III. Kĩ thuật thụ tinh nhân tạo.
1. Quy trình kĩ thuật thụ tinh nhân tạo Kĩ thuật lấy tinh.
1.1. Kĩ thuật lấy tinh.
Khi tiến hành lấy tinh phải đảm bảo các yêu cầu như lấy được toàn bộ tinh dịch gia súc phóng ra. Không ảnh hưởng xấu đến phẩm chất tinh dịch, không làm tổn hại đến cơ quan sinh dục của con đực. Dụng cụ lấy tinh phải đơn giản tiện lợi, dễ sử dụng, giá thành hạ.
Lấy tinh có nhiều phương pháp khác nhau. Chúng ta có thể sử dụng phương pháp lấy tinh bằng âm đạo giả hoặc bằng tay. Nhưng thường sử dụng phương pháp âm đạo giả vì nó cho phép nhận tinh dịch thuần khiết, các phản xạ phóng tinh xảy ra bình thường, cấu tạo của âm đạo giả gần với
tự nhiên và dễ sử dụng. Tuy nhiên khi lấy tinh dịch tùy từng loài gia súc mà ta áp dụng các phương pháp khác nhau.
Đối với Trâu Bò việc lấy tinh chủ yếu sử dụng âm đạo giả. Đối với Lợn sử dụng phương pháp bằng tay.
Đối với phương pháp lấy tinh bằng âm đạo giả thì người ta tập cho bò đực nhảy lên giá có hình tượng trưng như bò cái. Âm đạo giả cần có nhiệt độ, áp suất, độ nhớt phù hợp để gia súc đực xuất tinh tốt, cụ thể ở trâu, bò nhiệt độ trong âm đạo giả cần 40 - 41°C.
Lợn, ngựa cần 39 - 40°C, nhiệt độ quá thấp hoặc quá cao làm cho gia súc xuất tinh không tốt thậm chí không xuất tinh hoặc chất lượng tinh không tốt.
Gia súc sau khi nhảy lên giá sẽ có phản xạ cương cứng dương vật. Lúc đó kỹ thuật viên tay trái cầm lấy bao dương vật bẻ dương vật chếch về phía bên phải con vật còn tay phải thì đưa âm đạo giả vào dương vật, khi dương vật gia súc đực thúc vào âm đạo giả với nhiệt độ, áp suất, độ nhớt thích hợp sẽ xuất tinh. Thời gian xuất tinh của mỗi loài gia súc là khác nhau, đối với bò khoảng 1-2 giây.
1.2. Đánh giá chất lượng và pha loãng tinh dịch.1.2.1. Đánh giá chất lượng tinh dịch. 1.2.1. Đánh giá chất lượng tinh dịch.
Sau khi lấy tinh cần kiểm tra chất lượng tinh để xem mẩu tinh vừa lấy có đạt tiêu chuẩn không. Chất lượng tinh phụ thuộc vào nhiều yêu tố như giống, tuổi, mức độ làm việc, chế độ thời tiết, bệnh lý và kỹ thuật lấy tinh...
Các chỉ tiêu kiểm tra gồm:
-Màu sắc tinh: Tốt nhất có màu trắng kem hoặc màu trắng sữa, tinh dịch có màu xanh, đỏ nâu đều có chất lượng không tốt.
-Độ PH của tinh dịch: Tinh dịch tốt có độ PH giao động 6.7 - 7.2. Ở bò tốt nhất là 6.2 - 6.9, lợn 7.1 - 7.5, trâu 6.7.
- Lượng tinh xuất: Giao động trong khoảng 3- 6ml là tốt nhất,vì nếu lượng tinh xuất quá ít, số viên tinh làm ra sẽ rất ít và nếu lượng tinh xuất quá nhiều thì chất lượng tinh lại kém. Ở bò khoảng 4ml là tốt.
- Hoạt lực của tinh trùng: Là tỷ lệ phần trăm giữa tinh trùng có hoạt động tiến thẳng so với tổng số tinh trùng có trong vi trường quan sát. Lợn 75- 85 %, bò 60 - 80 %.
- Nồng độ tinh trùng: Là chỉ tiêu quan trọng để tính tỷ lệ pha loãng. Ở bò là 1tỷ/ 1ml, ở Trâu là 0.7 - 0.8 tỷ/ 1ml.
- Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình: Tỷ lệ này càng nhỏ thì chất lượng tinh trùng càng cao. Ở trâu tỷ lệ này đạt 10 %, ở lợn < 20 %.
1.2.2. Pha loãng tinh dịch.
Tinh dịch sau khi kiểm tra đầy đủ sẽ được pha loãng và bảo quản cẩn thận.
1.2.3. Kĩ thuật thụ tinh nhân tạo.
1.2.3.1. Phát hiện gia súc cái động dục.
Phát hiện gia súc cái động dục dựa vào những biểu hiện. Động dục ở gia súc cái Bò, Lợn biểu hiện động dục tương đối rõ ràng Trâu biểu hiện thầm lặng hơn. Việc phát hiện động dục chính xác là một yếu tố quan trọng để có tỷ lệ thụ thai cao và không bỏ sót gia súc cái động dục. Để phát hiện gia súc cái động dục có thể sử dụng một số phương pháp như dùng gia súc đực thí nghiệm hoặc qua việc quan sát những biểu hiện bên ngoài của con cái hoặc dùng chất chỉ thị màu. Trong các phương pháp đó thì phương pháp sử dụng Bò đực thí nghiệm có khả năng phát hiện thí nghiệm chính xác nhất độ chính xác lên tới 96-100%.
1.2.3.2. Dẫn tinh cho gia súc cái.
Sau khi phát hiện động dục của gia súc cái ta tiến hành dẫn tinh. Để có tỷ lệ thụ thai cao thì ngoài các yêu cầu như con cái có khả năng sinh sản cao, phát hiện động dục kịp thời, chất lượng tinh tốt mà thời điểm dẫn tinh phải thích hợp và kỹ thuật dẫn tinh phải tốt.
- Thời điểm dẫn tinh: Dẫn tinh ở thời điểm thích hợp là yếu tố quan trọng để thu được tỷ lệ thụ thai cao. Ở bò, thời điểm dẫn tinh thích hợp thường nằm trong khoảng thời gian chịu đực ( 18 - 19 giờ) và để đạt được tỷ lệ thụ thai cao nhất, ở bò cái cần được thụ tinh vào sau 2/3 của thời kỳ động dục hoặc ít giờ sau thời kỳ chịu đực. Khi xem xét sự phát triển của nang trứng qua khám trực tràng cho thấy phần lớn nang trứng ở giữa giai đoạn
chịu đực thường là đàn hồi và cứng. Đường kính của nó trong nhiều trường hợp khoảng 1cm và thành noãn bào dày nhất. Thời gian này là thời điểm phối giống tối ưu. Trong thực tiễn chăn nuôi nước ta, rất khó xác định chính xác thời gian bắt đầu động dục của bò cái, ít có điều kiện để kiểm tra bò cái đã chịu đực hay chưa. Do đó người ta thường áp dụng quy tắc sáng chiều cụ thể. Khi phát hiện bò cái chịu đực vào buổi sáng thì dẫn tinh vào buổi chiều cùng ngày. Nếu phát hiện động dục vào giữa buổi chiều và tối thì dẫn tinh vào sáng ngày hôm sau. Đối với Lợn cái nội nên phối giống vào cuối ngày thứ hai sang đầu ngày thứ ba tính từ lúc bắt đầu động dục. Đối với Lợn cái ngoại, nếu là cái tơ người ta thường cho phối giống vào chiều ngày thứ ba hoặc sáng ngày thứ tư.
- Dẫn tinh: Tuỳ từng loài gia súc khác nhau mà kĩ thuật dẫn tinh cũng khác nhau.
+ Đối với lợn: Sau khi chuẩn bị tinh dịch và dụng cụ cần thiết thì dẫn tinh viên cần vệ sinh bộ phận sinh dục phía ngoài của con cái, rửa sạch và lau khô tay. Giữ cho Lợn cái đứng yên. Dùng ngón cái và ngón trỏ vạch lên hai mép của âm hộ và nhẹ nhàng đưa dẫn tinh quản đã bôi trơn vào âm hộ đã hé mở. Sau đó, đẩy dẫn tinh quản đi về phía trước hơi chếch lên phía trên, vừa đưa tay vừa xoay nhẹ đầu dẫn tinh quản cho đến khi tinh quản ngập sâu vào trong âm đạo khoảng 15 - 20cm, tiếp tục đẩy dẫn tinh quản vào sâu trong cổ tử cung. Khi dẫn tinh viên cảm thấy đầu tinh quản không thể vào sâu hơn được nữa thì dừng lại và bơm tinh. Tốt nhất nâng túi dẫn tinh hoặc xơ ranh bơm tinh lên để tinh dịch tự động chảy từ từ vào tử cung. Khi đưa ống dẫn tinh vào âm đạo nên làm động tác rút ra rút vào nhè nhẹ để kích thích lợn. Động tác kích thích rất quan trọng bởi vì nó hỗ trợ tử cung thúc đẩy tinh trùng tiến về phía ống dẫn trứng.
Sau khi dẫn tinh không nên cho lợn nằm ngay hay ăn no, vì ảnh hưởng đến kết quả của quá trình thụ tinh.
+ Đối với Bò: Phương pháp trực tràng cổ tử cung đang được phổ biến rộng rãi ở nước ta.
Đầu tiên lấy hết phân trong trực tràng, lau sạch âm hộ, dùng ngón trỏ
và ngón cái của tay trái mở âm hộ. Tay phải cầm đưa vào âm hộ chếch
khoảng 45ºC rồi đưa sâu 10cm. Nâng dẫn tinh quản song song với sống lưng
Bò và đẩy sâu vào cho đến khi thấy vướng thì dừng lại. Đưa tay trái vào trực
tràng tìm dẫn tinh quản và hướng đầu dẫn tinh quản vào cổ tử cung, ngón
cái tay trái bịt miệng cổ tử cung, tay phải hướng đầu dẫn tinh quản chạm vào
ngón cái tay trái. Rút ngón cái ra, đồng thời tay phải đẩy nhẹ dẫn tinh quản
đi qua hết bốn nấc cổ tử cung thì thấy hỗng, lúc này tay trái lần theo thân tử
cung tìm đến đầu dẫn tinh quản, dùng ngón trỏ tay trái nhẹ nhàng đẩy đầu
dẫn tinh quản lùi hết thân tử cung (đó là vị trí dẫn tinh thích hợp). Tay trái
giữ cổ tử cung, tư thế thẳng tay phải bơm tinh. Rút dẫn tinh quản hoặc bơm
dẫn tinh ra, tay phải cầm cổ tử cung nâng phía sau lên xoa nhẹ vài lần, rút
tay khỏi trực tràng cho bò nghỉ vài tiếng.
