Kết quả phân tích tỷ lệ tương đồng về nucleotide các chủng phát hiện được với các chủng tham chiếu bằng phương pháp so sánh cặp (Compute Pairwise Distance) sử dụng phần mềm MEGA7 0 cho thấy các chủng 1230 19-Ha Tien (MK790256 1), 20328-Ca Mau 18 (MK790254 1), 1231 19 Ca Mau (MK790257 1) và 1229 2019 Tra Vinh (MK790255 1) cĩ độ tương đồng cao với nhau với tỷ lệ tương đồng từ 98,30% đến 99,06%; và tương đồng cao nhất với các chủng ở Campuchia như U0520629 (KM366216 1), V0627625 (KM366222 1), và V0808656 (KM366221 1) với tỷ lệ tương đồng 98,30% đến 99,81% Bên cạnh đĩ các chủng phát hiện ở nghiên cứu này cĩ độ tương đồng thấp so với các chủng vaccine với tỷ lệ tương đồng và nucleotide từ 84,67% đến 86,35% Kết quả này phù hợp với kết quả phân tích phả hệ di truyền trước đĩ ở Hình 4 18
Cho đến thời điểm ngày nay, cĩ nhiều nghiên cứu về sự lưu hành và phân tích di truyền phả hệ virus dại ở trên thế giới Nghiên cứu trước đĩ của Chiou et al (2016) cho thấy 97 - 99% tương đồng về nucleotide gen N của virus dại ở ba chủng phân lập từ Taiwan Ferret Badgers Jamil et al (2012) đã cơng bố 98 - 100% tương đồng nucleotide gen N của virus dại từ bảy mẫu não Reddy et al (2011) tìm thấy 88,8 - 99,7% sự tương đồng của gen N giữa 30 chủng virus dại tại Ấn Độ và chủng virus Pasteur tiêu chuẩn Nagrajan et al (2009) nhận thấy rằng các chủng virus dại Nam Ấn Độ tương đồng hơn 95% Bên cạnh đĩ, Susetya et al (2008) so sánh 34 chủng virus dại đã phân lập với 20 chủng virus dại từ các vùng khác và ba chủng virus vaccine cho thấy sự tương đồng nucleotide là 88,4 - 90,2, 86,1 - 88,4, 85,9 - 87,4 và 86,2 - 87,4% với trình tự chủng virus dại từ Trung Quốc, Thái Lan, Ấn Độ và Shri Lanka, tương ứng Kết quả nghiên của nghiên cứu này cịn phù hợp với cơng bố trước đĩ của Chiou et al (2016), Jamil et al (2012) và Nagrajan et al (2009)
Tĩm lại, qua phân tích di truyền và hệ và so sánh tương đồng nucleotide giữa các chủng virus dại phát hiện được ở Hà Tiên, Cà Mau và Trà Vinh với các chủng tham chiếu cho thấy các chủng phát hiện được ở nghiên cứu cĩ nguồn gốc từ thực địa, cĩ quan
hệ di truyền gần với các chủng đang lưu hành tại các nước Đơng Nam Á như Campuchia, Lào và Thái Lan
Bảng 4 31: So sánh mức độ tương đồng về nucleotide giữa các chủng phát hiện được với các chủng tham chiếu Mã số_Chủng (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) Tỷ lệ tương đồng nucleotide (%) 1 KM366216 1_U0520629 2 LN713659 1_SadWistar_3_var01 85,65 3 LN713576 1_SadBatch793_3_var01 85,41 99,44 4 EU182346 1_RB/E3-15 85,65 100,00 99,44 5 M13215 1_PV 85,43 98,87 98,68 98,87 6 GU992320 1_93127FRA 85,41 99,63 99,06 99,63 98,87 7 KM366222 1_V0627625 99,81 85,41 85,17 85,41 85,19 85,17 8 KM366221 1_V0808656 99,81 85,41 85,17 85,41 85,19 85,17 99,63 9 MK790256 1_1230 2019(HaTien) 99,81 85,42 85,17 85,42 85,19 85,17 99,63 99,63 10 MK790254 1_20328 2018(CaMau) 98,30 85,15 84,91 85,15 84,69 84,67 98,11 98,11 98,11 11 MK790257 1_1231 2019(CaMau) 98,49 86,35 86,11 86,35 85,89 85,87 98,30 98,30 98,30 99,06 12 MK790255 1_1229 2019(TraVinh) 99,25 85,39 85,15 85,39 85,41 85,39 99,06 99,06 99,06 98,11 98,30
MK790256 1_1230 2019 (HaTien), MK790254 1_20328 2018 (CaMau), MK790257 1_1231 2019
(CaMau), MK790255 1_1229 2019 (TraVinh) với các chủng tham chiếu KM366216 1_U0520629, LN713659 1_SadWistar_3_var01, LN713576 1_SadBatch793_3_var01, EU182346 1_RB/E3-15, M13215 1_PV,
GU992320 1_93127FRA, KM366222 1_V0627625, KM366221 1_V0808656
Hình 4 16: So sánh trình tự nucleotide của các chủng phát hiện được Trình tự nucleotide một phần gen N virus dại các chủng 1230 19-Ha Tien
(MK790256 1), 20328-Ca Mau 18 (MK790254 1), 1231 19 Ca Mau (MK790257 1) và 1229 2019 Tra Vinh (MK790255 1) đã được căn chỉnh và so sánh với các chủng tham chiếu tại Campochia và chủng vaccine như U0520629 (KM366216 1), V0627625 (KM366222 1), V0808656 (KM366221 1), sadWistar_3_var01 (LN713659, Đức), sad Batch793_3_var01 (LN713578, Đức), RB/E3-15 (EU182346_1, Trung Quốc), RABV (M13215_1, Mỹ), và 93127FRA (GU992320 1, Pháp) Chủng U0520629
(KM366216 1) được phân lập ở Campuchia được sử dụng như chủng tham chiếu để xác định các vị trí khác biệt về nucleotide giữa các chủng Kết quả cho thấy trình tự
nucleotide của các chủng phát hiện được ở nghiên cứu cĩ ít sai khác (16/571 vị trí, Hình 4 20) Trong khi đĩ, các chủng vaccine cĩ nhiều vị trí sai khác hơn so với chủng tham chiếu Những vị trí sai khác này chủ yếu do đột biết thay thế Kết quả này phù hợp với kết quả phân tích di truyền phả hệ và so sánh tương đồng trước đĩ
4 6 4 Đề xuất các biện pháp phịng chống
Bệnh dại cĩ nhiều trung gian truyền bệnh như chĩ, mèo, dơi, chuột, … và vật chủ cuối cùng chính là con người Do đĩ để xây dựng quy trình phịng bệnh dại trên động vật và người cần phải giảm thiểu các nguồn truyền lây virus dại, giảm thiểu số người bị tử vong do bệnh Dại Một số giải pháp quan trọng bao gồm:
4 6 4 1 Quản lý đàn chĩ, mèo
Chính quyền địa phương (cấp xã) tổ chức quản lý việc nuơi chĩ, mèo trên địa bàn: lập danh sách hộ nuơi hoặc sổ quản lý chĩ, mèo, hàng năm cập nhật số liệu chĩ, mèo cần tiêm phịng trước đợt tiêm phịng tập trung để cung cấp cho cơ quan thú y;
Chủ nuơi chĩ, mèo cĩ nhiệm vụ thơng báo với chính quyền địa phương về số lượng, giống, tình trạng tiêm phịng vaccine,… Chủ nuơi chĩ, mèo phải cĩ biện pháp quản lý chĩ, mèo (nhốt, xích) và giữ chúng trong khuơn viên gia đình, hạn chế thả rong trong
nhà, ngồi đường Ở nơi cơng cộng, nơi đơng dân cư, khu đơ thị khi đưa chĩ ra ngồi, phải nhốt, giữ chĩ trong chuồng, cũi hoặc phải rọ mõm và cĩ người dắt
Đối với chĩ, mèo hoang phải tiến hành quây bắt để tiêm phịng vaccine dại, cĩ thể thống kê số lượng để thuận tiện cho việc quản lý, đồng thời thành lập các tổ chức nhân đạo chăm sĩc chĩ, mèo hoang Vận động người dân khai báo khi phát hiện chĩ, mèo hoang cho chính quyền địa phương để xử lý kịp thời
Chính quyền các cấp phải nhanh chống xử lý các ổ dịch bệnh xảy ra Tiến hành tiêu hủy chĩ, mèo mắc bệnh dại Nếu chĩ, mèo nghi mắc bệnh dại khi cắn, cào người thì phải nhốt theo dõi trong 90 ngày dù cĩ hay khơng cĩ tiêm vaccine Chĩ, mèo nghi nhiễm bệnh dại phải nhốt, theo dõi trong 15 ngày
4 6 4 2 Tiêm phịng vaccine dại cho chĩ mèo
Tất cả chĩ, mèo trong diện tiêm phịng bắt buộc phải được tiêm vaccine phịng bệnh dại, bảo đảm mỗi con được tiêm ít nhất 1 lần trong năm và nâng cao tỷ lệ tiêm phịng Tổ chức tháng cao điểm tiêm phịng vaccine dại cho chĩ, mèo (tháng 3 – 4 hằng năm) thực hiện tiêm bổ sung chĩ bị bỏ sĩt hoặc mới phát sinh Vaccine tiêm phịng bệnh dại cho chĩ, mèo phải cĩ trong danh mục vaccine, chế phẩm sinh học, vi sinh vật, hố chất dùng trong thú y được phép lưu hành tại Việt Nam và phải được bảo quản, sử dụng theo hướng dẫn của nhà sản xuất hoặc của cơ quan thú y
Chủ nuơi chĩ, mèo phải chấp hành tiêm phịng vaccine dại cho chĩ, mèo nuơi Nếu khơng chấp hành sẽ bị xử phạt vi phạm theo quy định pháp luật Chĩ, mèo sau tiêm phịng vaccine dại sẽ được cơ quan thú y cấp giấy hoặc mã vạch chứng nhận tiêm phịng theo quy định Sau tiêm phịng, chủ vật nuơi cĩ trách nhiệm theo dõi và giám sát các biểu hiện bất thường của chĩ, mèo Nếu phát hiện con vật cĩ biểu hiện bất thường hoặc vơ cớ cắn, cào người, động vật khác thì phải nhốt ngay con vật đĩ, con vật đã bị cắn, cào để theo dõi và báo ngay cho chính quyền địa phương
Khuyến cáo chủ vật nuơi tiến hành tẩy giun sán cho chĩ, mèo định kỳ và trước khi tiêm vaccine bệnh dại từ 7 – 10 ngày, để nâng cao hiệu quả đáp ứng miễn dịch sau tiêm phịng Chủ vật nuơi nên chủ động tiêm phịng dại cho chĩ, mèo trước khi phối giống để tăng hàm lượng kháng thể mẹ truyền và nâng cao tỷ lệ bảo hộ cho đàn con, vì chĩ mẹ cĩ thời gian sau tiêm phịng từ 10 - 12 tháng thường khơng cịn đủ kháng thể để truyền cho chĩ con, và những chĩ con trên 6 tuần tuổi thì lượng kháng thể thụ động nhận từ mẹ cũng sẽ giảm dưới ngưỡng bảo hộ
Sau tiêm phịng Chính quyền địa phương cĩ thể lấy mẫu để kiểm tra hiệu quả đáp ứng miễn dịch sau tiêm phịng vaccine bệnh dại 21 ngày Nếu tỷ lệ bảo hộ sau tiêm phịng đạt kết quả thấp thì phải tổ chức tiêm phịng lại Nghiên cứu, sản xuất các test kit chẩn đốn nhanh nhằm phát hiện kháng thể virus dại đang lưu hành tại Việt Nam hỗ trợ cơng tác đánh giá hiệu quả sau tiêm phịng vaccine dại, phát hiện các dạng dại tiềm ẩn trên chĩ, mèo và một số động vật khác
4 6 4 3 Điều trị dự phịng cho người sau phơi nhiễm
Người bị chĩ, mèo cào cắn phải được đưa đến cơ quan y tế dự phịng để kiểm tra và tiêm phịng kịp thời, đồng thời nhốt chĩ, mèo lại để theo dõi 15 ngày Trường hợp khơng biết rõ nguồn gốc của con chĩ, mèo đã cắn người thì phải áp dụng ngay các biện pháp điều trị dự phịng cho người như bị chĩ, mèo dại cắn Để chủ động phịng, chống bệnh dại trên đàn chĩ, mèo bảo vệ sức khỏe, đảm bảo an tồn tính mạng con người; các hộ chăn nuơi chĩ, mèo cần thực hiện tốt “5 khơng”: Khơng nuơi chĩ, mèo khi chưa khai báo với chính quyền địa phương; Khơng nuơi chĩ, mèo khơng được tiêm vắc xin phịng bệnh dại; Khơng nuơi chĩ thả rơng; Khơng để chĩ cắn người; Khơng nuơi chĩ, mèo gây ơ nhiễm mơi trường
Xây dựng kế hoạch quốc gia về cung ứng, sử dụng vaccine phịng dại cho người bị chĩ cắn, người cĩ nguy cơ cao phơi nhiễm bệnh dại Kiện tồn và mở rộng số lượng các điểm tiêm vaccine và huyết thanh kháng dại phục vụ cơng tác điều trị dự phịng, đảm bảo khả năng dễ tiếp cận, giá thành thấp, đặc biệt ở khu vực cĩ nguy cơ cao Tại cơ sở tiêm phịng đảm bảo đủ trang thiết bị, vaccine và huyết thanh kháng dại đã được cấp phép sử dụng cĩ chất lượng cao, an tồn, ít phản ứng phụ cho các điểm tiêm phịng
Khuyến khích các địa phương hỗ trợ tiêm vaccine miễn phí cho người nghèo ở khu vực cĩ nguy cơ cao như vùng đồng bào dân tộc thiểu số, vùng sâu, vùng xa, vùng đặc biệt khĩ khăn Khuyến cáo tiêm vaccine dự phịng trước phơi nhiễm cho người cĩ nguy cơ cao như người ở trong vùng dịch, vùng cĩ nguy cơ mắc bệnh dại cao, các cán bộ thú y địa phương, người hành nghề thú y chuyên điều trị bệnh cho chĩ, mèo,…
4 6 4 4 Hồn thiện các văn bảng quy phạm pháp luật, tuyên truyền nâng cao nhận thức của người dân về mức độ nguy hiểm của bệnh Dại
Hồn thiện các văn bản quy phạm pháp luật theo hướng răn đe và nâng cao nhận thức của người nuơi chĩ, mèo về mức độ nguy hiểm của bệnh dại Cĩ thể xem xét tăng mức xử phạt vi phạm trong phịng, chống bệnh dại ở động vật Kinh phí thực hiện tiêm phịng do chủ vật nuơi thanh tốn hoặc do chính quyền địa phương xem xét hỗ trợ tiêm phịng vaccine dại
Tuyên truyền phổ biến các văn bản pháp luật, các chính sách của Nhà nước về phịng, chống bệnh dại; các quy định liên quan và trách nhiệm của người nuơi chĩ, mèo Tuyên truyền về việc hạn chế nuơi chĩ, mèo, nếu gia đình cĩ nhu cầu nuơi thì chỉ nên nuơi 01 con để giảm tổng đàn chĩ, mèo của Việt Nam Nếu chủ vật nuơi khơng đủ điều kiện kinh tế nuơi dưỡng, cĩ thể hạn chế số lần đẻ trong suốt đời sống của chĩ, mèo để giảm số lượng chĩ mèo hoang
- Tuyên truyền nâng cao nhận thức cộng đồng về sự nguy hiểm của bệnh dại và các biện pháp phịng chống bệnh dại ở người; hướng dẫn người bị chĩ cắn xử lý y tế ban đầu ngay sau khi bị chĩ cắn và đến các cơ sở y tế để được điều trị dự phịng kịp thời Tăng cường vận động cộng đồng cùng tham gia giám sát, phịng chống bệnh dại trên
người và động vật Phát động và tổ chức ngày "Thế giới phịng chống bệnh dại" vào ngày 28/9 hàng năm tại Việt Nam Tuyên truyền việc xây dựng vùng an tồn bệnh dại
4 6 4 5 Nâng cao năng lực chuyên mơn, giám sát, chẩn đốn và xét nghiệm trong phịng chống bệnh dại
Chuẩn hĩa chương trình tập huấn và tài liệu đào tạo về phịng chống bệnh dại cho hệ thống y tế, thú y về vaccine phịng bệnh dại cho người và động vật; kỹ năng thu thập, bảo quản và vận chuyển mẫu bệnh phẩm động vật nghi mắc bệnh dại, bảo đảm an tồn cho người thực hiện và chất lượng của mẫu; quản lý đàn chĩ địa phương, kỹ năng bắt chĩ, mèo thả rơng; kỹ năng truyền thơng cộng đồng trong cơng tác phịng, chống bệnh dại
Tập huấn kỹ năng điều tra, giám sát, chẩn đốn xác định bệnh dại (ở chĩ và ở người), phân tích tình hình dịch tễ, xác định vùng, nhĩm người cĩ nguy cơ lây truyền bệnh dại, tiêm phịng vaccine dại cho chĩ, mèo và cho người cĩ nguy cơ cao, xử trí vết cắn và điều trị dự phịng dại cho người bị chĩ, mèo cắn, xử lý ổ dịch bệnh dại
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
5 1 Kết luận
Tổng đàn chĩ của 13 tỉnh vùng ĐBSCL từ năm 2017 đến năm 2020 dao động từ 1 059 727 đến 1 115 503 con và cĩ tỷ lệ trung bình/tỉnh là 335 072 con Tỷ lệ tiêm phịng của tồn vùng đạt từ 38,38% đến 45,72% và cĩ tỷ lệ trung bình/tỉnh là 41,1%
Số người tiêm phịng dại dự phịng từ năm 2017 đến năm 2020 tại 13 tỉnh/thành vùng ĐBSCL khơng tăng và giao động từ 155 594 người đến 175 396 người
Từ năm 2018 đến tháng 8 năm 2021 tại ĐBSCL cĩ 37 mẫu giám sát bệnh dại trên động vật dương tính, cĩ 67 người chết vì bệnh dại
Tỷ lệ chĩ cĩ kháng thể kháng virus dại là 5,94% trên đàn chĩ thả rơng khơng tiêm phịng tại Bến Tre Khơng cĩ sự khác biệt về tỷ lệ kháng thể kháng virus dại trên chĩ ở các giống, lứa tuổi, giới tính và khu vực nuơi
Tỷ lệ chĩ cĩ kháng thể kháng virus dại tại các điểm thu gom chĩ ở TP Cần Thơ là 14,13% Các yếu tố như lứa tuổi, giống, giới tính, khu vực nuơi khơng ảnh hưởng đến khả năng sinh kháng thể kháng virus dại Mèo tại nơi thu gom cĩ kháng thể kháng virus dại chiếm tỷ lệ 1,69%
Tỷ lệ chĩ kháng thể bảo hộ sau tiêm phịng bằng vaccine Rabisin®mono (Merial) tại tỉnh Kiên Giang là 79,08% Khu vực, lứa tuổi, giống, thời điểm lấy mẫu sau tiêm phịng vaccine dại cĩ ảnh hưởng đến khả năng sinh kháng thể Yếu tố về giới tính khơng ảnh hưởng đến khả năng sinh miễn dịch của chĩ sau tiêm phịng vaccine dại
Miễn dịch thụ động của chĩ con về tỷ lệ bảo hộ, hàm lượng kháng thể tỷ lệ thuận với chĩ mẹ và biến thiên theo tuổi sau tiêm phịng của chĩ mẹ và tuổi của chĩ con Chĩ mẹ cĩ thời gian sau tiêm phịng từ 10-12 tháng thơng thường khơng cịn đủ kháng thể để truyền cho chĩ con, và những chĩ con trên 6 tuần tuổi thì lượng kháng thể thụ động nhận từ mẹ cũng sẽ giảm dưới ngưỡng bảo hộ
Tỷ lệ cĩ kháng thể kháng virus dại trên dơi là 3,33%; và tại tỉnh Kiên Giang là 10% và Hậu Giang là 2,5%
Cả 4 chủng 1230 2019, 20328-Ca Mau 18, 1231 2019 và chủng 1229 2019 Trà Vinh cĩ khoảng cách di truyền gần gũi và tương đồng cao với chủng vaccine Pháp 93127FRA (vaccine RABISIN ngừa dại đang được sử dụng rộng rãi ở Việt Nam)
5 2 Đề nghị
Nghiên cứu thêm về dịch tễ học bệnh dại trên động vật hoang dã, đặc biệt là lồi dơi tại ĐBSCL
Tiếp tục nghiên cứu kháng thể thụ động được truyền từ mẹ sang con Tiếp tục nghiên cứu về dịch tễ học phân tử bệnh dại tại ĐBSCL
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Nguyễn Thị Kiều Anh, Nguyễn Vĩnh Đơng, Nguyễn Tuyết Thu, Ngơ Châu Giang, Satoshi Inoue, Nguyễn Thị Hồng Hạnh, 2012 Đặc điểm phân tử nucleoprotein của một số chủng loại virus dại lưu hành ở miền Bắc Việt Nam, 2010-2011 Tạp chí y học dự phịng Tập XXII, số 7(134) 2012
Chỉ thị số 31/CT-TTg của Thủ tướng Chính phủ ngày 06 tháng 7 năm 2017 về việc tăng cường các biện pháp cấp bách phịng, chống bệnh dại