Các dịch chiết của lá và quả loài C. indochinensis, lá loài M. kurzii và
quả loài M. tanarius, các phân đoạn và các chất sạch phân lập được từ 3 cây
trên được thử hoạt tính gây độc tế bào trên dòng tế bào KB tại Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên tại Gif-sur-Yvette (CNRS - Cộng hòa Pháp). Các hợp chất bán tổng hợp được thử hoạt tính gây độc tế bào trên dòng tế bào ung thư biểu mô KB tại Viện Hóa học – Viện Khoa học và Công nghệ Việt nam.
Phép thử hoạt tính gây độc tế bào của các chất phân lập và các dịch chiết của loài C. indochinensis, lá loài M. kurzii và quả loài M. tanarius được tiến hành trên dòng tế bào ung thư biểu mô KB. Các tế bào KB được bảo quản trong môi trường Dullbecco’s (D-MEM: Dullbecco Medium), sau đó được thêm vào 10% huyết thanh, L-glutamine (2mM), penicilin G (100 UI/ml), steptomycin (100 µg/ml) và gentamicin (10 µg/ml). Dung dịch gốc của các
chất đem thử được pha trong hỗn hợp dung môi DMSO /H2O tỉ lệ thể tích 1/9,
phép thử gây độc tế bào của các chất được tiến hành trên khay 96 giếng làm ba
lần với dòng tế bào ung thư biểu mô vòm họng của người KB (3A0
~103 tế bào/mL) dùng phương pháp cải tiến so với phương pháp đã công bố [37, 38].
Sau khi nuôi cấy trong vòng 72 giờ tại nhiệt độ 370C trong môi trường hỗn
hợp không khí /CO2 (95:5) có hoặc không có hợp chất cần thử, sự phát triển
của các tế bào được đánh giá bằng phương pháp đo màu. Các tế bào còn sống được nhuộm màu bằng chất chỉ thị neutral red. Mật độ quang được đo tại bước
sóng 540 nm trên máy đo quang Titertek Multiscan. Giá trị IC50 được xác định
32
CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM