• 1 - Dụng cụ • Dụng cụ lấy máu tĩnh mạch • Giá ống nghiệm • Ống nghiệm to, nhỏ • Quả bóp to nhỏ • Pipet nhỏ giọt • Pipet 10ml (1) • Máy li tâm • Micropipet 0,1ml (1)
2 - Thuốc thử
• 2.1. Dung dịch Natrihydroxit bão hòa: (khoảng 18N)
không lẫn carbonat:
• Natrihydroxit viên: 200g • Nước cất: 200ml
• Hòa tan, nút kín để lắng nhiều ngày, gạn lấy phần dung dịch
trong, bảo quản trong lọ nút kín (lọ polyetilen)
• 2.2. Dung dịch Natrihydroxit 10% (theo thể tích) không
lẫn carbonat.
• Dung dịch Natrihydroxit bão hòa: 42ml
• Nước cất đun sôi, để nguội (vừa đủ): 300ml • Lắc đều, bảo quản trong lọ polyetylen nút kín.
• 2.3. Thuốc thử Biuret (Biure) theo Gornall: • Đồng sulfat (CuSO4.5H2O): 1,5g
• Natri Kalitactrat: muối seignette (NaKC4H4O6.4H2O): 6g
• Nước cất 500ml • Hòa tan rồi thêm: • Kali Iodua: 1g
• Dung dịch NaOH 10%: 300ml
• Vừa cho vừ lắc rồi hoàn thành vừa đủ 1000ml bằng nước
cất, lắc kỹ bảo quản trong lọ màu, nút kín để trong tối, bỏ đi khi có cặn. Tốt nhất là chỉ pha ít một để dùng. Nghĩa là để riêng dung dịch đồng sulfat và dung dịch NaOH 10% khi cần mới trộn lẫn theo như công thức qui định.
• 3 - Bệnh phẩm:
• Xét nghiệm trên huyết thanh không tan máu. Khi lấy máu bệnh nhân trước hết phải nằm nghĩ ít nhất 30 phút trước đó. Không được dùng dây garo vì máu ứ lại làm cho nồng độ protein tăng lên nhiều.
• III - THAO TÁC KỸ THUẬT: • Tiến hành:
• 1 - Chuẩn bị đủ dụng cụ, thuốc thử.
• 2 - Lấy máu đúng kỹ thuật
• 3 - Lấy huyết thanh không vỡ hồng cầu, dùng 2 ống
• 4 - Mao dẫn chính xác 0,1 ml huyết thanh vào ống thử (T)
(hoặc 0,05ml huyết thanh)
• 5 - Hút chính xác 8ml thuốc thử Biuret vào ống thử, ống
trắng (hoặc 4ml thuốc thử)
• 6 - Hút tráng micropipet vào ống thử (lấy hết lượng huyết
thanh)
• 7 - Lắc thật đều, để tiếp xúc 30 phút
• 8 - Đo máy quang kế (bước sóng 560nm) cóng 1cm, đối chiếu nước cất.
• 9 - Tính kết quả dựa vào biểu đồ mẫu, hệ số protein, hoặc
ống mẫu
• 10 - Tác phong: vô khuẩn, gọn, đúng kỹ thuật, đúng thời