4. Ý nghĩa khoa học
1.6 Nuôi cấy sinh khối rễ tơ
Rễ tơ là tên gọi dùng để chỉ các lông rễ đƣợc sản sinh ra mạnh mẽ tại vị trí bị nhiễm bởi vi khuẩn Agrobacterium rhizogenes. T-DNA từ A. rhizogenes sau khi chuyển vào tế bào thực vật thì chúng sẽ đƣợc gắn vào bộ gene của thực vật, từ đó tế
bào thực vật sẽ làm nhiệm vụ biểu hiện các gene rol và gen aux (tổng hợp ra IAA)
làm tăng khả năng tạo các lông rễ một cách mạnh mẽ ngay tại vị trí bị tổn thƣơng ở mô thực vật đó. Số lƣợng các lông rễ đƣợc tạo ra khá nhiều, phát triển thành một hệ thống lông rễ, hay còn gọi là hệ thống rễ tơ.
1.7 ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG BIỂU HIỆN CỦA GEN Ở CÁC MƢC ĐỘ KHÁC NHAU
Trong từng giống, loài, mỗi loại tế bào, tại các giai đoạn phát triển, sinh trƣởng khác nhau, dƣới tác động của các điều kiện ngoại cảnh, và đặc điểm di truyền của từng giống các nhóm gen đặc hiệu sẽ đƣợc biểu hiện để tạo ra các sản phẩm của gen (dịch mã ra protein) thông qua ARN thông tin (quá trình phiên mã). Sinh tổng họp tinh bột là quá trình phức tạp, có sự tham gia biểu hiện của nhiều gen. Việc so sánh hoạt động biểu hiện của những gen tham gia vào quá trình tổng họp tinh bột đƣợc hoạt hóa ở
những giống, dòng nhất định dƣới tác động của ngoại cảnh sẽ cho phép tìm hiểu đƣợc vai trò của từng gen hoặc nhóm gen có tính quyết định trong các quá trình sinh tổng hợp tinh bột ở sắn. Việc biểu hiện mạnh, yếu hoặc không biểu hiện của gen đƣợc thể hiện trƣớc hết qua RNA thông tin, dùng làm khuôn mẫu tổng hợp nên các enzyme chức năng, xúc tác cho chủ trình sinh tổng hợp tinh bột. Với khuôn mẫu là ARN tổng số tách chiết từ các mẫu sắn thông qua bƣớc tổng hợp cDNA, phƣơng pháp PCR định lƣợng (quantitative realtime PCR hay qRT-PCR) sẽ đƣợc sử dụng để đánh giá mức độ biểu hiện của các gen quan tâm tại các mô cơ quan khác nhau hay ở những giai đoạn phát triển. Đây là phƣơng pháp nhanh, nhạy, hiệu quả để xác định sự biểu hiện của các gen trong quá trình phát triển đặc thù của thực vật.
CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU