Đặc điểm trẻ hen phế quản
- Tuổi. - Giới.
- Tuổi xuất hiện khò khè.
- Tuổi chẩn đoán xác định hen phế quản.
- Các yếu tố nghi ngờ gây khởi phát cơn hen cấp.
- Tiền sử dị ứng bản thân: viêm mũi dị ứng, chàm, mày đay và bệnh dị ứng khác.
- Tiền sử của gia đình: Tiền sử hen phế quản và viêm mũi dị ứng của ông bà, bố mẹ, anh chị em ruột.
N= Z2(1-α/2) x P x (1-P) d2
- Bậc hen.
- Thời gian nằm viện.
Các xét nghiệm cận lâm sàng
+ Công thức máu: Số lượng bạch cầu.
Bạch cầu đa nhân trung tính. Số lượng bạch cầu ái toan:
Bạch cầu ái toan được gọi là tăng khi tỷ lệ phần trăm tăng trên 5% so với giá trị bình thường (bạch cầu ái toan bình thường là 2-4%).
Bảng 2.3: Phân loại bạch cầu bình thường theo lứa tuổi [8]
Tuổi Số lƣợng bạch cầu (109/l) TB giới hạn Bạch cầu trung tính (%) TB giới hạn% <6 tháng 11,9 (6,0-17,5) 3,8 (1,0-8,5) 32 6 tháng-<2 tuổi 11,4 (6,0-17,5) 3,5 (1,5-8,5) 31 2 tuổi-<4 tuổi 10,6 (6,0-17,0) 3,5 (1,5-8,5) 33 4 tuổi-<6 tuổi 9,1 (5,5-15,5) 3,8 (1,5-8,5) 42 6 tuổi-<8 tuổi 8,5 (5,0-14,5) 4,3 (1,5-8,0) 51 8 tuổi-<10 tuổi 8,3 (4,5-13,5) 4,4 (1,5-8,0) 53 10 tuổi-<16 tuổi 8,1 (4,5-13,5) 4,4 (1,8-8,0) 54
+ Test dị nguyên:
Tên dị nguyên Dƣơng tính (mm) Âm tính (X)
Chứng âm Chứng dương Mạt nhà (Farinae) Mạt nhà (Pteronyssinus) Gián Bào tử nấm Bụi nhà Lông mèo Lông chó Bột mỳ Cua Tôm Trứng Lạc Cao su Sữa
+ Xét nghiệm Rhinovirus: Lấy dịch tỵ hầu tìm Rhinovirus được thực hiện tại khoa Vi sinh Bệnh viện Nhi Trung Ương, theo phương pháp phản ứng chuỗi men (PCR).
* Lấy bệnh phẩm xét nghiệm
- Được thực hiện theo qui trình của Bệnh viện Nhi Trung Ương. Kết quả được thẩm định theo tiêu chuẩn quốc tế và ghi theo mẫu bệnh án nghiên cứu.
- Kỹ thuật lấy dịch tỵ hầu:
+ Dùng sonde hút cỡ 6 – 8.
+ Luồn ống hút vào đường mũi với khoảng cách bằng 1/2 khoảng cách từ cánh mũi đến dái tai của trẻ.
+ Dùng bơm tiêm 5ml hút khoảng 1ml dịch tỵ hầu.
+ Cắt đầu ống sonde có chứa dịch tỵ hầu cho vào ống xét nghiệm vô khuẩn và gửi ngay đến phòng xét nghiệm của khoa Vi sinh.
* Phân lập virus trong dịch tỵ hầu bằng kỹ thuật PCR
- Thiết bị và địa điểm: Bệnh phẩm nghiên cứu được thu thập tại khoa Miễn dịch Dị ứng và phân lập virus tại khoa Vi sinh Bệnh viện Nhi Trung Ương bằng kỹ thuật sinh học phân tử trên máy Bio Rad CFX96TM
Real – Time System CC3071.
- Phương pháp RT-PCR phát hiện Rhinovirus là một kỹ thuật hiện đại và chính xác hiện nay. Qui trình được tiến hành như sau:
Tóm tắt quy trình phát hiện Rhinovirus
Hình 2.1: Ảnh mẫu dương tính của Rhinovirus.
(Mẫu 21 dương tính, mẫu 48 âm tính)
Thu thập và xử lý mẫu
Nguyên lý: Dùng tăm bông và dung dịch bảo quản
Tách triết RNA
Nguyên lý: Phương pháp tủa (Chomczynski & Sacchi, 1987).
Thực hiện RT - PCR
Nguyên lý: dùng enzyme phiên mã ngược chuyển RNA thành cDNA cDNA
Thực hiện PCR
Nguyên lý: Primer đặc hiệu cho mỗi tác nhân.
Điện di trên gel Agarose
Hình 2.2: Máy RT-PCR
* So sánh đặc điểm cơn hen phế quản cấp khởi phát do Rhinovirus và nhóm không nhiễm Rhinovirus.
- Tỷ lệ nhiễm Rhinovirus theo nhóm tuổi.
- Mối liên quan giữa nhiễm RV với triệu chứng lâm sàng HPQ. - Mối liên quan giữa nhiễm RV với mức độ nặng cơn hen. - Mối liên quan giữa RV với thay đổi số lượng bạch cầu. - Mối liên quan giữa RV với bạch cầu ái toan.