DHA và các dẫn xuất của nĩ được cơ lập từ hỗn hợp các acid béo bất bão hịa đa từ nguồn tự nhiên bằng phương pháp bạc nitrate. Phương pháp bao gồm sự tính tốn lượng bạc nitrate cần để tạo phức với các acid bất bão hịa đa dựa trên số mol nối đơi cĩ trong acid béo bất bão hịa.
DHA được tách chiết và tinh sạch từ dầu cá ngừ bằng phương pháp tách chiết nhiệt độ thấp kết hợp với phương pháp kết tinh sắc ký cột Ag+/silica gel hoặc phương pháp riêng lẻ
với sắc kí cột Ag+/silica gel. Dung mơi giải ly cột là hỗn hợp của aceton (hoặc diethyl ether)-hexane.
Một phương pháp khác được sử dụng để tinh sạch hỗn hợp các acid béo methyl ester từ dầu cá hoặc dầu thực vật là phương pháp sắc ký lớp mỏng ion bạc. Các bản mỏng silica gel được nhúng trong 1 phút vào dung dịch bạc nitrate 4% trong methanol-nước (9:1). Sau đĩ bản mỏng được sấy khơ 2 phút dưới ánh sáng mờ trong tủ sấy thơng giĩ và tiếp tục trong 20 phút ở 1000C. Chúng được giữ trong 1 hộp được đậy kín ở trong tối.
Dung mơi giải ly cĩ thể là hexane-diethyl ether (9:1) để tách các acid béo bão hịa, acid béo cĩ 1 nối đơi và acid béo cĩ 2 nối đơi, hoặc là toluen-ethyl acetate (9:1) để tách tất cả các loại acid béo theo độ bất bão hịa.
Tỷ lệ dung mơi cĩ thể thay đổi 1 ít theo điều kiện thí nghiệm (loại bản mỏng, độ ẩm, nhiệt độ, hình dạng của bình giải ly …) để nâng cao hiệu quả của việc phân tách. Việc thêm 1% acid acetic theo thể tích vào pha động cho phép các vết acid béo đạt độ phân giải tốt. Bảng mỏng được sấy trong tủ sấy thơng giĩ, nhúng vào dung dịch nước đã bão hịa sodium thiosulphate trong 1 phút và rửa dưới dịng nước chảy trong 1 phút. Sau đĩ tiếp tục sấy khơ và phun xịt với primuline để phát hiện các vết acid béo phát huỳnh quang dưới đèn UV.