Phần lắng là hạt nano Fe3O4
3.6 Quy trình gắn kháng thể khuẩn tả Vibrio cholerae-O1 lên hạt nano Fe3O4/SiO2
Ước lượng kháng thể Vibrio Cholerae-01 bám dính hạt từ theo phương pháp
Bradford.
- 3ml dung dịch Bradford được cho vào 100µl dung dịch mẫu gồm: Tám mẫu
dung dịch kháng thể Vibrio Cholerae-01 đã biết trước nồng độ và các mẫu dung dịch kháng thể Vibrio Cholerae -01 thuộc phần nổi.
- Đo độ hấp thu ở bước sĩng 595nm
- Từ độ hấp thu của các mẫu lập phương trình đường chuẩn.
- Từ phương trình đường chuẩn và độ hấp thu của các mẫu thuộc phần nổi suy ra
nồng độ kháng thể Vibrio Cholerae -01 thuộc phần nổi.
- Từ đĩ suy ra được lượng kháng thể Vibrio Cholerae -01 bám dính hạt từ.
3.7 Quy trình chẩn đốn tiêu chảy cấp.
8 mẫu kháng nguyên Vibrio Cholerae-01 đã biết trước nồng độ cho vào 8 mẫu hạt từ đã gắn kháng thể Vibrio Cholerae -01. Kháng thể Vibrio Cholerae -01 kết hợp với kháng nguyên Vibrio Cholerae -01. Sau đĩ thêm cơ chất. Enzym biến đổi cơ chất và
phát quang. Dùng nam châm, tách phần hạt từ cĩ gắn kháng nguyên và kháng thể
Vibrio Cholerae-01 với phần dung dịch nổi phát quang. Đo độ hấp thu ở bước sĩng
450 nm của phần nổi. Từ đĩ thiết lập đường chuẩn mối liên hệ giữa độ hấp thu bước
sĩng 450 nm và nồng độ kháng nguyên Vibrio Cholerae -01 trong mẫu.
Cho các mẫu huyết thanh vào các mẫu hạt từ đã gắn kháng thể Vibrio Cholerae -
01, sau đĩ cho cơ chất. Dùng nam châm tách phần nổi với phần hạt từ. Đo độ hấp thu bước sĩng 450 nm của phần nổi và dựa vào đường chuẩn suy ra nồng độ kháng nguyên cĩ trong các mẫu huyết thanh.
30mg hạt nanoFe3O4 + dung dịch kháng thể O1 cĩ nồng độ
Tách từ và rửa trong dung dịch đệm 3 lần
Phần nổi dùng để định lượng kháng thể O1 khơng dính
Ủ ở nhiệt độ 370C trong 5 giờ