CHƯƠNG 2 : ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Phương pháp tiến hành
2.4.5. Đánh giá đặc điểm mô bệnh học
Sau khi phẫu thuật bệnh phẩm được cố định ngay vào dung dịch Bouin trong 24 giờ; được bác sĩ chuyên khoa giải phẫu bệnh pha, đánh giá kính thước u, vị trí u, chuyển, đúc trong khối nến, cắt mảnh dày khoảng 3 µm, nhuộm Hematoxylin Eosin (HE) và được đánh giá trên kính hiển vi quang học. Nếu u có quá nhiều sắc tố, che lấp hết nhân tế bào, khó đánh giá thì chúng tơi tẩy sắc tố melanin trước khi nhuộm HE.
Trong các trường hợp khó chẩn đốn xác định, cần chẩn đoán phân biệt với các u khác, cần nhuộm hóa mơ miễn dịch để chẩn đốn xác định thêm. Phương pháp hóa mơ miễn dịch(HMMD) để chẩn đoán phân biệt giữa các tổn thương hắc tố và tổn thương không hắc tố. Hoặc để phân biệt các tổn thương hắc tố lành tính và các tổn thương hắc tố ác tính. Để phân biệt tổn thương hắc tố và khơng hắc tố, có thể dùng các dấu ấn miễn dịch như Melan-A và MITF2. Nếu dương tính với 2 dấu ấn miễn dịch tổn thương hắc tố và ngược lại. Nếu âm
tính khơng phải tổn thương hắc tố. Khi cần phân biệt tổn thương hắc tố lành tính và ác tính, có thể dùng dấu ấn miễn dịch HMB-45 hay Ki-67. UHTAT MBĐ sẽ dương tính mạnh với dấu ấn miễn dịch HMB-45 và chỉ nốt ruồi hoặc một số biến thể hiếm gặp khác của nốt ruồi kết mạc mới dương tính nhẹ với dấu ấn miễn dịch HMB-45. Khi nhuộm HMMD với dấu ấn miễn dịch Ki-67 sẽ cho kết quả dương tính mạnh hơn trong UHTAT (17,9%) so với trong nốt ruồi (1,9%). Tuy nhiên, hai yếu tố chính để phân biệt nốt ruồi kết mạc hay UHTAT là lâm sàng và đặc điểm mô bệnh học của tổn thương trên tiêu bản nhuộm HE thường quy. Nếu kết quả vẫn chưa rõ ràng, chúng tôi gửi mẫu vật sang Bệnh việnK để xin ý kiến để hội chẩn chẩn đoán.