Vì imidacloprid và thiamethoxam đều là những chất có khối lượng phân tử không lớn và độ phân cực trung bình. Qua tham khảo tài liệu [46,50] đã xác định Imidacloprid và Thiamethoxam bằng kỹ thuật ion hóa phun điện tử ESI với chế độ bắn phá ion dương. Chạy chất chuẩn trực tiếp vào detector khối phổ để khảo sát. Chọn chế độ khảo sát tự động với từng chất để chọn được ion mẹ, ion con dùng để định lượng và định tính với từng chất. Kết quả khảo sát ion mẹ của imidacloprid và thiamethoxam thu được ở bảng 3.1.
Bảng 3.1: Ion định lượng, ion xác nhận của từng chất và các thông số tối ưu
cho ESI – MS Chất Precursor (m/z) Product ion1 (m/z) Product ion2 (m/z) Collision Energy Cone (V) CE (eV) Thời gian lưu (phút) Imidacloprid 256 209,1 175,0 12 16,18 12,029 Thiamethoxam 291.8 211,0 131,9 10 14,24 9,746 Các hợp chất imidacloprid và thiamethoxam được phân tích trên thiết bị LC-QTOF-MS-SWATH (Sciex X500R QTOF system). Với các điều kiện: Thể tích tiêm mẫu là 2 µL, chất phân tích được tách trên cột GL Science ODS-4 HP (chiều dài 150mm, đường kính trong 2,1mm và bề dày lớp pha tĩnh 3µm), nhiệt độ cổng bơm 40°C, tốc độ dòng khí 0.3 mL min-1
, nguồn ion TurbolonSpray, chế độ bắn phá ion dương (ESI (+)), chế độ đo Swath, TOF-MS (khoảng scan)50 - 1000 Da, 0.1s, TOF MS/MS50 - 1000 Da, 22 ranges, 0.07s each. KhíNitơ được sử dụng làm khí mang. Các ion mẹ, ion con và thời gian lưu của imidacloprid (12,029 phút) và thiamethoxam (9,746 phút) được xác định và chỉ ra ở hình 3.1 và hình 3.2.
35
Điều kiện phân tích imidacloprid và thiamethoxam được tóm tắt trong bảng 3.2.
Bảng 3.2: Các điều kiện LC-QTOF-MS
Tên Thông số
Thiết bị Sciex X500R QTOF system
Cột sắc ký GL Science ODS-4 HP (150 mm, 2.1 mm, 3 μm)
Nhiệt độ cột 40 °C
Tốc độ dòng 0.3 mL min−1
Pha động (A) 5 mM CH3COONH4 in H2O (B) 5 mM CH3COONH4 in CH3OH
Chương trình chạy Thời gian, phút 0 30 − 40 40.01 – 50 (B) % 5 95 5
Thểtích bơm 2 μL
Nguồn ion TurbolonSpray
Chếđộ ion hóa ESI (+)
Chếđộ đo Swath
TOF-MS (khoảng scan) 50 − 1000 Da, 0.1 s
TOF MS/MS 50 − 1000 Da, 22 ranges, 0.07 s each Năng lượng bắn phá 20 − 50 V
Độ phân giải 30 000
36
37
38
3.1.2. Kết quả xây dựng đường chuẩn cho imidacloprid và thiamethoxam trên thiết bị LC-QTOF-MS-SWATH
Sử dụng điều kiện vừa được xác định ở trên để xây dựng đường chuẩn cho phép định lượng hỗn hợp imidacloprid và thiamethoxam với khoảng nồng độ: từ 0,1 ppb –1000ppb (0,1 ppb; 1 ppb; 10 ppb; 100 ppb; 1000 ppb) trong MeOH, đo trên thiết bị LC-QTOF-MS-SWATH.
Từ các kết quả phân tích thu được các đường chuẩn của imidacloprid và thiamethoxam có dạng (hình 3.3 và hình 3.4):
Imidacloprid: y = 0,03178 x + 0,00126 với R= 0,98656; R2 = 0,97329 Thiamethoxam: y = 0,04828 x + 0,00021 với R= 0,97143; R2= 0,94368
Hình 3.3: Đường chuẩn imidacloprid
39