TRONG VACXIN CÚM A/H5N1
Sau khi tối ưu hố các thơng số của phương pháp ELISA, các mẫu ovalbumin (trong vacxin cúm và ovalbumin thơ sản xuất từ lịng trắng trứng) được sử dụng để thẩm định phương pháp. Mỗi mẫu ovalbumin được đo 3 lần để xác định
độ lập lại (Bảng 3.8).
Bảng 3.8. Kết quả ELISA định lượng các mẫu ovalbumin
Mẫu ovalbumin Nồng độ ovalbumin xác
định bằng ELISA
CV (%)
Dịch niệu nệm trứng gà cĩ phơi khơng nhiễm virus
< 30 ng/ml 7,87
Dịch niệu nệm trứng gà cĩ phơi khơng nhiễm virus lơ 4
< 30 ng/ml 8,12
Dịch virus sau lọc thơ < 30 ng/ml 7,69
Vacxin cúm bán thành phẩm lơ 1 < 30 ng/ml 6,89
Vacxin cúm bán thành phẩm lơ 3 < 30 ng/ml 13,6
Vacxin cúm bán thành phẩm lơ 4 < 30 ng/ml 12,5
Lịng trắng trứng 3 µg/ml 9,83
Theo kết quảở bảng 3.8 cho thấy:
Nồng độ ovalbumin trong lịng trắng trứng là cao nhất (3 µg/ml) do ovalbumin là thành phần chính của lịng trắng trứng. Tuy nhiên, ovalbumin ở dịch niệu nệm (niệu nang) rất ít (<30ng/ml). Điều này cho thấy, kỹ thuật hút dịch niệu
nệm trong quá trình sản xuất là rất quan trọng, tránh hút lịng trắng trứng sẽ làm giảm hàm lượng ovalbumin trong vacxin cúm A/H5N1.
Ở các lơ vacxin cúm bán thành phẩm và dịch virus sau lọc thơ nồng độ
ovalbumin rất thấp (đều nhỏ hơn 30 ng/ml), cho thấy tất cả các mẫu này đều đạt tiêu chuẩn chất lượng về hàm lượng ovalbumin.
Hệ số biến thiên (CV%) trong các mẫu tương đối thấp (CV%< 15%) cho thấy phương pháp cĩ độ lặp lại và độ ổn định cao. Như vậy, phương pháp cĩ độ
chính xác cao.
Cĩ thể nhận thấy rằng, phương pháp ELISA mà chúng tơi xây dựng cĩ độ đặc hiệu cao vì khơng chỉ cĩ khả năng phát hiện các mẫu ovalbumin tinh khiết mà cịn cĩ khả năng định lượng các mẫu ovalbumin thơ với độ lặp lại cao.