lập từ dịch tử cung bò sữa
- Xác định tính mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập được từ dịch tử cung bò sữa với một số thuốc kháng sinh thông dụng;
- Xác định tính mẫn cảm của tập đoàn vi khuẩn có trong dịch viêm tử cung bò với một số thuốc kháng sinh.
3.4.4. Thử nghiệm sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược phòng và trị bệnh viêm tử cung ở bò sữa
- Khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược với vi khuẩn phân lập từ dịch viêm tử cung bò;
- Khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược với tập đoàn vi khuẩn có trong dịch viêm tử cung bò;
- Đánh giá ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến một số chỉ tiêu lâm sàng của bò.
+ Sự biến đổi thân nhiệt; + Sự biến đổi tần số hô hấp; + Sự biến đổi tần số mạch đập; + Sự biến đổi tần số nhu động dạ cỏ;
- Nghiên cứu phòng bệnh viêm tử cung cho bò bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược:
+ Ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến thời gian thải dịch sau khi đẻ;
+ Ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung của bò sau khi đẻ.
- Nghiên cứu sử dụng nguồn gốc thảo dược để điều trị bệnh viêm tử cung cho bò:
+ Đánh giá hiệu quả của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược để điều trị bệnh viêm tử cung sau đẻ của bò;
+ Đánh giá khả năng sinh sản của bò sau khi điều trị khỏi bệnh viêm tử cung bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1. Phương pháp đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
- Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung, tỷ lệ mắc các thể viêm tử cung trên đàn bò sữa tại địa phương nghiên cứu được xác địnhbằng phương pháp điều tra, phỏng vấn trực tiếp người chăn nuôi kết hợp với việc theo dõi trực tiếp và sử dụng phương pháp Whiteside test (Bhat et al., 2014) để kiểm tra mẫu dịch lấy từ bò bị viêm tử cung hay bò không bị viêm tử cung: lấy 1ml dịch tử cung cần kiểm tra vào ống nghiệm sạch, sau đó cho thêm 1ml dung dịch NaOH 5% vào ống nghiệm và đun sôi. Để ống nghiệm trong giá đựng cho tới khi dung dịch nguội và đánh giá kết quả như sau:
+ Nếu dung dịch không có màu thì được cho là dịch tử cung bình thường; + Nếu dung dịch có màu vàng thì dịch được cho là dịch viêm tử cung.
3.5.2. Phương pháp xác định sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt của bò được xác định bằng nhiệt kế đo ở trực tràng bò sữa, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về nhịp tim của bò được xác định bằng cách đếm số lần động mạch đuôi đập trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về hô hấp của bò được xác định bằng cách đếm số lần hít vào, thở ra trong vòng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về phản ứng của cơ thể: đau, co nhỏ của tử cung được xác định bằng cách khám qua trực tràng và phản ứng co, đạp 2 chân sau. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về ăn, uống được xác định theo dõi lượng thức ăn, nước uống của bò ở mỗi lần cho ăn, uống. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Dịch viêm ở cơ quan sinh dục được xác định bằng cách kiểm tra dịch tiết ra từ cơ quan sinh dục. So sánh giữa bò bình thường và bò bị viêm tử cung.
3.5.3. Phương pháp xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung thường gặp trong dịch viêm tử cung
- Xác định tổng số và thành phần vi khuẩn hiếu khí được thực hiện theo tiêu chuẩn phòng thí nghiệm ISO – 17025;
- Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh được đánh giá theo “Các tiêu chuẩn lâm sàng trong phòng thí nghiệm của Hội đồng Quốc gia Mỹ” (The United State National Committee for Clinical Laboratory Standards guidelines - NCCLS).
3.5.4. Đánh giá hiệu quả của việc sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược trong phòng và trị bệnh viêm tử cung bò trong phòng và trị bệnh viêm tử cung bò
- Sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược có thành phần là dịch chiết của 5 loại thảo dược: huyền diệp, bồ công anh, sài đất, tô mộc, đơn đỏ điều trị viêm tử cung ở bò sữa.
- Đánh giá hiệu quả phòng bệnh viêm tử cung sau đẻ của bò bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược bò thông qua các chỉ tiêu thời gian thải dịch sau đẻ, tổng số vi khuẩn hiếu khí và tỷ lệ mắc viêm tử cung ở lô thử nghiệm so với lô đối chứng.
- Đánh giá hiệu quả điều trị bệnh viêm tử cung sau đẻ của bò bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược thông qua việc theo dõi các chỉ tiêu tỷ lệ khỏi bệnh, thời gian điều trị và khả năng sinh sản của bò sữa sau khi được điều trị lành bệnh.
3.5.5. Phương pháp xử lý số liệu
Toàn bộ số liệu thu thập được trong quá trình nghiên cứu được tập hợp và xử lý theo phương pháp thống kê trên phần mềm Microsoft Excel. Các tỉ lệ, số trung bình và độ lệnh chuẩn được tính toán trong phần mềm Excel. Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong các loại dịch tử cung được lấy logarite tự nhiên để đưa số liệu về phân bố chuẩn. Sau đó việc so sánh tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong hai loại dịch đượcthực hiện bằng phép so sánh t-test với mức ý nghĩa α= 0,5. Phương pháp t-test được thực hiện trên phần mềm SPSS 22.
PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ THỰC TRẠNG BỆNH VIÊM TỬ CUNG
4.1.1. Kết quả khảo sát tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên bò sữa ở một số địa phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng
Tiến hành khảo sát tỷ lệ viêm tử cung sau đẻ của đàn bò sữa nuôi tại một số địa phương thuộc huyện Tiên Du, tỉnh Bắc Ninh, huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội và huyện Duy Tiên, tỉnh Hà Nam. Kết quả được trình bày tại bảng 4.1 và thể hiện tại hình 4.1.
Bảng 4.1. Kết quả khảo sát tỷ lệ bò sữa mắc bệnh viêm tử cung ở một số địa phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng
Địa điểm Số lượng bò theo dõi (con)
Số bò bị viêm tử cung Số lượng (con) Tỷ lệ
(%)
Tiên Du, Bắc Ninh Gia Lâm, Hà Nội
226 214 48 62 21,23 28,97
Duy Tiên, Hà Nam 298 55 18,45
Tổng số 738 165 22,35
Hình 4.1. Tỷ lệ bò sữa mắc bệnh viêm tử cung ở một số địa phương thuộc khu vực đồng bằng sông Hồng
Từ kết quả bảng 4.1 và hình 4.1 chúng tôi có nhận xét sau:
21.23 28.97 18.45 0 5 10 15 20 25 30 Tỷ lệ (%)
Tỷ lệ mắc viêm tử cung sau đẻ trên đàn bò nuôi tại 03 huyện thuộc các tỉnh khu vực đồng bằng sông Hồng là khá cao trung bình 22,35% dao động từ 18,45% - 28,97%. Theo chúng tôi đây có lẽ chính là một trong những nguyên nhân chính làm giảm khả năng sinh sản của đàn bò sữa gây thiệt hại rất lớn về kinh tế cho người chăn nuôi và từ những số liêu này cho thấy các nhà chuyên môn cũng như người chăn nuôi bò sữa cần phải tham khảo và nhìn nhận lại kỹ thuật chăm sóc, nuôi dưỡng, phối giống, khám thai cũng như công tác hộ lý sau đẻ cho bò sữa nhằm giảm thiểu tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung sau đẻ của bò. Tác giả Nguyễn Văn Thanh và Lê Trần Tiến (2007) nghiên cứu trên đàn bò sữa nuôi tại Hà Nội và Bắc Ninh thông báo tỷ lệ mắc viêm tử cung trên đàn bò đã công bố là 21,32%. Cao Viết Dương (2011) thông báo tỷ lệ mắc viêm tử cung nuôi tại Nghệ An là 13,91% Phạm Trung Kiên (2012) cho biết tỷ lệ mắc viêm tử cung ở đàn bò tại tại khu vực đồng bằng sông Hồng là 22,88% tương đương với kết quả nghiên cứu của chúng tôi trong nghiên cứu này.
Dubuc et al. (2010) nghiên cứu trên 1295 bò sữa Holstein Friesian tại Canada, cho biết tỉ lệ mắc bệnh viêm tử cung là 17,6% tương đồng với kết quả nghiên cứu của chúng tôi. Tác giả Sheldon and Dobson (2004) công bố rằng tỷ lệ viêm tử cung ở bò sữa chiếm đến 40%, Balasundaram et al. (2011) cho biết tỉ lệ viêm tử cung sau đẻ ở bò sữa giống Karan Fries là 38,93% cao hơn kết quả nghiên cứu của chúng tôi trong nghiên cứu này. Ngược lại, tác giả Ribeiro et al. (2013) khi nghiên cứu trên 957 bò sữa ở Florida, Mỹ, cho biết tỉ lệ mắc bệnh viêm tử cung ở bò Holstein Friesian, Jersey và bò lai là tương chỉ chiếm ở mức 5,3% thấp hơn so với kết quả nghiên cứu của chúng tôi.
Kết quả trình bày tại bảng 4.1 cũng cho thấy tỷ lệ mắc viêm tử cung ở đàn sữa nuôi ở các địa phương khác nhau là khác nhau. Trong đó tỷ lệ mắc viêm tử cung sau đẻ cao nhất ở đàn bò sữa nuôi tại huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội (28,97%), tiếp tới là huyện Tiên Du tỉnh Bắc Ninh (21,23%) và thấp nhất là đàn bò sữa nuôi tại huyện Duy Tiên – Hà Nam (18,45%).
4.1.2. Kết quả phân loại tỷ lệ mắc các thể bệnh viêm tử cung bò sữa
Dựa vào những biểu hiện triệu chứng lâm sàng điển hình của những con bò sữa mắc bệnh viêm tử cung kết hợp với việc khám tử cung bằng phương pháp khám trực tiếp thông qua trực tràng và sử dụng phản ứng Whiteside test (Bhat et al., 2014). Chúng tôi đã tiến hành phân loại tỷ lệ mắc các thể viêm tử cung trong tổng số bò sữa mắc viêm tử cung. Kết quả được trình bày tại bảng 4.2 và biểu
diễn trên hình 4.2.
Bảng 4.2. Tỷ lệ mắc các thể viêm tử cung ở bò sữa (n=165)
Thể viêm Số mắc (con) Tỷ lệ (%)
Viêm nội mạc tử cung 141 80,45
Viêm cơ tử cung 19 11,52
Viêm tương mạc tử cung 05 3,03
Tổng 165 100,00
Hình 4.2. Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung ở bò sữa
Từ kết quả trình bày tại bảng 4.2 và hình 4.2 cho thấy:
Trong số 165 bò mắc viêm tử cung, chủ yếu là bò mắc viêm nội mạc tử cung chiếm tỷ lệ cao 80,45%, tiếp đến là thể viêm cơ tử cung 11,52% và thấp nhất là viêm tương mạc tử cung 3,03%. Kết quả nghiên cứu của chúng tôi tương đồng với kế quả nghiên cứu của tác giả Nguyễn Văn Thanh (2007); Lê Trần Tiến (2007); Phạm Trung Kiên (2012).
4.1.3. Sự biển đổi một số chỉ tiêu lâm sàng, vi khuẩn học trong bệnh viêm tử cung ở bò sữa cung ở bò sữa
4.1.3.1. Kết quả xác định sự thay đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò sữa bị viêm tử cung
Tiến hành theo dõi sự khác nhau về một số chỉ tiêu lâm sàng của bò khoẻ mạnh bình thường và bò bị viêm tử cung chúng tôi thu được kết quả trình bày tại bảng 4.3.
80,45%
11,52% 3,03%
Viêm nội mạc tử cung Viêm cơ tử cung
Bảng 4.3. Kết quả theo dõi sự thay đổi một số chỉ tiêu lâm sàng của bò mắc bệnh viêm tử cung
Chỉ tiêu theo dõi
Bò khoẻ (n = 22) Bò bị viêm tử cung (n = 22) Chênh lệch giữa bò khỏe và bò bệnh Thân nhiệt (0C) 38,34 ± 0,38 40,02± 0,48 1,68 Tần số mạch (lần/phút) 72,66± 3,42 98,57± 3,82 25,91 Tần số hô hấp (lần/phút) 33,39± 4,12 46,64± 3,62 13,25
Phản ứng co cơ của tử cung Rõ Giảm hẳn -
Phản ứng đau Không đau Đau rõ -
Dịch viêm Không có Có dịch chảy ra từ
cơ quan sinh dục -
Thu nhận thức ăn Bình thường Giảm hoặc bỏ ăn
Thu nhận nước uống Bình thường Tăng lên
Khi bò bị viêm tử cung, các chỉ tiêu sinh lý lâm sàng có sự thay đổi rõ rệt. Thân nhiệt, tần số mạch đập và tần số hô hấp của bò viêm tử cung đều tăng lên so với bò bình thường. Cụ thể thân nhiệt tăng 1,680C, tần số mạch đập tăng 25,91lần/phút và tần số hô hấp tăng 13,25 lần/phút. Sự khác nhau giữa bò bị viêm tử cung và bò khỏe mạnh về các chỉ tiêu thân nhiệt, tần số mạch đập và tần số hô hấp là có ý nghĩa thống kê (P<0,05). Theo tác giả Hồ Văn Nam và cs. (1997), tần số mạch đập, tần số hô hấp và thân nhiệt của bò khỏe lần lượt là 30-70 lần/phút, 10–30 lần/phút và 37,50C - 39,50C tương đồng với kết quả nghiên cứu của chúng tôi cũng theo tác giả Hồ Văn Nam và cs. (1997), khi sốt nhiệt độ cao ảnh hưởng đến nốt Keith - Flack trên tim hoặc do các loại độc tố tác dụng lên cơ quan thụ cảm trong tim, làm tim đập nhanh kéo theo tần số mạch cũng tăng nhanh, khi kiểm tra qua trực tràng cho thấy các phản xạ co cơ tử cung của bò bệnh giảm hẳn so với bò bình thường, bò bị viêm tử cung luôn có phản ứng đau đớn và có dịch viêm chảy khi tác động vào tử cung. Huzzey et al. (2007); Sheldon et al. (2006 ) cho biết những bò sữa bị viêm tử cung thường thu nhận thức ăn kém hơn và tăng lượng nước uống so với những bò không bị viêm tử cung tương đồng với nhận xét của chúng tôi trong nghiên cứu này. Trên thực tế cho thấy: bò bị viêm tử cung thường đi lại uể oải, ăn uống rất kém, dịch viêm chảy ra có màu trắng hoặc màu trắng
x m
màu hồng hoặc nâu đỏ lẫn nhiều mảnh tổ chức hoại tử, bốc mùi tanh, thối khó chịu, dịch viêm chảy ra nhiều hơn khi con vật nằm xuống hoặc khi vận động.
4.1.3.2. Kết quả xác định sự biến đổi về tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò sữa
Tiến hành xét nghiệm 15 mẫu dịch tử cung ở bò sữa bình thường và 15 mẫu dịch tử cung bị viêm chúng tôi thu được kết quả về sự biến đổi tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò sữa được thể hiện thông qua bảng 4.4.
Bảng 4.4. Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung bò bỉnh thường và bò bị viêm tử cung
Loại mẫu Số lượng
mẫu
Tổng số (CFU/ml)
(X ± SD) Dịch tử cung của bò không bị viêm 12 (6,54 ± 3,14) x 106
Dịch tử cung của bò bị viêm 12 (7,82 ± 2,52) x 108
Kết quả bảng 4.4 cho thấy: tổng số vi khuẩn hiếu khí trong dịch tử cung của bò bị viêm tử cung và không bị viêm tử cung khác nhau rõ rệt (P < 0,01). Tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch viêm tử cung tăng lên gấp 128 lần so với trong dịch tử cung của bò sữa không bị viêm [(7,82 ± 2,52) x 108 so ((6,54 ± 3,14) x 106CFU/ml]. Các nghiên cứu trước đây cũng cho thấy khi âm đạo và tử cung bị viêm thì số lượng vi khuẩn trong dịch viêm tăng lên gấp nhiều lần, thể hiện quá trình nhiễm trùng bội nhiễm (Nguyễn Văn Thanh, 2007). Theo Pulfer and Riese (1991), việc các vi khuẩn xuất hiện trong tử cung của bò sau khi đẻ không nhất thiết phải được coi là bất bình thường. Vi khuẩn có thể có mặt trong môi trường tử cung của bò sau khi đẻ ở trên 95% trường hợp (Sheldon and Dobson, 2004), nhưng điều đó không đồng nghĩa với việc tử cung bị viêm vì thực tế tỉ lệ bò bị viêm tử cung sau đẻ được công bố là thấp hơn rất nhiều so với tỉ lệ bò có chứa vi khuẩn trong tử cung sau khi đẻ (Overton and Fetrow (2008);