PHẦN 4 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
4.1.Kết quả thu thập mẫu sinh phẩm của người có liên quan tới phơi nhiễm dioxin
Mục đích ban đầu của đề tài là phân tích đột biến gen FAT1 trên ba thế hệ bệnh nhân thiểu năng trí tuệ có liên quan đến phơi nhiễm dioxin. Việc lựa chọn các gia đình cựu chiến binh phơi nhiễm dioxin tình nguyện tham gia nghiên cứu được thực hiện bởi Hội nạn nhân chất độc da cam Tỉnh Thái Nguyên. Trong danh sách 8 gia đình tình nguyện viên tham gia cung cấp mẫu thì chỉ có một gia đình (D) có người cháu (D1) có tình trạng thiểu năng trí tuệ.
Cơng tác thu thập mẫu là rất thách thức, vì vậy bên cạnh mục tiêu ban đầu, nhóm nghiên cứu đã đặt ra mục tiêu thứ hai nhằm khảo sát tính chất gây đột biến DNA trên người bị phơi nhiễm dioxin và sự di truyền của đột biến qua 3 thế hệ. Một số nghiên cứu trước đây đã cho thấy dioxin có ảnh hưởng lên tồn bộ hệ gene [31] vì vậy có thể sẽ xuất hiện các đột biến tại các vị trí khác nhau trên hệ gene người.
Một hạn chế trong khâu thu thập mẫu là những gia đình ba thế hệ cựu chiến binh phơi nhiễm dioxin cần có đối chứng là mẫu của người bà và người mẹ không liên quan tới dioxin. Tuy nhiên, do một số nguyên nhân mà nhóm nghiên cứu chưa tiếp cận được với những người này.
Bảng 4.1: Danh sách các gia đình 3 thế hệ liên quan đến phơi nhiễm dioxin tình nguyện tham gia nghiên cứu
Thế hệ thứ ba (cháu của cựu chiến binh có biểu
STT Kí hiệu 1 A1 2 B1 3 C1 4 D1 5 E1 6 G1 7 H1
4.2. Kết quả tách chiết DNA
Mẫu máu của người liên quan đến phơi nhiễm dioxin được tách chiết DNA tổng số bằng bộ Tissue Genomic DNA Extraction Mini Kit theo hướng dẫn của nhà sản xuất Favor Prep. Kết quả tách chiết DNA tổng số được kiểm tra bằng phương pháp điện di trên gel agarose và trình bày trên hình 4.1.
Hình 4.1: Kết quả tách chiết DNA tổng số 24 mẫu máu đã thu thập được
L: Ladder 1kb của hãng Thermo Siencetific
Đường chạy từ 1→24 (A1→G4) : DNA tổng số được tách từ 24 mẫu máu thu thập được. Thơng tin kí hiệu bệnh nhân được chi tiết trong nhật kí thí nghiệm.
DNA tổng số được tiến hành điện di trên gel agarose 0,80%. Số lượng mẫu nạp trên mỗi làn trên bản điện di là 5uL/mỗi làn.
Kết quả điện di cho thấy các mẫu DNA tổng số thu được có chất lượng đạt u cầu, DNA ít bị đứt gãy, các band sáng và rõ ràng đủ điều kiện để thực hiện phản ứng PCR và các nghiên cứu tiếp theo.