ạ Nguyờn lý
Xỏc định hiệu lực bất hoạt là kiểm tra chắc chắn khụng cũn virus cỳm hoạt động sau khi đó bất hoạt.
Mẫu thử được tiờm cho cỏc nhúm trứng gà cú phụị Kết quả đạt yờu cầu nếu sau hai lần cấy chuyền trứng sống trờn 80% và dịch niệu cú phản ứng HA õm tớnh.
b. Tiến hành
* Chuẩn bị trứng
- 10 trứng cho mỗi độ pha loóng mẫụ - 5 trứng cho chứng dương.
- 5 trứng cho chứng õm.
- Khử trựng trứng bằng cồn 700.
- Soi đỏng dấu buồng khớ và vị trớ tiờm, đục lỗ tại vị trớ tiờm.
* Chuẩn bị mẫu
- Mẫu được trung hũa formalin tồn dư bằng NaHSO3 (NaHSO3 được pha loóng với PBS tỷ lệ 1: 8). 3 ml mẫu + 30 àl NaHSO3/30 phỳt ở nhiệt độ phũng.
- Pha loóng mẫu trong dung dịch PBS theo bậc 10 từ dộ pha loóng 10-1 - 10-10.
* Tiờm trứng
- Mẫu: Mỗi độ pha, tiờm 0,2 ml/trứng, thực hiện tiờm 10 trứng. - Chứng õm (-): Tiờm 0,1 ml PBS/ trứng, thực hiện 5 trứng.
- Chứng dương (+): Tiờm 0,1 ml chủng virus/trứng, thực hiện 5 trứng. - Ủ trứng trong tủ ủ ở 350C /72 giờ /độ ẩm 65 - 70%.
- Ủ lạnh: Đặt toàn bộ trứng sống vào tủ lạnh 2 - 80C/12 giờ để giết phụị - Thu gặt 0,5 ml dịch niệu của mỗi quả trứng sống, hộn lại và thực hiện tiờm truyền lần haị
Thực hiện tiờm truyền lần hai như lần một nhưng thay mẫu bằng dịch niệu của trứng. Sau quỏ trỡnh ủ thỡ thu hoạch dịch niệu của trứng cũn sống để làm phản ứng HẠ