4. Cấu trúc của luận văn
2.4.3. Các kỹ thuật sử dụng trong nghiên cứu tại thực địa
Phƣơng pháp điều tra muỗi
* Thu thập muỗi bằng bẫy màn mồi gia súc
- Thời gian: 18 giờ đến 6 giờ sáng hôm sau.
- Vị trí đặt bẫy màn: Bẫy màn dùng gia súc làm mồi đƣợc đặt ngoài gần nhà, gần sát với vị trí mà gia súc thƣờng đƣợc giữ ở đó qua đêm.
- Chọn 1 con bò hiền lành dùng làm mồi, trƣớc khi mặt trời lặn, dùng dây thừng cột con bò đã chọn vào chiếc cọc đã đóng cố định xuống đất ở vị trí đặt bẫy.
- Treo bẫy màn trùm lên con bò làm mồi, khi treo màn lớn phải để mép dƣới cách mặt đất khoảng 15 - 20 cm để muỗi có thể bay vào trong màn lớn qua khoảng hở này. Để màn không bị gió thổi, phải cố định chân màn vào những chiếc cọc đã đóng chặt vào mặt đất.
- Tiến hành thu thập muỗi đậu trên màn mỗi giờ một lần. Sử dụng đèn pin soi tìm muỗi và dùng ống tuýp để bắt muỗi.
* Thu thập muỗi bằng mồi ngƣời màn kép
- Thời gian thu thập: 18 giờ tối đến 6 giờ sáng hôm sau.
- Thu thập muỗi trong nhà, dùng màn lớn phủ toàn bộ chiếc giƣờng, trên giƣờng có một ngƣời nằm làm mồi trong một chiếc màn cá nhân.
- Thu thập muỗi ngoài nhà, vị trí đặt bẫy màn cách nhà gần nhất khoảng 1 - 5 m, cách xa chuồng bò 30 m trở lên.
- Màn lớn đƣợc treo trên những chiếc cọc gỗ, bên trong màn lớn là một chiếc màn cá nhân và ngƣời làm mồi nằm trong chiếc màn cá nhân. Màn lớn khi treo cách mặt đất khoảng 15 - 20 cm để muỗi có thể bay vào màn lớn qua
36
khoảng hở này, để màn không bị gió thổi cần cố định chân màn vào những chiếc cọc đƣợc đóng chặt vào mặt đất.
- Tiến hành thu thập muỗi đậu trên màn, mỗi giờ bắt một lần, sử dụng đèn pin soi tìm muỗi và dùng ống tuýp để bắt muỗi.
* Thu thập muỗi bằng mồi ngƣời ngoài nhà ban đêm
- Thời gian thu thập: 18 giờ tối đến 6 giờ sáng hôm sau.
- Điểm mồi ngƣời nằm cách nhà khoảng 1 - 5 m tùy địa thế xung quanh nhà, cách xa chuồng bò 30 m trở lên, chọn nơi yên tĩnh, kín gió, thiếu ánh sáng.
- Bố trí 2 ngƣời cùng mồi muỗi, chia làm 2 ca, ca đầu từ 6 giờ tối đến 12 giờ đêm, ca hai từ 12 giờ đêm đến 6 giờ sáng. Ngƣời làm mồi bắt muỗi ở tƣ thế ngồi, quần đƣợc xắn lên qua gối để 2 chân lộ ra, ngồi yên chờ muỗi đến đậu lên chân thì bắt. Khi có cảm giác muỗi đậu lên chân, hoặc có cảm giác đang bị muỗi đốt, hoặc cứ sau một vài phút bật đèn pin lên xem có muỗi đậu hay không, khi soi tránh soi đèn trực tiếp và đột ngột vào muỗi để tránh gây kích thích làm muỗi bay đi, nên hƣớng đèn ra xa rồi mới bật đèn sáng, sau đó từ từ hƣớng ánh sáng vào vị trí muỗi đậu trên chân cho đến khi nhìn rõ con mồi thì dừng lại.
- Khi phát hiện muỗi đậu trên chân, một tay cầm đèn pin soi, tay kia cầm ống tuýp chụp lên con muỗi, sau đó di chuyển nhẹ ống tuýp để muỗi bay vào trong tuýp, nhanh chóng nhấc miệng tuýp lên và dùng ngón trỏ bịt miệng tuýp. Kẹp đèn pin vào nách, lấy miếng bông bịt miệng tuýp. Mỗi tuýp nhốt tối đa 4 con muỗi. Muỗi bắt đƣợc để riêng theo từng giờ, dùng dây cao su buộc các ống tuýp đựng muỗi bắt đƣợc trong cùng một giờ với nhau.
* Thu thập muỗi bằng bẫy đèn ngoài nhà ban đêm
- Treo bẫy đèn gần ổ bọ gậy hoặc nơi muỗi thƣờng bay qua trên đƣờng
đi tìm mồi hút máu. Vị trí bẫy đèn cần thông thoáng để ánh sáng từ bẫy đèn không bị che khuất. Bẫy treo cách mặt đất khoảng 1,5 m.
37
Ghi lại đầy đủ thông tin khi đi thu muỗi.
Phƣơng pháp định loại muỗi Anopheles
Sử dụng bảng định loại của Viện Sốt rét-KST-CT Trung ƣơng 2008.
Nguyên tắc chung đƣợc sử dụng để thiết lập khoá định loại:
Khoá định loại đƣợc thiết lập theo nguyên tắc phân nhánh lƣỡng phân, sử dụng các đặc điểm đối lập nhau để loại trừ, một loài khi có một đặc điểm này thì không có đặc điểm tƣơng ứng khác.
Các bƣớc định loại muỗi Anopheles
- Gây mê muỗi bằng ether hay chloroform.
- Cho muỗi ra đĩa petri, dùng kim mổ cắm vào ngực muỗi, giữa đôi chân thứ hai, chếch về phía sau cho 2 cánh muỗi xoè ra.
- Quan sát muỗi bằng kính lúp tay có độ phóng đại 10x, 20x, hoặc lúp hai mắt có độ phóng đại 10x, 20x, 40x sơ bộ nhận xét các đặc điểm sau: muỗi
đực hay muỗi cái, Anophelinae hay Culicinae, cánh có điểm trắng đen hay
đồng màu, chân có hoa hay đen tuyền, các đốt bàn chân có băng trắng hay không có băng trắng. Sau khi có khái niệm chung, dùng lúp tay quan sát chi tiết, so sánh các đặc điểm đó với bảng định loại và xác định loài.
Phƣơng pháp xác định khối lƣợng bò
Khối lƣợng (kg) = 88,8 x VN2 x DTC.
Trong đó:
- VN: là vòng ngực của bò, là chu vi mặt cắt đằng sau xƣơng bả vai (tính bằng mét). - DTC: độ dài thân chéo, là chiều dài đƣợc đo bằng mỏm xƣơng bả vai đến điểm tận cùng của xƣơng ngồi (tính bằng mét).