3.2.2.1.Xác định công thức hệ OTC chứa 9% natri diclofenac có khả năng nhũ hóa tốt nhất
Pha chế hỗn hợp 9%NaD trong 12 hệ OTCđã được chọn lựa từ nghiên cứu 3.2.1. Các bước tiến hànhvà đánh giá được trình bày trong mục 2.3.1.2b.
Kết quả thể hiện trên hình 3.2.
Hình 3.2: Giản đồ pha hệ 3 thành phần DĐN/Transcutol/Cremophor RH 40chứa 9% NaD
Kết quảtrong hình 3.2 cho thấy:
- Khả năng tự nhũ hóa tạo vi nhũ tương đã thay đổi khi kết hợp dược chất trong hỗn hợp OTC.
- Trong 12 hệ OTC tạo được vi nhũ tương khi chưa có 9% NaD. Duy nhất hệNaD/OTC tỷ lệ 1:1:8 (OTC 118)có khả năng tự nhũ hóa hình thành vi nhũ tương.
Do đó, chúng tôi lựa chọn hệ OTC 118 để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo. 3.2.2.2. Xác định nồng độ NaD trong hệ OTC 118
Pha chế các hệ NaD/OTC 118 với nồng độ khác nhau(9%; 10%; 12,5%; 15%;
17,5% (kl/kl)), tiến hành đánh giá khả năng nhũ hóa của các hệ theo mục 2.3.1.2b. Kết quảthu được như sau:
+ Mẫu 9%: trong suốt (hệ A). + Mẫu 10%: trong suốt (hệ A). + Mẫu 12,5%: trong mờ (hệ B).
+ Mẫu 15%: màu trắng hơi xanh (hệ C). + Mẫu 17,5%: đục, có tủa.
Nhận xét:
- Như vậy, việc kết hợp nồng độ dược chất khác nhau trong hệ OTC 118đã làm thay đổi khả năng nhũ hóa của hệ . Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của một số tác giả khi đánh giá khả năng nhũ hóa của hệ tự nhũ hóa chứa ibuprofen và hệ tự nhũ hóa chứa carvedilol[5], [14].
- Mẫu 9% và 10% NaD/OTC 118 tạo vi nhũ tương (hệ A).
- Mẫu 10% được lựa chọn trong nghiên cứu tiếp theo do nồng độ dược chất
trong chất lỏng cao hơn,lượng chất lỏng đưa vào viên sẽ ít hơn, tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình tạo viên.
3.2.3. Đánh giá sơ bộ một số đặc tính hệ tự nhũ hóachưa có NaD và hệ tự nhũ
hóa chứa 10% NaD
3.2.3.1. Kích thước giọt nhũ tương tạo thành bởi hệ tự nhũ hóa
Để khẳng định kích thước giọt dầu tạo thành , tiến hành đ ánh giá kích thước giọt của hệ OTC 118(500 mg/100ml HCl 0,1 N/2 giờ) và hệ tự nhũ hóa chứa 10%
NaD/OTC 118(125 mg/500mlHCl 0,1 N/2 giờ) bằng thiết bị Zetasizer Nano ZS90- Malvern.
Hình 3.3. Đồ thị phân bố kích thước giọt của hệ OTC 118 trong HCl 0,1 N
Hình 3.4: Đồ thị phân bố kích thước giọt của hệ NaD/OTC 118 trong HCl 0,1 N
Kết quả được trình bày trong hình 3.3 và 3.4 cho thấy hệ tự nhũ hóa OTC 118 và hệ tự nhũ hóa 10% NaD/OTC 118 có khả năng tạo nhũ tương trong suốt với kích thước trung bình rất nhỏ(20,14nm và 20,82nm). Như vậy, theo phân loại hệ tự nhũ hóa trình bày trong mục 1.2, hệ TNH chúng tôi bào chế được thuộc nhóm hệ tự nhũ hóa tạo vi nhũ tương (SMEDDS).
3.2.3.2.Xác định thời gian nhũ hóa của hệ NaD/OTC 118 trong HCl 0,1 N
Đánh giá khả năng giải phóng dược chất của hệ 10% NaD/OTC 118 trong
500ml môi trường HCl 0,1 N theo điều kiện thử hòa tan trình bày trong mục 2.3.4.2.
Bảng 3.2: % GPDC của hệ NaD/OTC tại các thời điểm khác nhau
Thời gian (phút) 1 2 3 4 5
% GPDC 89,14 98,73 98,95 99,18 99,37 Kết quả trình bày trong bảng 3.2cho thấy thời gian nhũ hóa của hệ NaD/OTClà 2 phút.
Hệ tự nhũ hóa chứa 10% NaD/OTC 118 tạo vi nhũ tương có kích thước giọt nhỏ (20,82 nm) với thời gian nhũ hóa ngắn (2 phút) được lựa chọn để bào chế viên nén NaD giải phóng nhanh trong các nghiên cứu tiếp theo.
3.3. Khảo sát điều kiện định lượng NaD
3.3.1. Khảo sát điều kiện định lượng NaD trong bột dập viên và viên NaD giải phóng nhanh phóng nhanh
Tiến hành quét phổ UV của dung dịch NaD nồng độ 10 µg/ml trong ethanol 96%, dải sóng 200-300 nm bằng máy đo quang phổ UV-VIS.
Kết quả cho thấy NaD có đỉnh hấp thụ cực đại ở bước sóng 283 nm. Do đó
chúng tôi chọn bước sóng 283 nm để khảo sát tương quan giữa nồng độ dung dịch NaD và độ hấp thụ.
Pha các dung dịch chuẩn NaD có nồng độ lần lượt là 5, 8, 11, 14, 17 µg/ml. Đo độ hấp thụ của dung dịch tại bước sóng 283 nm. Kết quả khảo sát được thể hiện ở bảng 3.3 và hình 3.5.
Bảng 3.3: Độ hấp thụ quang của NaD trong dung môi ethanol 96%
Nồng độ (µg/ml) 5 8 11 14 17
Hình 3.5: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ NaD trong dung môi ethanol 96%
Kết quả cho thấy,có sự phụ thuộc tuyến tính giữa độ hấp thụ và nồng độ NaD trong dung môi ethanol với hệ số tương quan R2
= 0,9997. Do vậy đảm bảo được tính chính xác trong phương pháp định lượng NaD ở nồng độ khảo sát.
3.3.2. Khảo sát điều kiện định lượng NaD trong thử nghiệm hòa tan
Tiến hành tương tự như mục 3.3.1 với 3 môi trường thử hòa tan.
Kết quả quét phổ thu được bước sóng hấp thụ cực đại trong môi trường HCl 0,1N;đệm pH 4,5 và đệm pH 6,8 là 275nm.
Mối tương quan giữa độ hấp thụ và nồng độ NaD trong 3 môi trường lần lượt thể hiện ở bảng 3.4 và hình 3.6; bảng 3.5 và hình 3.7; bảng 3.6 và hình 3.8.
Bảng 3.4: Độ hấp thụ quang của NaD trong môi trường HCl 0,1N
Nồng độ (µg/ml) 5 8 11 14 17
Hình 3.6: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ NaD trong HCl 0,1N
Bảng 3.5:Độ hấp thụ quang của NaD trong đệm acetat pH 4,5
Nồng độ( µg/ml ) 5 8 11 14 17
Độ hấp thụ 0,188 0,314 0,427 0,543 0,667
Hình 3.7: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ NaD trong đệm acetat pH 4,5
Bảng 3.6: Độ hấp thụ quang củaNaD trong đệm phosphat pH 6,8
Nồng độ( µg/ml ) 5 8 11 14 17
Hình 3.8: Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc độ hấp thụ quang vào nồng độ NaD trong đệm phosphat pH 6,8
Kết quả trên đây cho thấy có sự phụ thuộc tuyến tính giữa độ hấp thụ vào nồng độ NaD với hệ số tương quan lớn (R2
>0,99) trong cả 3 môi trường thử hòa tan và trong khoảng nồng độ khảo sát.
Do vậy, tính chính xác trong phương pháp thử hòa tan viên nén NaD được đảm bảo trong 3 môi trường HCl 0,1N, đệm acetat pH 4,5 và đệm phosphat pH 6,8.
3.4. Bào chế viên nén NaD giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa
Các tá dược sử dụng trong viên nén NaD giải phóng nhanh gồm:
- Cellulose vi tinh thể: tá dược hấp phụ chất lỏng NaD/OTC, tá dược độn và dính [7].
- Aerosil: tá dược điều hòa độ trơn chảy và là tá dược hấp phụ chất lỏng NaD/OTC. Aerosil có kích thước tiểu phân rất nhỏ với diện tích bề mặt lớn, do đó có khả năng hấp phụ chất lỏng tốt [6],[27].
- CrosCMC: tá dược siêu rã, giúp viên rã nhanh, tạo điểu kiện thuận lợi cho quá trình hòa tan của viên nén NaD giải phóng nhanh[14], [6].
3.4.1. Lựa chọn tỷ lệtá dược Aerosil
Viên nén chứa hệ tự nhũ hóa cần 1 lượng khá lớn chất hấp phụ và tá dược trơn phù hợp để đảm bảo độ trơn chảy của bột dập viên, do đó, đảm bảo độ đồng đều phân liều trong quá trình dập viên.
Pha chế bột dập viên sử dụng Aerosil với các tỷ lệ khác nhau (2,0%; 2,5%; 3,0% và 3,5%) theo phương pháp trình bày trong mục 2.3.2. Bột dập viên được đánh giá đặc tính trơn chảy theo mục2.3.3.2.
Thành phần của các mẫu bột và kết quả đánh giá khả năng trơn chảy được thể hiện ở bảng 3.7.
Bảng 3.7: Khả năng trơn chảy của các mẫu bột dập viên khác nhau
Thành phần Khối lượng (mg) M1 M2 M3 M4 NaD/OTC 125 125 125 125 Avicel PH 102 1032 1025,5 1018 1010,5 CrosCMC 104 104 104 104 Aerosil 26 (2%) 32,5 (2,5%) 39 (3%) 45,5 (3,5%) Mg stearat 13 13 13 13 Chỉ số Carr (%) 17,02 15,78 14,11 12,79
Tốc độ chảy (g/s) Không chảy Không chảy Không chảy 28,6
Kết quả trong bảng 3.7 cho thấy:
- Lượng Aerosil tăng (từ 2,0% đến 3,5%),
chỉ số Carr giảm. Theo tiêu chuẩn dược điển Mỹ 32, độ trơn chảy của mẫu M1 và M3 đạt mức độ khá, trong khi đó, mẫu M3 và M4 có độ trơn chảy tốt.
- Trong số các mẫu nghiên cứu, duy nhất
mẫu M4 (chứa 3,5% Aerosil) chảy qua phễu đường kính 25mm với tốc độ chảy
- Khi tăng lượng Aerosil đồng nghĩa với việc giảm lượng Avicel PH 102 trong công thức, khả năng trơn chảy của khối bột dập viên tăng.Đó là do, Aerosil trong công thức viên nén sử dụng hệ tự nhũ hóa NaD/OTC 118 vừa có tác dụng điều hòa độ trơn chảy, vừa có khả năng hút chất lỏng cao hơn nhiều so với Avicel PH 102 (do kích thước tiểu phân nhỏ và diện tích bề mặt lớn).
Do đó, công thức viên nén NaD giải phóng nhanh sử dụng 3,5% Aerosil được lựa chọntrong nghiên cứu tiếp theo.
3.4.2. Bào chế viên nén NaD 12,5 mg giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa
Tiến hành bào chế 100 viên nén NaD 12,5 mg giải phóng nhanh theo công thức M4 trên đây với các thành phần và khối lượng được thể hiện trong bảng 3.8.
Bảng 3.8. Công thức viên NaD 12,5 mg giải phóng nhanh
Thành phần Khối lượng/viên (mg) Khối lượng/100 viên (g)
Natri diclofenac 12,5 1,250 Dầu đậu nành 11,25 1,125 Cremophor 65,5 6,550 Transcutol 11,25 1,125 Avicel PH 102 1012,5 101,250 Aerosil 45,5 4,550 Croscarmellose 104 10,4 Magnesi stearat 13,5 1,350
Bột dập viên được đánh giá độ trơn chảy và mức độ phân tán hàm lượng dược chất theo mục 2.3.3.2.Kết quả cho thấy bột trơn chảy tốt (chỉ số Carr:12,45; tốc độ chảy: 28,5 g/s) và dược chất được phân bố đồng đều trong khối bột (RSD = 2,04%, HLDC/vị trí: trong khoảng 98,91% đến 104,63%).
Tiến hành d ập viên nén dài có khối lượng 1300 mg bằng phương pháp dập thẳngtheo phương pháp trong mục 2.3.2.
3.4.3.Đánh giá một số đặc tính của viên nén NaD 12,5 mg giải phóng nhanh
Khảo sát một số đặc tính của viên NaD 12,5 mg giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóatheo phương pháp trình bày trong mục 2.3.4 thu được kết quả như sau:
*Hình thức: Viên nén dài, màu trắng, chiều dài 23 mm, chiều ngang 10,27 mm, bề dày 6,45 mm.
* Độ rã:3 phút 51 giây.
* Độ đồng đều hàm lượng:Đạt (HLDC/viên:từ 95,54% đến 102,73%). * Lực bẻ vỡ viên:Đạt (110 N – 120 N).
* Độ mài mòn:Đạt (0,7%). * Định lương:Đạt (12,58 mg).
* Thời gian nhũ hóa
Thời gian nhũ hóa của hệ NaD/OTC 118 và viên nén NaD giải phóng nhanh
(thời gian dược chất giải phóng > 90%) lần lượt là: 2 phút và 5 phút.
* Đánh giá kích thước giọt dầu của vi nhũ tương tạo thành từ viên nén NaD giải phóng nhanh
Kích thước giọt dầu của nhũ tương tạo thành là đặc tính quan trọng nhất của hệ tự nhũ hóa. Kích thước giọt quyết định mức độ giải phóng dược chất, cũng như độ ổn định của nhũ tương.
Đánh giá kích thước giọt của viên nén NaD sau khi nhũ hóa trong thể tích 500ml ba loại môi trường khác nhau (HCl 0,1 N, đệm acetat pH 4,5, đệm phosphat pH 6,8) kết hợp so sánh với hệ NaD/OTC 118 theo phương pháp trình bày trong mục 2.3.3.1. Kích thước giọt nhũ tương thu được thể hiện trong bảng 3.9.
Bảng 3.9: Kích thước giọt nhũ tương tại thời điểm 15 phút trong 3 môi trường
Môi trường hòa tan Kích thước trung bình (nm)
NaD/OTC Viên nén NaD/OTC
HCl 0,1 N 20,14 22,18
Đệm acetat pH 4,5 21,05 22,19
Trong cả 3 môi trường, mẫu viên NaD và hệ NaD/OTC đều cho kích thước giọt trung bình rất nhỏ (từ 20,14 nm đến 23,68 nm) sau 15 phút tự nhũ hóa.
Với đặc tính dược chất ở trạng thái hòa tan trong các giọt dầu có kích thước rất nhỏ, hệ TNH cung cấp bề mặt phân cách lớn giữa giọt dầu và môi trường hòa tan (cũng như dịch đường tiêu hóa), do đó, tăng tốc độ, mức độ hòa tan dược chất,tăng khả năng hấp thu và tăng sinh khả dụng của thuốc.
* Độ hòa tan:
Viên nén NaD giải phóng nhanh chứa hệ tự nhũ hóa được đánh giá khả năng giải phóng dược chất trong 3 môi trường pH khác nhau (HCl 0,1 N, đệm acetat pH 4,5, đệm phosphat pH 6,8), kết hợp so sánh với NaD nguyên liệu và hệ NaD/OTC 118 theo mục 2.3.4.2.
Kết quả được trình bày trong bảng 3.10, hình 3.9, hình 3.10và hình 3.11.
Bảng 3.10: % giải phóng dược chất từ NaD nguyên liệu, hệ NaD/OTC 118 và
viên NaD giải phóng nhanhtrong 3 môi trường pH khác nhau
Môi trường Mức độ giải phóng dược chất (%)
5 phút 15phút 30 phút 45 phút 60 phút HCl 0,1 N Nguyên liệu 9,8 9,8 12,5 12,6 12,5 Hệ NaD/OTC 99,53 99,58 99,87 100,12 100,05 Viên NaD 95,17 96,81 97,39 98,03 98,35 Đệm pH 4,5 Nguyên liệu 60,15 69,39 70,10 71,05 71,37 Hệ NaD/OTC 98,85 99,35 99,76 100,27 100,53 Viên NaD 96,06 97,25 98,01 98,52 99,14 ĐệmpH 6,8 Nguyên liệu 70,14 78,56 81,23 85,72 86,05 Hệ NaD/OTC 99,54 99,89 100,23 101,05 100,46 Viên NaD 95,44 96,83 98,05 99,05 99,28
Hình 3.9: Đồ thị biểu diễn % GPDC từ nguyên liệu, hệ NaD/OTC 118 và viên NaD trong môi trường HCl 0,1 N
Hình 3.10: Đồ thị biểu diễn % GPDC từ nguyên liệu, hệ NaD/OTC 118 và viên
Hình 3.11: Đồ thị biểu diễn % GPDC từ nguyên liệu, hệ NaD/OTC 118 và viên NaD trong môi trường đệm phosphate pH 6,8
Kết quả thử độ hòa tan cho thấy: Trongcả 3 môi trường:
+ Sovới NaD nguyên liệu, mức độ và tốc độ giải phóng dược chất của viên NaD tăng rõ rệt (viên nén NaD giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa giải phóng > 90% dược chấtsau 5 phút và >96% sau 15 phút).
+ So với hệ NaD /OTC 118, mức độ và tốc độ giải phóng viên nén NaD giảm , tuy nhiên không đáng kể (từ 2%-4% sau 5 phút và từ 2% - 3% sau 15 phút). Như vậy, viên nén NaD bào chế được đáp ứng tiêu chuẩn viên nén hòa tan nhanh của WHO (> 85% dược chất giải phóng sau 15 phút trong 3 môi trường HCl 0,1 N, đệm acetat 4,5 và đệm phosphat 6,8)[26].
Hệ phân phối dược chất tạo vi nhũ tương áp dụng trong viên nén NaD đã cải thiện rõ rệt mức độ và tốc độ giải phóng dược chất trong cả 3 môi trường, đặc biệt môi trường HCl 0,1 N. Natri diclofenac được biết đến là một acid yếu có độ tan rất thấp trong môi trường acid (độ tan: 0,0012 mg/ml trong môi trường pH 1,2 ở nhiệt độ 230C). Tuy nhiên, trong nghiên cứu này, trong môi trường HCl 0,1 N, mức độ giải phóng dược chất của mẫu viên cao gấp ~ 8 lần so với NaD nguyên liệu tại tất cả các thời điểm.
Vì vậy, việc sử dụng hệ phân phối dược chất tự nhũ hóa là một công cụ hữu ích để cải thiện độ tan, mức độ hòa tan và sinh khả dụng của các dược chất ít tan.
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN
Sau thời gian làm thực nghiệm nghi ên cứu bào chế viên nén natri diclofenac giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa, khóa luận đã đạt được những kết quả sau:
- Đã bào chế được hệ tự nhũ hóa tạo vi nhũ tương không chứa dược chất. - Đã bào chế được hệ tự nhũ hóa tạo vi nhũ tương chứa dược chất.
- Đã bào chế được viên nén natri diclofenac giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa NaD/OTC.
Công thức cho một viên nén natri diclofenac 12,5mg giải phóng nhanh sử dụng hệ tự nhũ hóa NaD/OTC gồm có các thành phần sau:
Thành phần Khối lượng/viên (mg) Natri diclofenac 12,5 Dầu đậu nành 11,25 Cremophor 90 Transcutol 11,25 Avicel PH 102 1012,5 Aerosil 45,5 Croscarmellose 104 Magnesi stearat 13
Kết quả đánh giá một số đặc tính của viên NaD giải phóng nhanh cho thấ y: viên có hình thức đẹp , đạt yêu cầu về hàm lượng và đồng đều hà m lượng,thời gian rã nhanh (3 phút 51 giây), có mức độ giải phóng dược chất rất nhanh, đạt tiêu chuẩn của WHO về viên nén giải phóng nhanh (sau 5 phút, dược chất giải phóng trên95% trong 3 môi trường HCl 0,1 N, pH 4,5 và pH 6,8).
ĐỀ XUẤT
Trên đây là một số công việc mà chúng tôi đã làm được trong thời gian qua . Do thời gian có hạn nên chúng tôi chỉ khảo sát khía cạnh chính của đề tài.
Để phát triển và mở rộng khóa luận, chúng tôi có một số đề xuất sau: