3.1. ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
- Học Viện Nông nghiệp Việt Nam:
+ Phịng thí nghiệm trọng điểm CNSH Thú y, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam;
+ Phịng thí nghiệm bộ mơn Ngoại Sản;
+ Phịng thí nghiệm Cơng nghệ Sinh học Thực vật Khoa CNSH. - Các nơng hộ chăn ni bị sữa:
+ Huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội; + Huyện Duy Tiên, tỉnh Hà Nam; + Huyện Tiên Du, tỉnh Bắc Ninh.
3.2. THỜI GIAN NGHIÊN CỨU
Từ tháng 5/2017 đến tháng 8/2018.
3.3. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU
Đối tượng nghiên cứu của đề tài là đàn bò cái lai hướng sữa Holstein Friesian nuôi tại một số địa phương khu vực đồng bằng sông Hồng.
3.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
3.4.1. Thực trạng bệnh viêm tử cung ở bò sữa tại một số địa phương thuộc khu vực huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội, huyện Duy Tiên, tỉnh Hà Nam khu vực huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội, huyện Duy Tiên, tỉnh Hà Nam và huyện Tiên Du, tỉnh Bắc Ninh
- Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung trên đàn bò sữa tại khu vực huyện Gia Lâm, thành phố Hà Nội, huyện Duy Tiên, tỉnh Hà Nam và huyện Tiên Du, tỉnh Bắc Ninh;
- Khảo sát tỷ lệ mắc các thể viêm tử cung ở bò sữa.
3.4.2. Sự biển đổi một số chỉ tiêu lâm sàng, vi khuẩn học trong bệnh viêm tử cung ở bò sữa cung ở bò sữa
- Xác định sự thay đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò sữa bị viêm tử cung;
- Xác định sự biến đổi về tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong dịch tử cung của bò sữa;
tử cung của bò sữa.
3.4.3. Tính mẫn cảm với kháng sinh của một số vi khuẩn hiếu khí được phân lập từ dịch tử cung bò sữa lập từ dịch tử cung bò sữa
- Xác định tính mẫn cảm của các vi khuẩn phân lập được từ dịch tử cung bò sữa với một số thuốc kháng sinh thông dụng;
- Xác định tính mẫn cảm của tập đoàn vi khuẩn có trong dịch viêm tử cung bò với một số thuốc kháng sinh.
3.4.4. Thử nghiệm sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược phịng và trị bệnh viêm tử cung ở bò sữa
- Khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược với vi khuẩn phân lập từ dịch viêm tử cung bò;
- Khả năng ức chế vi khuẩn in vitro của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược với tập đồn vi khuẩn có trong dịch viêm tử cung bò;
- Đánh giá ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến một số chỉ tiêu lâm sàng của bò.
+ Sự biến đổi thân nhiệt; + Sự biến đổi tần số hô hấp; + Sự biến đổi tần số mạch đập; + Sự biến đổi tần số nhu động dạ cỏ;
- Nghiên cứu phòng bệnh viêm tử cung cho bị bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược:
+ Ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến thời gian thải dịch sau khi đẻ;
+ Ảnh hưởng của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược đến tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung của bò sau khi đẻ.
- Nghiên cứu sử dụng nguồn gốc thảo dược để điều trị bệnh viêm tử cung cho bò:
+ Đánh giá hiệu quả của chế phẩm có nguồn gốc thảo dược để điều trị bệnh viêm tử cung sau đẻ của bò;
+ Đánh giá khả năng sinh sản của bò sau khi điều trị khỏi bệnh viêm tử cung bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược.
3.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.1. Phương pháp đánh giá thực trạng bệnh viêm tử cung
- Tỷ lệ mắc bệnh viêm tử cung, tỷ lệ mắc các thể viêm tử cung trên đàn bò sữa tại địa phương nghiên cứu được xác định bằng phương pháp điều tra, phỏng vấn trực tiếp người chăn nuôi kết hợp với việc theo dõi trực tiếp và sử dụng phương pháp Whiteside test (Bhat et al., 2014) để kiểm tra mẫu dịch lấy từ bò bị viêm tử cung hay bị khơng bị viêm tử cung: lấy 1ml dịch tử cung cần kiểm tra vào ống nghiệm sạch, sau đó cho thêm 1ml dung dịch NaOH 5% vào ống nghiệm và đun sôi. Để ống nghiệm trong giá đựng cho tới khi dung dịch nguội và đánh giá kết quả như sau:
+ Nếu dung dịch khơng có màu thì được cho là dịch tử cung bình thường; + Nếu dung dịch có màu vàng thì dịch được cho là dịch viêm tử cung.
3.5.2. Phương pháp xác định sự biến đổi một số chỉ tiêu lâm sàng khi bò bị viêm tử cung viêm tử cung
- Sự biến đổi về thân nhiệt của bò được xác định bằng nhiệt kế đo ở trực tràng bò sữa, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bị bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về nhịp tim của bò được xác định bằng cách đếm số lần động mạch đi đập trong vịng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bị bình thường và bò bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về hơ hấp của bị được xác định bằng cách đếm số lần hít vào, thở ra trong vịng 1 phút, mỗi con 3 lần. So sánh giữa bị bình thường và bị bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về phản ứng của cơ thể: đau, co nhỏ của tử cung được xác định bằng cách khám qua trực tràng và phản ứng co, đạp 2 chân sau. So sánh giữa bị bình thường và bị bị viêm tử cung;
- Sự biến đổi về ăn, uống được xác định theo dõi lượng thức ăn, nước uống của bò ở mỗi lần cho ăn, uống. So sánh giữa bị bình thường và bị bị viêm tử cung;
- Dịch viêm ở cơ quan sinh dục được xác định bằng cách kiểm tra dịch tiết ra từ cơ quan sinh dục. So sánh giữa bị bình thường và bò bị viêm tử cung.
3.5.3. Phương pháp xác định sự biến đổi của một số vi khuẩn hiếu khí thường gặp trong dịch viêm tử cung thường gặp trong dịch viêm tử cung
- Xác định tổng số và thành phần vi khuẩn hiếu khí được thực hiện theo tiêu chuẩn phịng thí nghiệm ISO – 17025;
- Xác định tính mẫn cảm của vi khuẩn với một số loại kháng sinh được đánh giá theo “Các tiêu chuẩn lâm sàng trong phịng thí nghiệm của Hội đồng Quốc gia Mỹ” (The United State National Committee for Clinical Laboratory Standards guidelines - NCCLS).
3.5.4. Đánh giá hiệu quả của việc sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược trong phịng và trị bệnh viêm tử cung bò trong phòng và trị bệnh viêm tử cung bò
- Sử dụng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược có thành phần là dịch chiết của 5 loại thảo dược: huyền diệp, bồ công anh, sài đất, tô mộc, đơn đỏ điều trị viêm tử cung ở bò sữa.
- Đánh giá hiệu quả phòng bệnh viêm tử cung sau đẻ của bị bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược bị thơng qua các chỉ tiêu thời gian thải dịch sau đẻ, tổng số vi khuẩn hiếu khí và tỷ lệ mắc viêm tử cung ở lơ thử nghiệm so với lô đối chứng.
- Đánh giá hiệu quả điều trị bệnh viêm tử cung sau đẻ của bị bằng chế phẩm có nguồn gốc thảo dược thông qua việc theo dõi các chỉ tiêu tỷ lệ khỏi bệnh, thời gian điều trị và khả năng sinh sản của bò sữa sau khi được điều trị lành bệnh.
3.5.5. Phương pháp xử lý số liệu
Toàn bộ số liệu thu thập được trong quá trình nghiên cứu được tập hợp và xử lý theo phương pháp thống kê trên phần mềm Microsoft Excel. Các tỉ lệ, số trung bình và độ lệnh chuẩn được tính tốn trong phần mềm Excel. Tổng số vi khuẩn hiếu khí trong các loại dịch tử cung được lấy logarite tự nhiên để đưa số liệu về phân bố chuẩn. Sau đó việc so sánh tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong hai loại dịch đượcthực hiện bằng phép so sánh t-test với mức ý nghĩa α= 0,5. Phương pháp t-test được thực hiện trên phần mềm SPSS 22.