TÍNH CHẤT CỦA PROTEIN 26

Một phần của tài liệu Giáo trình hóa sinh học - Chương 1 ppt (Trang 27 - 30)

1. Tính chất lưỡng tính.

Trong dung dịch, cũng như aminoacid, protein tổn tại ở dạng ion lưỡng cực. Tuy nhiên, khác với aminoacid, tính chất lưỡng tính của protein được quyết định bởi các gốc R cĩ khả năng ion-hĩa. Các nhĩm α-carboxyl và α-amin tận cùng do chiếm tỷ lệ rất ít trong phân tử protein nên ảnh hưởng khơng đáng kể đến tính chất này. Mỗi protein cĩ một điểm đẳng điện đặc trưng. Tại điểm đẳng điện protein rất dễ bị kết tủa. Tính chất lưỡng tính được sử dụng để tách và tinh chế protein trên cơ sở phương pháp điện di.

2. Hoạt tính quang học.

Protein là những hợp chất cĩ hoạt tính quang học do trong phân tử chứa nhiều nguyên tử carbon bất đối. Tuy nhiên, độ quay tổng số của chuỗi polypeptide khơng phải là phép cộng đơn giản độ quay của tồn bộ aminoacid trong thành phần của nĩ. Protein thường cĩ độ quay phải lớn hơn. Mức “quay phải thừa” tối đa được ghi nhận khi chuỗi polypeptide cĩ dạng xoắn α. Khi chuỗi polypeptide ở trạng thái hỗn độn thì khơng nhận thấy cĩ sự chênh lệch này. Vì vậy, trên cơ sở hoạt tính quang học cĩ thể xác định tỷ lệ khu vực xoắn α trong phân tử protein và nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến sự hình thành và phá vỡ cấu trúc đĩ.

3. Tính hydrate-hĩa.

Protein liên kết chặt chẽ với nước trong cơ thể nhờ phân tử của chúng cĩ chứa các nhĩm ưa nước như –COOH, -OH, -NH2 v.v... Những nhĩm này lơi cuốn các phân tử nước vốn cĩ tính phân cực về phía mình. Nhờ đĩ hình thành một lớp nước xung quanh phân tử protein. Nhờ vậy dung dịnh protein khá bền vững và khĩ bị kết tủa. Hiện tượng này được gọi là sự hydrate hĩa. Chính nhờ lớp nước hydrate-hĩa bao bọc xung quanh nên mặc dù tại điểm đẳng điện protein dễ bị kết tủa nhưng nĩi chung tự bản thân nĩ sẽ khơng bị kết tủa. Nếu loại trừ lớp nước này các phân tử protein sẽ cĩ

điều kiện tiếp cận nhau, phối hợp lại thành những hạt lớn để cuối cùng vượt khỏi giới hạn kích thước của các hạt keo và do đĩ bị kết tủa.

Việc rút nước cĩ thể thực hiện nhờ muối (diêm tích) hoặc các dung mơi hữu cơ cĩ tính hút nước mạnh như ethanol, acetone v.v... Nếu việc rút nước được thực hiện trong điều kiện êm dịu (ví dụ nhiệt độ thấp), thì tủa protein vẫn giữ được khả năng hịa tan trở lại cùng với đầy đủ các tính chất nguyên thủy của nĩ.

Dung dịch protein trong nước là một dạng dung dịch keo (sol). Trong những điều kiện nhất định sol bị mất nước và biến thành dạng keo đặc (gel). Gel khi tiếp xúc với nước sẽ hút một lượng nước rất lớn và trương phồng. Khả năng trương phồng này thấp nhất tại điểm đẳng điện. Sự trương phồng của hạt khi ngâm nước và nẩy mầm, sự trương phồng của bột nhào v.v...đều liên quan chặt chẽ với sự trương phồng của gel protein. Khi bị biến tính, khả năng hút nước và trương phồng của protein bị giảm hoặc mất hồn tồn. Mặt khác, ở trạng thái gel protein khĩ bị biến tính hơn ở trạng thái sol.

4. Sự biến tính của protein.

Phân tử protein cĩ thể bị biến tính bởi nhiệt độ cao, pH thái cực, tia X, tia cực tím, tia phĩng xạ, áp lực cao, các tác động cơ học (ví dụ lắc mạnh dung dịch), tác động của một số hĩa chất v.v...

Sự biến tính xảy ra do cấu trúc nguyên thủy bị phá vỡ, chủ yếu vì đứt các liên kết thứ cấp như liên kết hydro, liên kết disulfide v.v... cịn cấu trúc bậc một vẫn cịn giữ nguyên vẹn. Biến tính kéo theo hiện tượng mất khả năng hịa tan (kết tủa), biến đổi hoạt tính quang học, mất các tính chất sinh học, xuất hiện các yếu tố kháng nguyên mới và trở nên dễ bị phân giải hơn bởi các emzyme tiêu hĩa.

Hình 1.5. Sự biến tính thuận nghịch của protein. 1- biến tính;

2- khơi phục trạng thái nguyên thủy; gạch nối đậm – liên kết disulfide.

Khi sự biến tính xảy ra chưa hồn tồn và nếu sau đĩ loại bỏ dần tác nhân gây biến tính (ví dụ giảm nhiệt độ từ từ), trạng thái nguyên thủy của protein cĩ thể được khơi phục. Kiểu biến tính này được gọi là biến tính thuận nghịch (hình 1.5).

Khi protein đã biến tính hồn tồn và sâu sắc, cũng như khi giảm nhiệt độ đột ngột, protein biến tính khĩ hoặc khơng thể khơi phục trạng thái nguyên thủy (biến tính khơng thuận nghịch).

5. Các phản ứng màu đặc trưng.

Tùy thuộc vào thành phần aminoacid, protein cĩ thể cho các phản ứng màu khác nhau.

a/ Phản ứng biurê. Khi cho kiềm và sulphate đồng và dung dịch protein sẽ tạo sản phẩm màu xanh tím hoặc tím đỏ tương tự như khi những chất này tác dụng với biurê (H2N-CO-NH-CO-NH2). Phản ứng này, vì thế, chứng minh sự tồn tại của liên kết peptide trong phân tử protein.

b/ Phản ứng xanthoprotein. Dưới tác dụng của acid nitric đặc một số protein cho sản phẩm màu vàng. Phản ứng đặc trưng cho những protein cĩ chứa các aminoacid cĩ nhân benzol (tyrosine, phenylalanine, tryptophan).

c/ Phản ứng Milon. Khi đun protein với thuốc thử Milon (hỗn hợp nitrate và nitrite trong acid nitric đặc) sẽ xuất hiện sản phẩm màu hồng hoặc đỏ thắm. Phản ứng liên quan với sự tồn tại của nhĩm phenol của tyrosine.

d/ Phản ứng Adamkjevich. Những protein cĩ chứa tryptophan do sự tồn tại của nhân indol nên khi tác dụng với acid glyoxylic trong acid sulfusuric sẽ cho sản phẩm màu xanh tím.

e/ Phản ứng Sacagusa. Một số protein khi xử lý trước bằng hypoxhloride natri và sau đĩ bằng β-naphtol sẽ cho màu đỏ thắm. Phản ứng cho biết trong phân tử cĩ nhĩm guanidine của arginine.

6. Hoạt tính và chức năng sinh học của protein.

Hoạt tính sinh học của protein thể hiện ở nhiều khía cạnh khác nhau. Bên cạnh những protein cấu trúc với chức năng chủ yếu là gĩp phần tạo nên các cơ quan tử của tế bào, cịn cĩ những protein enzyme làm nhiệm vụ xúc tác các phản ứng hĩa học của quá trình trao đổi chất, Nhiều protein khác làm nhiệm vụ vận chuyển (hemoglobin, myoglobin), cử động (myosin, actin), bảo vệ (protein kháng thể, fibrinogen, trombin), hormone ( insulin, hormone sinh trưởng), dự trữ chất dinh dưỡng (ovoalbumin, casein, glyadin, zein). Một số protein là độc tố rất mạnh (nọc rắn, risin, độc tố của một số nấm và vi khuẩn). Ngồi ra, nhờ hoạt tính sinh học của mình, protein cịn thực hiện nhiều chức năng khác trong tế bào và cơ thể sống. Sau khi bị biến tính, protein khơng cịn cĩ khả năng đảm nhận bất kỳ chứa năng sinh học nào.

Hoạt tính sinh học của protein , cũng như tính chất vật lý và hĩa học của chúng, phụ thuộc vào thành phần aminoacid của chuỗi polypeptide. Tính đa dạng của các gốc aminoacid trong phân tử protein cho phép hình thành các kiểu liên kết thứ cấp khác nhau trong nội bộ phân tử protein, giữa các phân tử protein với nhau và giữa các phân

tử protein với các phân tử thuộc các nhĩm hợp chất khác nhằm xây dựng các tổ hợp trên phân tử cần thiết để tạo nên các cơ quan khác nhau và quy định tính chất vật lý, hĩa học cùng chức năng sinh học của những tổ hợp đĩ.

Nhiều yếu tố khác nhau của mơi trường như nhiệt độ, pH v.v... cĩ tác dụng làm thay đổi mối tương quan giữa các gốc aminoacid trong phân tử protein. Sự thay đổi đĩ dẫn đến hàng loạt những biến đổi về mặt tính chất vật lý, hĩa học, sinh học của protein. Một trong những ví dụ về sự biến đổi đĩ là sự biến tính.

Một phần của tài liệu Giáo trình hóa sinh học - Chương 1 ppt (Trang 27 - 30)