5. Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA LUẬN ÁN
3.1.2. Ảnh hưởng của nguồn nitơ lên sinh trưởng của callus thân
3.1.2.1. Ảnh hưởng của tryptone
Môi trường cơ bản MS có bổ sung 1 mg/L 2,4-D và 0,5 mg/L KIN thu được từ bảng 3.2 được sử dụng để khảo sát ảnh hưởng của TRYP, kết quả thu được sau 5 tuần nuôi cấy được trình bày ở bảng 3.4.
Kết quả nghiên cứu cho thấy, hầu hết các môi trường có bổ sung TRYP đều tăng sinh trưởng của callus so với đối chứng. Tuy nhiên, tác dụng của TRYP khác nhau tùy thuộc vào nồng độ của chúng.
Ở môi trường đối chứng không bổ sung TRYP, khối lượng tươi trung bình đạt 120,6 mg, tương ứng với khối lượng khô của callus là 8,6 mg. Callus có màu vàng và dạng hạt.
nhất. Khối lượng tươi và khối lượng khô trung bình của callus cao hơn so với môi trường còn lại, đạt 128,1 mg và 8,9 mg. Callus có màu vàng tươi và dạng hạt nhỏ. Sự khác biệt về sinh trưởng của callus ở các nồng độ TRYP khác nhau không có ý nghĩa thống kê (Hình 3.4).
Bảng 3.4. Ảnh hưởng của TRYP lên khả năng sinh trưởng của callus thân sau 5 tuần nuôi cấy
TRYP (g/L) Khối lượng tươi Khối lượng khô
(mg/callus) (mg/callus) 0 120,6a 8,6a 0,2 123,8a 8,7a 0,4 125,1a 8,7a 0,8 128,1a 8,9a 1,6 110,4b 7,9b
Các chữ cái khác nhau trên cùng một cột chỉ ra sự sai khác có mức ý nghĩa thống kê của trung bình mẫu với p<0,05 (Duncan’s test).
Hình 3.4. Callus thân sinh trưởng trên môi trường có bổ sung 0,8 g/L TRYP sau 5 tuần nuôi cấy (bar = 1 cm).
3.1.2.2. Ảnh hưởng của casamino acids
Tương tự đối với TRYP, môi trường cơ bản MS có bổ sung 2,4-D và KIN tốt nhất thu được từ bảng 3.2 được sử dụng để khảo sát ảnh hưởng của CAS lên sự sinh trưởng của callus, kết quả thu được sau 5 tuần nuôi cấy được trình bày ở bảng 3.5.
Kết quả nghiên cứu cho thấy, các môi trường có bổ sung CAS cũng có xu hướng tăng khả năng sinh trưởng của callus so với môi trường đối chứng (không có bổ sung CAS).
Ở môi trường có bổ sung 0,2 g/L CAS, sinh trưởng của callus tương đối tốt, khối lượng tươi đạt 124,5 mg, tương ứng với 8,6 mg khô. Ở môi trường có 0,4 g/L CAS, khả năng sinh trưởng của callus là tốt nhất, khối lượng tươi và khối lượng khô trung bình của chúng (129,7 mg tươi và 8,9 mg khô) cao hơn các môi trường còn lại. Callus có màu trắng ngả vàng và dạng hạt nhỏ (Hình 3.5). Khi tăng nồng độ CAS lên 0,8 g/L, sinh trưởng của callus giảm, khối lượng tươi chỉ đạt 116,5 mg (7,5 mg khô).
Bảng 3.5. Ảnh hưởng của CAS lên khả năng sinh trưởng của callus thân sau 5 tuần nuôi cấy
CAS (g/L) Khối lượng tươi Khối lượng khô
(mg/callus) (mg/callus) 0 121,1a 8,6a 0,2 124,5a 8,6a 0,4 129,7a 8,9a 0,8 116,5ab 7,5b 1,6 109,8b 7,1b
Các chữ cái khác nhau trên cùng một cột chỉ ra sự sai khác có mức ý nghĩa thống kê của trung bình mẫu với p<0,05 (Duncan’s test).
Hình 3.5. Callus thân sinh trưởng trên môi trường có bổ sung 0,4 g/L CAS sau 5 tuần nuôi cấy (bar = 1 cm).
Như vậy, tương tự như với xử lý TRYP, môi trường có bổ sung CAS sinh trưởng của tế bào có tăng lên nhưng không đáng kể, sự sai khác giữa công thức cho hiệu quả tốt nhất và đối chứng không có sự khác biệt mang ý nghĩa thống kê. Từ những kết quả trên, cộng với yếu tố giá thành kinh tế, TRYP hay CAS không được bổ sung vào môi trường trong các nghiên cứu tiếp theo.