Bố trí thí nghiệm: Ở tất cả các thí nghiệm chúng tôi bố trí ngẫu nhiên hoàn toàn với 3 lần nhắc lại. Mỗi lần nhắc lại 3 bình, mỗi bình 6 mẫu
Bình nuôi cấy:
- Bình tam giác 250ml - Bình trụ 200ml
Thể tích môi trường trong bình nuôi cấy 50ml/bình
Môi trường nền: MS + 30g/l Sucrose + 5g/l agar + 0.5g/l BAP, pH = 5,6 -5,8
3.6.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất hữu cơ tự nhiên đến khả năng sinh trưởng và tích lũy sinh khối in vitro lan Thạch Hộc Tía
Các chồi lan tái sinh lần thứ nhất từ hạt lan Thạch Hộc Tía gieo trên môi trường MS được tách ra và cấy chuyển sang môi trường môi trường MS + 30 gram/l saccarose + 5 gram/l agar + 0,5 gram/l BAP và bổ sung chất hữu cơ ở nồng độ khác nhau tùy thuộc vào từng CT thí nghiệm. pH môi trường được chuẩn về 5,6-5,8 bằng NaOH 1N hoặc HCl 1N.
Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ nước dừa đến khả năng sinh trưởng tích lũy sinh khối in vitro của lan Thạch Hộc Tía
Trong thí nghiệm này, đề tài thực hiện bổ sung nước Dừa vào môi trường nền (trường MS + 30 gram/l saccarose + 5 gram/l agar + 0,5 gram/l BAP) với nông độ dao động từ 0 ml đến 200 ml. Bao gồm các công thức (CT) thí nghiệm sau:
CT 1 (đ/c): MT nền + 0 mg/l nước Dừa. CT 2: MT nền + 50 ml/l nước Dừa. CT 3: MT nền + 100 ml/l nước Dừa.
21
CT 4: MT nền + 150 ml/l nước Dừa. CT 5: MT nền + 200 ml/l nước Dừa.
Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ dịch nghiền chuối đến khả năng sinh trưởng tích lũy sinh khối in vitro của lan Thạch Hộc Tía
Trong thí nghiệm này, đề tài thực hiện bổ sung dịch nghiền chuối vào môi trường nền (trường MS + 30 gram/l saccarose + 5 gram/l agar + 0,5 gram/l BAP) với nông độ dao động từ 0 ml đến 200 ml. Bao gồm các CT thí nghiệm sau:
CT 1 (đ/c): MT nền + 0 g/l dịch nghiền chuối CT 2: MT nền + 50 g/l dịch nghiền chuối CT 3: MT nền + 100 g/l dịch nghiền chuối CT 4: MT nền + 150 g/l dịch nghiền chuối CT 5: MT nền + 200 g/l dịch nghiền chuối
Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ dịch chiết khoai tây đến khả năng sinh trưởng tích lũy sinh khối in vitro của lan Thạch Hộc Tía
Trong thí nghiệm này, đề tài thực hiện bổ sung dịch chiết khoai tây vào môi trường nền (trường MS + 30 gram/l saccarose + 5 gram/l agar + 0,5 gram/l BAP) với nông độ dao động từ 0 ml đến 200 ml. Bao gồm các CT thí nghiệm sau:
CT 1 (đ/c): MT nền + 0 g/l dịch chiết khoai tây CT 2: MT nền + 60 g/l dịch chiết khoai tây CT 3: MT nền + 75 g/l dịch chiết khoai tây CT 4: MT nền + 90 g/l dịch chiết khoai tây CT 5: MT nền + 105 g/l dịch chiết khoai tây
3.6.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất hữu cơ tự nhiên đến khả năng sinh trưởng và tích lũy sinh khối in vitro lan Thạch Hộc Tía