang , tiến hành xác định hàm lượng PAR , CPM theo chương trỡnh lọc Kaman, qua đó tớnh độ thu hồi của PAR và CPM. Kờ́t quả được trình bày ở bảng 3.24.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.24.Kờ́t quả xác định đụ̣ thu hụ̀i PAR, CPM trong mõ̃u thuốc Detazofol
Mẫu CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) C[PAR] (g/mL) C[CPM]
(g/mL) Rev%CPAR Rev%CCPM
1 8,000 0,036 9,004 - 100,40 - 2 8,000 0,036 10,010 - 100,50 - 3 8,000 0,036 - 2,043 - 100,36 4 8,000 0,036 - 4,030 - 99,85 5 8,000 0,036 - 6,021 - 99,75 6 8,000 0,036 - 8,030 - 99,93 7 8,000 0,036 - 10,014 - 99,78
Trong đú: CPAR, CCPM là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc khi chưa thờm chuẩn.
C[PAR], C[CPM]là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc sau khi thờm chuẩn. Rev(%) là độ thu hồi của PAR hoặc CPM.
Nhọ̃n xét: Kết quả tính toán thu được ở bảng 3.24 cho thấy độ thu hồi của PAR từ 100,40% đến 100,50% và độ thu hồi của CPM từ 99,75% đến 100,36%.
3.10.3. Độ thu hụ̀i PAR và CPM trong thuốc viờn nộn Pamin
Pha cỏc dung dịch chuẩn PAR và CPM có nụ̀ng đụ̣ là 25 μg/mL, lṍy 5 mL dung dịch gốc thuốc Pamin cho vào 7 bỡnh định mức 25 mL, đỏnh số thứ tự, sau đú tiờ́n hành thờm lần lượt thể tớch cỏc d ung dịch chuẩn PAR và CPM như bảng 3.25, tiếp theo là định mức bằng d ung dịch HCl 0,1M đến vạch . Cỏc thớ nghiệm được lặp lại từ 3 đến 5 lần rồi lấy giỏ trị trung bỡnh.
Bảng 3.25.Thành phần cỏc dung dịch chuõ̉n PAR và CPM thờm vào dung dịch thuốc Pamin
Mẫu V(mL) Thuốc VCPM (mL) VPAR (mL) CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) 1 5,0 2,0 - 8,000 2,040 2 5,0 4,0 - 8,000 4,040 3 5,0 6,0 - 8,000 6,040 4 5,0 8,0 - 8,000 8,040 5 5,0 10,0 - 8,000 10,040 6 5,0 - 1,0 9,000 0,040 7 5,0 - 2,0 10,000 0,040
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trong đó: VPARlà thể tớch PAR cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u. VCPMlà thể tớch CPM cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u. VThuốc là thể tớch dung dịch gốc thuốc Pamin chứa hàm lượng tương đương PAR: 40 g/mL và CPM : 0,2 g/mL.
CPAR, CCPMlà hàm lượng PAR và CPM trong thuốc sau khi thờm chuẩn.
Sau khi chuẩn bị mẫu xong đem quét phụ̉ ở bước sóng từ 210-300 nm, từ kờ́t quả đo độ hấp thụ quang , tiến hành xác định hàm lượng PAR , CPM theo chương trỡnh lọc Kaman, qua đó tính đụ̣ thu hụ̀i của PAR và CPM. Kờ́t quả được trình bày ở bảng 3.26.
Bảng 3.26.Kờ́t quả xác định đụ̣ thu hụ̀i PAR, CPM trong mõ̃u thuốc Pamin
Mẫu CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) C[PAR] (g/mL) C[CPM]
(g/mL) Rev%CPAR Rev%CCPM
1 8,006 0,035 8,999 - 99,30 - 2 8,006 0,035 10,040 - 101,70 - 3 8,006 0,035 - 2,050 - 100,75 4 8,006 0,035 - 4,034 - 99,98 5 8,006 0,035 - 6,029 - 99,90 6 8,006 0,035 - 8,029 - 99,93 7 8,006 0,035 - 10,030 - 99,95
Trong đú: CPAR, CCPM là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc khi chưa thờm chuẩn.
C[PAR], C[CPM]là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc sau khi thờm chuẩn. Rev(%) là độ thu hồi của PAR hoặc CPM.
Nhọ̃n xét: Kết quả tính toán thu được ở bảng 3.26 cho thấy độ thu hồi của PAR từ 99,30% đến 101,70% và độ thu hồi của CPM từ 99,90% đến 100,75%.
3.10.4. Độ thu hụ̀i PAR và CPM trong thuốc viờn nang Pacemin
Pha cỏc dung dịch ch uẩn PAR và CPM có nụ̀ng đụ̣ là 25 μg/mL, lṍy 4 mL dung dịch gốc thuốc Pacemin cho vào 7 bỡnh định mức 25 mL, đỏnh số thứ tự, sau đú tiờ́n hành thờm lõ̀n lượt thờ̉ tí ch các d ung dịch chuẩn PAR và CPM như bảng 3.27, tiếp theo là định mức bằng dung dịch HCl 0,1M đến vạch . Cỏc thớ nghiệm được lặp lại từ 3 đến 5 lần rồi lấy giỏ trị trung bỡnh.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.27.Thành phần cỏc dung dịch chuõ̉n PAR và CPM thờm vào dung dịch thuốc Pacemin
Mẫu V(mL) Thuốc VCPM (mL) VPAR (mL) CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) 1 4,0 2,0 - 8,000 2,098 2 4,0 4,0 - 8,000 4,098 3 4,0 6,0 - 8,000 6,098 4 4,0 8,0 - 8,000 8,098 5 4,0 10,0 - 8,000 10,098 6 4,0 - 1,0 9,000 0,098 7 4,0 - 2,0 10,000 0,098 Trong đó:
VPARlà thể tớch PAR cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u. VCPMlà thể tớch CPM cú nồng độ 25 μg/mL thờm vào dung dịch mõ̃u.
VThuốc là thể tớch dung dịch gốc thuốc Pacemin chứa hàm lượng tương đương
PAR: 50 g/mL và CPM : 0,615 g/mL.
CPAR, CCPMlà hàm lượng PAR và CPM trong thuốc sau khi thờm chuẩn.
Sau khi chuẩn bị mẫu xong đem quét phụ̉ ở bước sóng từ 210-300 nm, từ kờ́t quả đo độ hấp thụ quang , tiến hành xác định hàm lượng PAR , CPM theo chương trỡnh lọc Kaman, qua đó tính đụ̣ thu hụ̀i của PAR và CPM. Kờ́t quả được trình bày ở bảng 3.28.
Bảng 3.28.Kờ́t quả xác định đụ̣ thu hụ̀i PAR, CPM trong mõ̃u thuốc Pacemin
Mẫu CPAR (g/mL) CCPM (g/mL) C[PAR] (g/mL) C[CPM]
(g/mL) Rev%CPAR Rev%CCPM
1 7,988 0,083 8,988 - 100,00 - 2 7,988 0,083 9,995 - 100,35 - 3 7,988 0,083 - 2,084 - 100,07 4 7,988 0,083 - 4,077 - 99,86 5 7,988 0,083 - 6,054 - 99,52 6 7,988 0,083 - 8,057 - 99,68 7 7,988 0,083 - 10,067 - 99,84
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Trong đú: CPAR, CCPM là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc khi chưa thờm chuẩn.
C[PAR], C[CPM]là hàm lượng PAR và CPM xỏc định được trong thuốc sau khi thờm chuẩn. Rev(%) là độ thu hồi của PAR hoặc CPM.
Nhọ̃n xét: Kết quả tính toán thu được ở bảng 3.28 cho thấy độ thu hồi của PAR từ 100,00% đến 100,35% và độ thu hồi của CPM từ 99,52% đến 100,07%.
Từ cỏc kết quả trờn cho thấy dựng phương phỏp thờm chuẩn để xỏc định hàm lượng cỏc chất PAR và CPM cú trong cỏc thuốc cú độ đỳng tốt.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
KẾT LUẬN
Xuất phỏt từ mục tiờu của luọ̃n văn là nghiờn cứu xác định đụ̀ng thời
paracetamol và c lopheninamin maleat trong thuụ́c Slocol, Detazofol, Pamin và Pacemin theo phương pháp phụ̉ hṍp thụ phõn tử sử dụng chương trình lọc Kalman . Qua quỏ trỡnh làm luận văn chỳng tụi đó thu được một số kết quả như sau:
1. Đó khảo sỏt, xỏc định điều kiện tối ưu cho phộp đo quang đối vớ i các dung dịch hỗn hợp PAR và CPM gụ̀m:
- Khoảng bước súng thớch hợp để quột phổ từ 210-300 nm, PAR cú độ hṍp thụ quang cực đại tại bước súng 244 nm, CPM cực đại ở bước sóng 264 nm. Phụ̉ hṍp thụ của 2 chṍt này gần như xen phủ nhau hoàn toàn.
- Trong mụi trường axit HCl 0,1M đụ̣ hṍp thụ quang của PAR, CPM ổn định và đạt cực đại.
- Khoảng thời gian tụ́i ưu để tiến hành thớ nghiệm đo quang là từ 30 đến 60 phỳt sau khi pha và cú thể tiến hành thớ nghiệm ở nhiệt độ phũng.
- Khảo sỏt, xỏc định khoảng tuyến tớnh độ hấp thụ quang của PAR là 0,6 đến 25,0 μg/mL, CPM là từ 0,2 đến 40,0 μg/mL.
2. Đó khảo sỏt được sự ảnh hưởng của tinh bột cú trong thành phần của cỏc thuốc, kết quả đều cho độ hấp thụ quang tương đối ổn định đối với cỏc dung dịch PAR, CPM và ảnh hưởng của tinh bột là khụng đỏng kể.
3. Đỏnh giỏ được độ tin cậy của phương phỏp trắc quang sử dụng chương trỡnh lọc Kalman đối với cỏc mẫu tự pha chủ yờ́u mắc sai sụ́ lớn đụ́i với cṍu tử có nụ̀ng đụ̣ nhỏ. Trong khoảng tỉ lệ nồng độ
60 1 < AR P CPM C C < 1 1 thỡ cỏc kết quả xỏc định cú sai số nhỏ (dưới 5 % với cấu tử cú nồng độ nhỏ và dưới 1 % với cấu tử cú nồng độ lớn).
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
4. Đó xỏc định đồng thời PAR và CPM trong hỗn hợp cũng như trong thuốc Slocol, Detazofol, Pamin và Pacemin với độ lặp lại cũng như độ đỳng , đụ̣ chính xác cao. Độ thu hồi của PAR từ 99,30% đến 101,70% và của CPM từ 99,52% đến 100,75%.
Quy trỡnh phõn tớch nghiờn cứu cú độ đỳng, đụ̣ lặp và độ thu hồi cao, kết hợp với việc sử dụng chương trỡnh lọc Kalman trong quỏ trỡnh xử lớ kết quả đo quang để xỏc định nồng độ cỏc chất với thời gian phõn tích nhanh, thao tác đơn giản hi vọng phương pháp này sẽ được