12 Tinh sạch-mangostin

1 2 3

α-mangostin

(A) (B)

Hình 3 5 Kiểm tra độ sạch của sản phẩm-mangostin tinh sạch

(A): TLC sản phẩm tinh sạch-mangostin qua cột silica gel (1):-mangostin tinh sạch; (2):-mangostin chuẩn; (3): dịch chiết trước khi đưa lên cột

(B): Kết quả kiểm tra độ sạch-mangostin bằng HPLC

Cao chiết chứa hoạt chất-mangostin được tách chiết từ 100 g bột vỏ quả măng cụt bằng dung môi ethanol với tỷ lệ dung môi : nguyên liệu là 3:1, ở 60C, sau 4 giờ Dịch chiết ethanol được tinh sạch sơ bộ bằng phương pháp phân tách phân đoạn Cao chiết ethanol thu được chiếm đến 12,8% khối lượng nguyên liệu ban đầu (Bảng 3 1) Dịch chiết được sử dụng để tinh sạch bằng cột sắc kí silica gel Lượng

n 31

Luận văn thạc sĩ Sinh học thực nghiệm

-mangostin thu được sau khi tinh sạch chiếm 0,13% khối lượng nguyên liệu ban đầu Kết quả này thấp hơn so với nghiên cứu của Pothitirat và cộng sự (2008), công bố tách chiết được lượng mangostin bao gồm-mangostin,-mangostin,

-mangostin chiếm 9,94% khối lượng nguyên liệu [35] Tuy nhiên, lượng -mangostin thu được ở đề tài này cao hơn kết quả nghiên cứu của các tác giả:

Iinuma và cộng sự (1996) tách chiết được lượng-mangostin chiếm 0,0019% khối lượng nguyên liệu thô [19]; Ho và cộng sự (2002) thu được lượng-mangostin chiếm 0,006% nguyên liệu ban đầu Nguyên nhân có thể do hiệu suất thu hồi trong quá trình sắc kí cột silica gel không ổn định, và nguyên liệu có nguồn gốc khác nhau thì hàm lượng-mangostin cũng khác nhau Ngoài ra, ở đề tài này chỉ tập trung tinh chế-mangostin, nên khối lượng thu được sẽ thấp hơn trong nghiên cứu của Pothitirat và cộng sự

Bảng 3 1 Tỷ lệ sản phẩm tách chiết so với nguyên liệu thô Sản phẩm

Cao chiết ethanol Cao chiết n-hexan -Mangostin tinh sạch

So với nguyên liệu thô (%) 12,8

0,168 0,13

Sản phẩm thu được sau khi tinh sạch bằng cột sắc kí silica gel khá tinh khiết so với-mangostin của hãng chromadex Hình ảnh sắc kí bản mỏng sản phẩm tinh sạch cho thấy vẫn còn lẫn một băng có Rf = 0,92 cm (Hình 3 5A) Tuy nhiên, băng này rất mờ, chứng tỏ hàm lượng của chất này rất thấp Kết quả kiểm tra bằng HPLC cho thấy đô ̣ sa ̣ch của-mangostin đa ̣t 98,5% (Hình 3 5B) Sản phẩm tinh sạch được nhận dạng bằng phương pháp khối phổ, dựa vào phổ C13 và phổ H cho thấy sản phẩm này chính là-mangostin (Hình phụ lục P3 và P4) Như vậy, sản phẩm thu được đủ độ sạch và độ tin cậy để có thể sử dụng thử nghiệm các hoạt tính sinh học của-mangostin như: hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm, chống oxi hóa trên đối tượng chuột nhắt trắng

n 32

Luận văn thạc sĩ Sinh học thực nghiệm