- Phân đoạn 9 (156 mg) được axetyl hoá bằng anhydrit axetic trong dung môi pyridin, tinh chế bằng sắc ký cột nhanh trên SiO 2 (nhexan:EtOAc =
67 so với tài liệu tham khảo được nêu ở Bảng 3.1 Trước đây cyclomusalenon đ ã được phân lập từ cây chuối hột [ 54, 55] Đây là lần đầu tiên chất này
3.3.2. Kết quả thử hoạt tính sinh học đối với cách ợp chất mới: LHRn2 LHRm2, LHRm
LHRm2, LHRm4
Chúng tôi tiến hành thử hoạt tính sinh học của 3 chất mới tách được từ cây cọ hạ long, kết quả như sau:
*) Hoạt tính gây độc tế bào (Bảng 3.13) Bảng 3.13. Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào củacác chất 76 và 78 Kết quả: giá trị IC50(g/ml) STT Tên mẫu KB LU MCF7 HepG2 1 76 (LHRm2) 53,0 68,37 85 72,29 2 78 (LHRm4) >128 >128 >128 >128 CTK Ellipticin 0,62 – 1,25
Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào ung thư người ở bảng 3.13 cho thấy: Chất mới 76 (LHRm2) có hoạt tính gây độc với cả 4 dòng tế bào ung thư thử
nghiệm KB, LU, MCF7 và HepG2 với các giá trị IC50 tương ứng là: 53,0; 68,37; 85; 72,29 g/ml. Chất mới 78 (LHRm4) không thể hiện hoạt tính (IC50>128
g/ml). Chất mới 73 (LHRn2) không được thử vì lượng mẫu thu được ít quá.
Điều đáng chú ý ở đây là: Chất LHRm2 và LHRm4 chỉ khác nhau ở gốc đường β- D-glucose gắn ở vị trí 5-OH. Ở chất LHR.m2 là gốc 5-OH tự do ( aglycon), còn
ở chất LHR.m4 thì gốc 5-OH đã bị glucosid hóa. Song sự khác nhau trong hoạt
tính gây độc tế bào thì rất rõ rệt. Aglycon (LHRm2) thì ức chế cả 4 dòng tế bào
ung thư thử nghiệm, còn glucosid (LHRm4) thì hoàn toàn không. Như vậy có thể sơ bộ kết luận là nhóm 5-OH tự do đóng vai trò quan trọng cho hoạt tính gây độc tế bào của lớp chất này. *). Hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định (Bảng 3.14) Bảng 3.14. Kết quả thử hoạt tính kháng vi sinh vật của các chất 76 và 78 Nồng độức chế 50% sự phát triển của vi sinh vật và nấm IC50(μg/ml) Gram (+) Gram (-) Nấm STT Tên mẫu Staphylococcus aureus Bacillus subtilis Lactobacillus fermentum Salmonella enterica Escherichia coli Pseudomonas
aeruginosa Candida albicans
1 78
(LHRm4) 27,76 >128 >128 >128 >128 >128 >128
2 76
(LHRm2) >128 >128 >128 >128 >128 >128 >128 Kết quả ở bảng 3.14 cho thấy: Chất mới 78 (LHRm4) thể hiện khả năng
kháng một cách chọn lọc chủng vi khuẩn Gram (+) Staphylococcus aureus với giá trị IC50 : 27,76 μg/ml. Đặc biệt, hiện nay trên thế giới chủng vi khuẩn Gram (+)
Staphylococcus aureus đã kháng lại với hầu hết các kháng sinh mạnh đang sử
dụng. Trong khi đó chất mới 78 LHRm4 lại thể hiện hoạt tính kháng sinh chọn lọc đối với loại vi khuẩn này. Đây là kết quả đáng quan tâm của chất mới và gợi ý việc nghiên cứu sâu rộng hơn về hoạt tính kháng sinh của LHRm4. Chất mới 76
hoạt tính gây độc tế bào (Bảng 3.12), ta thấy chất 76 (LHRm2) ngược lại thể hiện hoạt tính với cả 4 dòng tế bào ung thư thử nghiệm, trong khi đó chất 78 LHRm4 thì không có hoạt tính với cả 4 dòng. Ở đây có một vấn đề lý thú về tương quan
giữa hoạt tính sinh học và cấu trúc phân tử của LHRm4 (glucosid) và LHR.m2 (aglycon), cần tiếp tục nghiên cứu sâu hơn.
*). Hoạt tính chống oxi hoá của chất mới 73
Chất mới 73 (LHRn2) có cấu trúc phân tử tương đối giống -tocopherol
(Vitamin E), một hợp chất thiên nhiên có tính chất chống oxy hóa mạnh. Sự khác nhau giữa vitamin E và chất 73 là ở mạnh nhánh và nhóm 6-OH. Mạch nhánh của chất 73 có chứa nhóm isopropenyl thay vì nhóm isopropyl trong vitamin E. Nhóm 6-OH của vitamin E đã bị acetyl hóa trong chất 73. Chúng tôi đã tiến hành thử
hoạt tính kháng oxy hóa của chất 73, kết quả đã được đưa ở bảng 3.15. Bảng 3.15. Kết quả thử hoạt tính chống oxi hoá của chất mới 73 STT Ký hiệu mẫu IC50 (μg/ml) 1 73 (LHRn2) >128 Đối chứng dương Resveratrol 5,24
Kết quả thử hoạt tính chống oxi hoá ở bảng 4.15 cho thấy: Chất mới 73
(LHRn2) không có hoạt tính chống oxi hoá (IC50>128 g/ml). Như vậy mạch nhánh và nhóm 6-OH tự do đóng vai trò quan trọng đối với hoạt tính kháng oxy hóa của -tocopherol.