- Bộ điện di đứng - Bộ nguồn chạy điện di - Pipetteteman 1000µl - Pipetteteman 200µl - Pipetteteman 10µl - Típ xanh: 1 hộp - Típ vàng: 1 hộp - Típ trắng: 1 hộp - Giấy lọc - Giấy thấm - Giăng tay: 1 đôi - Phao để eppendorf. - Eppendorf
3. Hóa chất.
- N, N, N’,N’-tetramethylenediamide.
- Dung dịch Acryamide/Bisacryamide 40% ( 29:1) (3.3%C) - β –Mercapptoethanol.
- Thang protein chuẩn SDS-PAGE ( Bio- Rad), gồm các protein chuẩn có kích thước xác định sau:
+ Phosphorylase b 97.400 Daltons + Bovine serum albumin 66.200 Daltons
+ Ovalbumin 45.000 Daltons
+ Carbonic anhydrase 31.000 Daltons + Soybean trypsin inhibitor 21.500 Daltons
+ Lysozome 14.400 Daltons
- Sodium Dodecyl Sulfate. - Ammonium persulfate.
- Coomassie Brilliant Blue G 250 dạng viên ( Bio- Rad) - Cồn tuyệt đối 99,50
- Methanol.
- Tris ( hydroxymethyl ) amonimethane - Axit acetic
- Bromophenol blue - Glycerol
- Glycine - Axit clohydric
- Sodium docecyl sulfate ( SDS) 10%: cân 10g SDS cho 100ml nước cất vào khuấy cho tới khi tan hết.
- Dung dich đệm gel phân tách Tris-Cl 1.5M, Ph8.8-0.4%SDS: cân 36,3g Tris pha trong 100ml nước cất thêm dần HCl 6N và khuấy dung dich trên cho tới khi pH kế chỉ 8.8. Hút 8ml dung dịch SDS 10% cho vào. Thêm nước cất cho đủ 200ml, lắc đều giữ ở 4 độ.
- Dung dịch đệm gel gom Tris – Cl 0.5M, pH 6.8-0,4 % SDS: cân 6.05g Tris pha trong 100ml nước cất thêm dần HCl 6N và khuấy dung dịch trên cho tới khi ph kế chỉ 6.8. Hút 4ml dung dịch SDS 10% cho vào. Thêm vào nước cho đủ 100ml, lắc đều giữ ở 4 độ.
- Ammoniumpersulfate 10% ( chỉ pha trước khi dùng): cân 0.1g cho vào một eppendorf 1000µl thêm 1 ml nước cất, lắc đều, để ở nhiệt độ phòng.
- Dung dịch đệm điện di Tris-glycine ph 8.3: pha dung dịch mẹ 10X chứa 30g Tris, 144g Glycine, 10g SDS hòa trong 1000ml nước cất - Dung dịch nạp mẫu 2X: có thành phần như sau: 2.5ml dung dịch đệm
Tris-Cl 0.5M , ph 6.8,4ml 10%SDS; 2ml Glycerol; 2mg Bromophenol Blue; 0.2ml mercaptoethanol; thêm nước đủ 10ml
- Dung dịch nhuộm gel: chuẩn bị 250ml dung dịch nhuộm gel chứa 0,625g Coomassie Blue G 250, 112.5ml ethanol tuyệt đối, 112.5ml nước cất và 25ml acid acetic, lắc đều, giữ trong chai màu tối
- Dung dịch giải nhuộm: 30ml methanol: 10ml acid acetic: 60ml nước cất