Vận hành
Xác định thông số cho peak quan tâm
thả xuống bảng chất phân tích có sẵn. Các tùy chọn sẵn có:
• Định lượng
• Định tính
• IS (Nội chuẩn)
2. Chỉ định nội chuẩn (Internal Standard) cho hợp chất tương ứng nếu cần. Sao chép tên của nội chuẩn (Internal Standard) từ cột Analyte Name và dán vào cột Internal Standard cho
từng hợp chất tương ứng, và nhập nồng độ vào cột Internal Standard. 3. Xác định cửa sổ Retention Time Search bằng cách:
• Nhập trực tiếp khoảng thời gian vào cửa sổ tìm kiếm trong ô.
HOẶC
• Đến sắc ký đồ, giữ phím Ctrl trên bàn phím, nhấp và kéo chuột qua peak quan tâm để xác định cửa sổ tìm kiếm thời gian lưu.
Lưu ý: Theo mặc định, phần mềm giả định tổng thời gian chuyển đổi là cửa sổ tìm kiếm cho peak
quan tâm.
4. Bấm vào ô dưới cột Smoothing cho mỗi chất phân tích (Analyte component) để mở hộp thoại Smoothing Settings. Tại đây người dùng có thể áp dụng thuật toán làm mịn
(smoothing algorithm) nếu muốn; cài đặt mặc định là làm mịn Savitzky-Golay ở 7 điểm cho một lần lặp.
Với Tích hợp (Integrate) ở Trục X, chọn Yes. (Đường nền là điểm trên nhiễu (ở peak) nơi tín hiệu rõ ràng. Nếu cài đặt Tích hợp ở trục X bị tắt, hệ thống tích hợp từ ngưỡng tới đỉnh; nếu cài đặt thành Yes, hệ thống tích hợp từ trục tới đỉnh.)
Lưu ý: Theo mặc định, phần mềm giả định tổng thời gian chuyển đổi là cửa sổ tìm kiếm cho peak
quan tâm.
6. Nhấp đúp vào cột để cài đặt cửa sổ tìm kiếm Thời gian lưu (Retention Time) (nhập bên trái, dấu phẩy bên phải), hoặc trên đồ thị nhấp vào Ctrl + bấm chuột trái để xác định trực quan thông số. Mỗi ô phải chứa cùng một giá trị (bấm chuột phải vào mục nhập đầu tiên và sau đó chọn Fill Down).
7. Sau khi cài đặt tất cả các thông số cho mỗi Hợp chất phân tích (Analyte Components), nhấp vào Save Quantitation Method. Phương pháp định lượng sẽ được lưu trong cùng một thư mục với các tệp mẫu có tên tệp mặc định là NewMethod-1.qmx. Người dùng có thể để nguyên tên, hoặc nhập tên mới trước khi lưu.
Hiển thị EIC cho Hợp chất quan tâm
Có thể tải nhiều tệp mẫu để xác minh chất lượng sắc ký đồ cho mỗi hợp chất và quá trình chuyển đổi MRM. Việc lựa chọn tệp mẫu không ảnh hưởng đến bất kỳ cài đặt thông số nào mà người dùng đã chỉ định (Nội chuẩn -Internal Standard, Nồng độ IS - IS Concentration, Thuật toán làm mịn - Smoothing, Cách lựa chọn Peak - Peak Selection Method, và Cửa sổ tìm kiếm thời gian lưu - Retention Time Search Window).
1. Chọn tệp mẫu bằng cách nhấp vào mẫu hoặc chất phân tích từ bảng. Xem lại các ô.
2. Nhấp đúp vào ô để mở hộp thoại nơi có thể sửa đổi cấu hình hiển thị và làm mịn thông số. 3. Bấm vào tùy chọn Display Configuration… để mở hộp thoại Settings Editor. Chọn tùy chọn
hiển thị mong muốn, như hiển thị, điểm, ngưỡng ghi nhãn peak, v.v… cho sắc ký đồ đã chọn.
Hình 23: Phương pháp định lượng — Hiển thị EIC cho hợp chất quan tâm
Xử lý dữ liệu