I. Phươngpháp ENZYMATIC(U.V TEST ): 1.nguyên tắc :
Glucose có ở trong máu
3.3 Glucose chuẩn dự trữ 1g% Glucose 1g
Glucose………..1g Acid Benzoic 1%...100ml Bền 3 đến 6 tháng ở 4o C 3.4 Glucose trực dụng 100mg % Glucose dự trữ 1%...10ml Acid Benzoic 1%...100ml Giữ ở 4o C 4. Kỹ thuật
Hòa tan o-toluidine (60 ml) và thiocarbamide (1,5 g) bằng acid acetic (tập trung)
Standard glucose giải pháp để ghi đường cong hiệu chuẩn:
Sử dụng một biện pháp tích pipette 10,0-10,0 ml nước cất vào 5 ống nghiệm được đánh số 1-5. Sau đó, thêm 10 giải pháp glucose mM vào ống nghiệm theo sau đây: 1 ml dung dịch glucose để kiểm tra ống 1; 2 ml dung dịch glucose để kiểm tra ống 2; 3 mL để kiểm tra ống 3; 4 mL để kiểm tra ống 4 và 5 ml dung dịch glucose để kiểm tra ống 5. Trộn đều hỗn hợp của các ống nghiệm bằng cách lắc và tính toán nồng độ
glucose trong mỗi ống. Đặt tất cả các mẫu vào trong nước sôi trong 10 phút và sau đó làm nguội, dùng biện pháp hấp thu chúng tại bước sóng 680 nm. Ghi lại kết quả trong một bảng.
• * Vẽ đường cong hiệu chuẩn trên giấy mm và đọc các nồng độ của các mẫu chưa biết.
Đong 2 mL của thuốc thử o-toluidine thành một bộ ống nghiệm, đánh số 0-6. (Tức là, có những ống 7 thử
nghiệm trong thiết lập này) sử dụng. Một nhãn, 2 ml- pipette an toàn để đo độ tinh khiết o-toluidine. Thêm 2,0 ml của dung dịch chuẩn thích hợp, pha loãng mẫu glucose dự trữ cho các ống nghiệm 1-5. Sử dụng một pipette tự động để đo glucose. Các ống nghiệm "0" là ống tham chiếu (hoặc trống), thêm 2,0 ml nước cất để làm giảm nồng độ glucose. Cuối cùng lấy 2,0 ml dung dịch có nồng độ chưa biết để kiểm tra ống 6. Dùng
• Sau đó đem đo bằng máy quang phổ kế.
• Bật quang kế (colorimeter ) với ON / OFF nút.
– Điền vào một cuvette đã làm sạch với mẫu từ các ống nghiệm 0
(tham chiếu). (Sugar nồng độ là 0 mM trong mẫu này.) Đặt bước sóng 680 nm để đo
• Lau khô bên ngoài của cuvette chứa mẫu, đưa vào quang kế và nhấn
nút "R". Cài đặt chương trình cho máy.
Điền cuvettes với mỗi mẫu còn lại, đưa vào quang kế, nhấn "T" nút và đọc hấp thu của chúng.