Các nhà khoa h丑e"8«"ej泳ng minh có nhi隠u nhân t嘘 違nh h逢荏pi"8院n b違n ch医t c栄a CLEA nh逢: nhi羽v"8瓜, pH, kh違 p<pi"m院t h嬰p c栄a các phân t穎 enzyme, t嘘c
8瓜 ph違n 泳ng, tác nhân gây k院t t栄a và s詠 hình thành liên k院t chéo. D磯p"8院n vi羽c là ph違i t嘘i 逢u hóa các nhân t嘘 違nh h逢荏ng trên. V噂i s詠 t嘘i 逢u hóa thích h嬰p, ph逢挨ng pháp CLEA áp d映ng 8逢嬰c cho h亥u h院t enzyme (hydrolase, oxidoreductases, lyase.È+0"R医t nhi隠w"gp¦{og"8«"8逢嬰c áp d映pi"vj pj"e»pi"m "
thu壱t CLEA.
B違ng 1.3<"Eƒe"gp¦{og"8逢嬰c c嘘8鵜nh thành công b茨pi"m "vjw壱t CLEA.
Penicillin acylases Glucose oxidase R-Oxynitrilase
Aminoacylase Galactose oxidase Pyruvate decarboxylase Pig Liver Esterase Laccase
Lipases Catalase D-Deoxyribose aldolase
Nitrilases Alcohol dehydrogenase Galactosidase Formate dehydrogenase Protease (trypsin) Phytase
13
1.2.4 M瓜t s嘘 công trình nghiên c泳u v隠m "vjw壱t CLEA
Nghiên c泳u c栄a R.A. Sheldon và c瓜ng s詠<"ÐEtquu-linked enzyme
aggregates (CLEA): M瓜v" rj逢挨pi" rjƒr" e嘘 8鵜nh enzyme tân th運i và linh
ho衣vÑ."p<o"4227"]65̲0
C嘘 8鵜nh enzyme b茨pi" m " vjw壱t CLEA và các 泳ng d映ng c栄a enzyme d衣ng CLEA trong chuy吋n hóa sinh h丑c công nghi羽p r医v"8逢嬰c quan tâm. Ch院 ph育m CLEA ch鵜u 違pj"j逢荏ng c栄a quá trình t栄a enzyme t瑛 dung d鵜ej"8羽m cùng v噂i tác nhân cross-linking nh鵜 ch泳c, th逢運ng là m瓜t dialdehyde nh逢 glutaraldehyde hay dextran polyaldehyde.
M "thu壱t này là khá 8挨n gi違n và 8逢嬰c áp d映ng r瓜ng rãi. CLEA 8go" n衣i r医t nhi隠u l嬰k" ej"mjk"8逢嬰c 泳ng d映ng trong công nghi羽p xúc tác sinh h丑c. Th運i gian s穎 d映ng c栄a enzyme c嘘 8鵜nh b茨pi"m "vjw壱v"ENGC"8逢嬰e"v<pi"n‒p"8ƒpi"m吋 và ho衣v"v pj"e pi"8逢嬰c 鰻p"8鵜nh, d宇 dàng ph映c h欝i và tái s穎 d映ng, hoàn toàn 鰻n
8鵜nh khi t育y r穎a trong môi tr逢運ng n逢噂c. M "vjw壱t CLEA s穎 d映pi"8逢嬰c cho r医t nhi隠u lo衣i enzyme, ví d映 pj逢 các lo衣i enzyme hydrolase, oxidoreductase và lyase trong công nghi羽p xúc tác sinh h丑c0"A欝ng t壱p h嬰p và liên k院t chéo hai hay nhi隠u lo衣i enzyme còn g丑i là combi-CLEA r医t có #"pij c"8嘘i v噂i vi羽c xúc tác trong cùng m瓜t n欝i ph違n 泳ng, ti院n trình ph違n 泳ng dây chuy隠n enzyme n嘘i ti院p, ví d映 pj逢 泳ng d映ng thành công ba t亥ng combi-CLEA bao g欝m hydroxynitrile lyase, nitrilase và amidase trong quá trình chuy吋p" 8鰻i benzaldehyde thành acid S-mandelic 8衣t 96% chuy吋p" 8鰻k" vtqpi" ;;'" 8欝ng
rj¤p"8嘘i quang.
Hình 1.6: PhＶn とng chuyあp"8ごi benzaldehyde thành acid S-mandelic
C嘘 8鵜nh gp¦{og" vj逢挨pi" o衣i, Pectinex Ultra SP-L, b茨pi" m " vjw壱t
CLEA, nghiên c泳u c栄a Sohel Dalal và c瓜ng s詠."p<o"4229"]6:̲0
Trong nh英pi" p<o" i亥p" 8¤{." m " vjw壱t ENGC" 8«" ejq" vj医{" 8¤{" n " o瓜v" rj逢挨pi"
14
8逢嬰c ti院n hành v噂k" gp¦{og" vj逢挨pi" o衣i, Pectinex Ultra SP-L, có ch泳a pectinase, xylanase và cellulase. CLEA có th吋 s穎 d映ng v噂i b医t kì enzyme ho衣t
8瓜pi"p q0"ENGC"8逢嬰c mô t違 b茨ng m瓜t h羽 th嘘ng các tham s嘘 8瓜ng l詠c h丑c, nghiên c泳u v隠 kh違 p<pi"ej鵜u nhi羽t và m泳e"8瓜 liên k院t thành m衣pi"n逢噂i c栄a ba lo衣i enzyme trên. Th詠c hi羽n t栄a ba enzyme ho衣v" 8瓜ng v噂i n-propanol, th詠c hi羽n liên k院t chéo v噂k" inwvctcnfgj{fg" *7oO+" 8吋 ho衣v" j„c" eƒe" gp¦{og." 8欝ng th運i gi英 l衣i các enzyme sau khi th詠c hi羽n các liên k院t chéo. Giá tr鵜 Xocz1Mocz" v<pi" v瑛 11, 97" x " 38" 8院n 14, 80 và 19 cho enzyme pectinase, xylanase, và cellulase v逢挨pi" 泳ng. 雲 nhi羽v" 8瓜 kh違o sát là 50°C, 60°C, 70°C, th運i gian bán h栄y t瑛 17, 22 và 32 phút v<pi" n‒n 180, 82 và 91 phút cho pectinase, xylanase, và cellulase v逢挨pi"泳ng. C違 ba lo衣i enzyme trong CLEA
8隠u có th吋 tái s穎 d映pi"8院n l亥n th泳 ba mà không gi違m ho衣t tính. M厩k"8挨p"x鵜 có th吋 xúc tác nhi隠u bi院p"8鰻i sinh h丑c, cho c違 ba ph違n 泳pi"8瓜c l壱p và khác nhau: ph違n 泳ng th栄y phân pectin, ph違n 泳ng th栄y phân xylan, ph違n 泳ng th栄y phân cellulose. Các ph違n 泳pi"8逢嬰c th詠c hi羽n t衣i nhi羽v"8瓜 ecq"j挨p"uq"x噂i enzyme t詠
do.
Nghiên c泳u c嘘 8鵜nh enzyme glucoamylase b茨ng m "thu壱t CLEA c栄a
Zhang Qian x "e瓜pi"u詠"p<o"422: [52].
A吋 kh逸c ph映c nh英pi"pj逢嬰e"8k吋m c栄a glucoamylase t詠 fq."rj逢挨pi"rjƒr"i逸n k院t các phân t穎 glucoamylase l衣i v噂i nhau thông qua liên k院t chéo (CLEA), m瓜t m "thu壱t c嘘 8鵜nh m噂k."8«"8逢嬰c nghiên c泳w"8吋 áp d映ng vào trong s違n xu医t,
rj逢挨pi"rjƒr"p {"8逢嬰c th詠c hi羽n b茨ng cách s穎 d映pi"inwvctcnfgj{fg"pj逢"n "e亥u n嘘i liên k院t sau khi glucoamylase t詠 fq" 8逢嬰c k院t t栄a b荏i tác nhân t栄a thích h嬰r0" Eƒe" 8k隠u ki羽n t嘘k" 逢w" 8吋 c嘘 8鵜nh glucoamylase theo m "thu壱t CLEA thu
8逢嬰e"pj逢"ucw<"eƒe"mj嘘i glucoamylase sau khi c嘘 8鵜nh có th吋 8逢嬰c t衣o thành
mjk"8逢嬰c b鰻 sung tert-butyl alcohol vào dung d鵜ch enzyme glucoamylase (5g/l
và pH 5,6) 荏 20oE0"Eƒe"8k隠u ki羽n c嘘8鵜nh t嘘k"逢w"8逢嬰e"vt·pj"d {"pj逢"ucw<"p欝ng
8瓜 glutaraldehyde s穎 d映ng là 10%, c嘘 8鵜nh trong th運i gian là 120 phút, các
kh嘘k"ENGC"vjw"8逢嬰c sau thao tác ly tâm và r穎a. Ho衣t tính c栄a enzyme c嘘8鵜nh
là 40,4% ho衣t tính c栄a glucoamylase t詠fq"dcp"8亥u.
Nghiên c泳u c嘘 8鵜nh subtilisin b茨pi"m "vjw壱t CLEA c栄a K. Sangeetha
x "e瓜pi"u詠"p<o"422: [36].
Subtilisin là m瓜t endopeptidase, xúc tác th栄y phân liên k院t peptide qua hình thành m瓜t ch医t trung gian acyl-enzyme, enzyme này ho衣v"8瓜ng t衣k"o»k"vt逢運ng trung tính, pH ki隠m nh姻0"Uwdvknkukp"8逢嬰c 泳ng d映ng trong công nghi羽p ch医t t育y
15
r穎a hay t鰻ng h嬰p hóa h丑c. A吋 phù h嬰p s穎 d映ng trong ch医t t育y r穎a enzyme ph違i
鰻p"8鵜nh v噂i pH ki隠m, 鰻p"8鵜nh v噂i nhi羽v"8瓜ecq"v逢挨pi"8嘘i.
Vì v壱y 鰻p"8鵜nh enzyme là m瓜t trong nh英ng thách th泳c l噂n trong quá trình t嘘i
逢w" j„c" z¿e" vƒe" ukpj" j丑e0" Uwdvknkukp" 8逢嬰c k院t t栄a b茨ng cách s穎 d映ng amoni sulfat và polyethylene glycol v噂i các ch医t b隠 m員t pj逢"Vtkvqp"Z-100 và Tween 20. Enzyme CLEA, k院t qu違 c栄a quá trình liên k院t chéo gi英a glutaraldehyde và enzyme, là nh英ng kh嘘i enzyme không tan và có kh違 p<pi"z¿e"vƒe0"Enzyme c嘘 8鵜nh CLEA cho th医y kh違 p<pi"jq衣v"8瓜ng r瓜ng lên t噂i pH 9 và nhi羽v"8瓜 70°C. Tái s穎 d映ng và hình thái h丑c b隠 m員t c栄a các kh嘘k"ENGC"e pi"8逢嬰c nghiên c泳u. CLEA c栄a subtilisin có s詠 鰻p"8鵜nh t嘘t trong các dung môi h英w"e挨"mj»pi"
phân c詠c, ch鰯ng h衣p"pj逢"jgzcpg."và cyclohexane và có kh違 p<pi"ej鵜u nhi羽t
ecq"n‒p"8院p"82̇E"x "fq"8„"e„"vj吋8逢嬰c s穎 d映pi"pj逢"o瓜t ch医v"z¿e"vƒe"8吋 bi院n
8鰻i sinh h丑c c栄a các h嬰p ch医t không tan trong o»k"vt逢運pi"p逢噂c.
Vtqpi"8隠 tài c栄c"ej¿pi"v»k."8嘘k"v逢嬰pi"gp¦{og"8逢嬰c ch丑p"8吋 áp d映pi"m "vjw壱t CLEA là glucoamylase và pectinase, hai lo衣i enzyme có vai trò quan tr丑ng trong công ngh羽 th詠c ph育m.
1.3 Eƒe"8嘘k"v逢嬰ng liên quan trong nghiên c泳u
1.3.1 T鰻ng quan v隠 n医m m嘘c Aspergillus niger
1.3.1.1 Gi噂i thi羽u chung v隠 n医m m嘘c Aspergillus niger [26, 40]
Aspergillus niger là loài ph鰻 bi院n nh医t trong chi Aspergillus, phân b嘘 r瓜ng rãi
vt‒p"eƒe"e挨"ej医t t詠 nhiên, trong các s違n ph育m nông công nghi羽p và 荏 nhi隠u
x́pi"8鵜a lý khác nhau trên th院 gi噂i. Hi羽n nay, A. niger 8逢嬰c s穎 d映ng ch栄 y院u
trong công nghi羽p ch院 bi院n th詠c ph育m, công nghi羽p s違n xu医t m瓜t s嘘 acid h英u
e挨"pj逢"cekf citric hay acid gluconic, công nghi羽p s違n xu医t enzyme (bao g欝m
16 Hình 1.7: NＸm mぐc Aspergillus niger A. niger thu瓜c: Ngành: Amastigomycota Ngành ph映: Ascomycotina L噂p: Ascomycetes L噂p ph映: Plectomycetidae B瓜: Eurotiales H丑: Eurotiaceae Gi嘘ng: Aspergillus Loài: Aspergillus niger
1.3.1.2 A員e"8k吋m sinh lý
Aspergillus niger phân b嘘 nhi隠u trong t詠 pjk‒p."vtqpi"8医t, 荏 xác bã th詠c v壱t, hoa qu違x "8員c bi羽t là có nhi隠u 荏 vùng khí h壱u 医m áp.
Loài sinh v壱t này s嘘ng hi院u khí, s嘘ng ho衣i sinh ho員c ký sinh, không có kh違 p<pi"swcpi"j嬰p t衣o ch医t h英w"e挨"o "u嘘ng nh運 kh違 p<pi"j医p th映 các lo衣i ch医t h英w"e挨"e„"u印n qua b隠 m員t khu育n ty.
1.3.1.3 A員e"8k吋m sinh hóa
Có kh違 p<pi"8欝ng hóa các lo衣k"8逢運ng khác nhau: A. niger 8欝ng hóa t嘘t các lo衣k" 8逢運pi" pj逢" inwequg." htwevqug." uceejctqug." ocppqug0" A嘘i v噂k" 8逢運ng sorbose, galactose, A. niger 8欝ng hóa 荏 m泳c khá t嘘v." e”p" 8逢運ng lactose thì
8欝ng hóa 荏 m泳c trung bình.
Ngu欝p"fkpj"f逢叡ng nitrogen: A. niger có kh違 p<pi"u穎 d映ng urea làm ngu欝n N
17
CO2 và NH3. A. niger 8欝pi"j„c"8逢嬰c các mu嘘i amoni. Vi羽c s穎 d映ng ngu欝n N h英w"e挨."wtgc"x "eƒe"ow嘘k"coqpk"8隠u g逸n li隠n v噂i vi羽c tách NH3 ra r欝i h医p thu
x q"e挨"vj吋0"Pj逢"x壱y, NH3 là trung tâm c栄c"eqp"8逢運pi"fkpj"f逢叡ng N c栄a A. niger.
Kh違 p<pi"ukpj"v鰻ng h嬰p enzyme: A. niger có kh違 p<pi"ukpj"eƒe"gp¦{og"pj逢"
amylase, protease, pectinase và cellulase.
1.3.2 Enzyme glucoamylase
1.3.2.1 Gi噂i thi羽u chung v隠 glucoamylase [11]
Amylase là m瓜t h羽 enzyme r医t ph鰻 bi院n trong th院 gi噂i sinh v壱v."x "e pi"n "o瓜t trong s嘘 các h羽 gp¦{og"8逢嬰c 泳ng d映ng r瓜ng rãi trong công nghi羽p, y h丑c và nhi隠w" n pj" x詠c kinh t院 qu嘘c dân khác. Bao g欝m các lo衣k" pj逢" g-co{ncug." - amylase, glucoamylase, oligo-1,6-glucosidase, ...
Trong s嘘 nh英pi"gp¦{og"p {."inweqco{ncug"8逢嬰c các nhà khoa h丑c Nh壱t tách ra l亥p" 8亥u tiên t瑛 Aspergillus awamori0" Ucw" 8„" 8逢嬰c tìm th医y 荏 Rhizopus delemar, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae và các nhóm vi sinh v壱t khác
e pi"pj逢"荏o»"8瓜ng v壱t.
Glucoamylase t瑛 n医m m嘘c là các protein có kh嘘k" n逢嬰ng phân t穎 n逢嬰ng dao
8瓜ng r医t l噂n t瑛 27 222"8院n 112 000 Da, tu thu瓜c vào ngu欝n g嘘c c栄a enzyme.
E挨"ej院vƒe"8瓜ng c栄a glucoamylase [1]
Enzyme glucoamylase có kh違 p<pi"xúc tác th栄y phân m衣nh m胤 liên k院v"g-1,4
l磯p"g-1,6 glucoside c栄a phân t穎 tinh b瓜t. Enzyme glucoamylase xúc tác tách
tu亥n t詠 t瑛ng g嘘c glucose t瑛8亥u không kh穎 c栄a chu厩i polysaccharide.
18
Tính ch医t c栄a glucoamylase [11]
Glucoamylase là m瓜t exoenzyme, khi th栄y phân tinh b瓜t ngoài glucose còn có th吋 t衣o thành các oligosaccharide. Ngoài các liên k院v"g-1,4 v "g-1,6 glucoside, enzyme này còn có th吋 th栄y phân các liên k院v"g-3.4"x "g-1,3 glucoside.
Khi nghiên c泳w" eƒe" e挨" ej院 c栄a s詠 th栄y phân m瓜t s嘘 oligosaccharide và polysaccharide b茨ng glucoamylase c栄a n医m m嘘c, Backer và c瓜ng s詠 th医y r茨ng s詠 th栄y phân tinh b瓜v"8逢嬰c th詠c hi羽p"vjgq"e挨"ej院 Ð8c"o衣ejÑ0
Hình 1.9<"U￢"8げ thてy phân tinh bじt bぞi glucoamylase
Glucoamylase là enzyme ngo衣k"d q."8c"u嘘inweqco{ncug"8«"dk院v"8隠u thu瓜c lo衣i
gp¦{og" ÐcekfÑ. Glucoamylase 8逢嬰c thu nh壱n t瑛 các loài n医m m嘘e" pj逢"
Rhizopus delemar, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae.
Các y院u t嘘違pj"j逢荏pi"8院p"8瓜ng h丑c c栄a glucoamylase
Nhi羽v"8瓜: Nhi羽v"8瓜 là y院u t嘘 quan tr丑ng nh医t 違pj"j逢荏pi"8院n ho衣t tính xúc tác c栄a enzyme, enzyme glucoamylase ho衣v" 8瓜ng trong kho違ng 20OC Î 75OC. Nhi羽v"8瓜 t嘘k"逢w"ejq"jq衣v"8瓜ng c栄a enzyme glucoamylase là 40OC Î 65OC. pH: Kho違ng pH mà enzyme glucoamylase ho衣v"8瓜pi"8逢嬰c là t瑛 2 Î 8, pH t嘘i
逢w"n "6"- 5,5.
Các ch医t 泳c ch院: Enzyme glucoamylase s胤 泳c ch院 b荏i các ion kim lo衣k" pj逢"
Al3+, Hg2+, Pb2+, Ni2+, Cu2+.
Các ch医t hóa h丑c: Mjk"ejq"vj‒o"x q"o»k"vt逢運ng ph違n 泳pi"eƒe"fwpi"o»k"pj逢<"
chloroform, hexane, n Î dodecane v噂i n欝pi"8瓜 kho違ng 50% s胤 n o"v<pi"jq衣t tính glucoamylase lên 2 l亥n so v噂k"o»k"vt逢運ng ch雨 e„"p逢噂c là ch医t dung môi duy nh医t. Các ch医v" 4.4Ó" Î dipyridyl, iodoacetamide s胤 n o" v<pi" jq衣t tính enzyme glucoamylase. Tinh b瓜t hay oligosaccharide 100% glucose Tinh b瓜t hay oligosaccharide 80 Î 85% glucose + oligosaccharide Glucoamylase Glucoamylase Ki吋u Rh. delemar Ki吋u Asp. niger khác
19
1.3.2.2 永ng d映ng c栄a enzyme glucoamylase [11]
Vtqpi" ikck" 8q衣p" 8逢運ng hóa, glucoamylase chi院m v鵜 vt " 8亥w" x " 8„pi" xck" vt”"
quy院v"8鵜nh trong vi羽c chuy吋n hóa tinh b瓜t thànj"8逢運pi"8吋 lên men.Ni逢運i ta
vj逢運ng dùng h厩n h嬰r" ecpj" vt逢運ng b隠 m員t c栄a Aspergillus usamii và Aspergillus balatae trong s違n xu医v"t逢嬰u.
Inweqco{ncug" 8逢嬰c 泳ng d映pi" vtqpi" eƒe" sw{" vt·pj" 8逢運ng phân tinh b瓜t s違n xu医t glucose, 8吋 s穎 d映pi" vtqpi" eƒe" n pj" x詠c y h丑c, công nghi羽p th詠c ph育m. Trong công nghi羽r"f逢嬰c ph育o."gp¦{og"inweqco{ncug"e”p"8逢嬰c b鰻 sung vào m瓜t s嘘 lo衣i thu嘘e"v<pi"mj違p<pi"vk‒w"j„c"ejq"e挨"vj吋.
Ngày nay, enzyme này e”p"8逢嬰c s穎 d映ng k院t h嬰p v噂i các enzyme cellulase và protgcug"f逢噂i d衣pi"ecpj"vt逢運ng n医m m嘘c b鰻 sung vào trong th泳e"<p"ikc"u¿e." n o"v<pi"swƒ"vt·pj"8欝pi"j„c"ik¿r"ejq"ikc"u¿e"v<pi"vt丑pi"pjcpj"j挨p0
1.3.2.3 M瓜t s嘘 công trình nghiên c泳u v隠 enzyme glucoamylase c嘘8鵜nh
A«"e„"pjk隠u nghiên c泳u c栄a các nhà khoa h丑c v隠 sinh t鰻ng h嬰p glucoamylase
theo ph逢挨ng pháp nuôi c医y chìm và ph逢挨ng pháp nuôi c医y bán r逸n trên các ch栄ng n医m m嘘c khác nhau. P<o" 3;;9."J.M.Zaldivar-Aguero và c瓜ng s詠 8«"
nghiên c泳u s詠 違nh h逢荏ng c栄a phosphor trong quá trình sinh t鰻ng h嬰p glucoamylase c栄a Aspergillus a wamori theo ph逢挨ng pháp nuôi c医y b隠 sâu, k院t qu違 8衣v" 8逢嬰c ho衣v" v pj" gp¦{og" v<pi" v瑛 350U/l lên 1200U/l khi có b鰻 sung thêm phosphor. P<o" 4224." Ikram-ul-Haq và c瓜ng s詠 s穎 d映ng ch栄ng Aspergillus niger GCUCM-36 nuôi c医y trên môi tr逢運ng cám mì thu glucoamylase 8衣t ho衣t tính enzyme 1180U/g/phút sau 48h nuôi c医y [10].
雲 Vi羽v" Pco" e pi" e„" o瓜t s嘘 tác gi違 8«" e„" eƒe" pijk‒p" e泳u v隠 c嘘 8鵜nh glucoamylase. P<o"3;;7."Võ T医n Thi羽n 8« nghiên c泳u c嘘8鵜nh glucoamylase trên giá th吋 polyhydroxy ethyl methacrylat (PHEMA) b茨ng ph逢挨ng pháp polymer hóa b泳c x衣 荏 nhi羽v"8瓜 th医p. P<o"4229."vác gi違 Hoàng Bá Thanh H違i
8«"vk院n hành nghiên c泳u c嘘 8鵜nh glucoamylase trên các ch医t mang khác nhau
8衣t hi羽u su医t c嘘 8鵜nh 47,15% trên alginate canxi, 44,69% trên kaolin và 36,49% trên chitosan [5].
1.3.3 Enzyme pectinase
1.3.3.1 Gi噂i thi羽u chung v隠 pectinase [11]
Enzyme pectinase là enzyme xúc tác s詠 phân h栄y c栄a các polymer pectin. Vì v壱y, nh英ng enzyme này có m瓜t vai trò h院t s泳c quan tr丑ng trong quá trình b違o qu違n trái cây và rau qu違0"Gp¦{og"rgevkpcug"e pi"8逢嬰c 泳ng d映ng nhi隠u trong quá trình ch院 bi院n th詠c ph育o."8員c bi羽t là kh違 p<pi"n o"vtqpi"p逢噂c qu違. Vi羽c
20
ki吋m soát ho衣v" 8瓜ng c栄a enzyme pectipcug" e pi" e„" vj吋 8k隠u ch雨pj" 8逢嬰e" 8瓜
nh噂t c栄a s違n ph育m.Vì v壱y, pgevkpcug"8cpi"8逢嬰c 泳ng d映ng r瓜ng rãi trong công nghi羽p th詠c ph育o"x "f逢嬰c ph育m, nh医t là trong công nghi羽p s違n xu医t các lo衣i
p逢噂c ép trái cây.
E挨"ej院vƒe"8瓜ng c栄a pectinase [11]
Phá v叡 thành t院 bào: 雲 thành t院 bào th詠c v壱t có ch泳a r医t nhi隠u pectin, các ch医t
rgevkp"p {"8逢嬰e"zgo"pj逢"n "ej医t ciment g逸n các t院 bào l衣i v噂i nhau. Phá v叡 s詠
g逸n k院t này s胤 t衣q"8k隠u ki羽n cho các v壱t ch医t trong t院 bào thoát kh臼i t院 bào.
N o" vtqpi" p逢噂c qu違<" P逢噂c qu違 sau khi 8逢嬰c tách kh臼i t院 d q" vj逢運ng ch泳a nhi隠u ch医v" mjƒe" pjcw0" Vtqpi" 8„" ej医t pectin chi院o" n逢嬰pi" 8ƒpi" m吋 và pectin
vj逢運ng gây hi羽p"v逢嬰pi"8瓜 nh噂v"ecq"x "i¤{"8映e"p逢噂c qu違.
Trong ch院 bi院p" p逢噂c qu違 pi逢運k" vc" vj逢運ng s穎 d映ng các ch院 ph育m enzyme pectinase v噂i hai m映e"8 ej"e挨"d違n là phá v叡 thành t院 bào th詠c v壱t nh茨m nâng cao hi羽u su医v"vjw"p逢噂c qu違 và làm trong, 鰻p"8鵜nh ch医v"n逢嬰pi"p逢噂c qu違.
Phân lo衣i và tính ch医t c栄a pectinase [11]
Là nhóm enzyme xúc tác ph違n 泳ng phân c逸t pectin t衣o thành acid galacturonic, glucose, galactose, arabinose, methanol và m瓜t s嘘 s違n ph育m khác.
Î Pectinesterase (PE) hay pectinmethylesterase (PME): Xúc tác s詠 th栄y phân c栄c" eƒe" pj„o" ogvj{n" guvgt0" Gp¦{og" vj逢運ng t医n công vào các nhóm methyl ester c栄c"8挨p"x鵜 galacturonate n茨m k隠 8挨p"x鵜 không b鵜 ester hóa, phân c逸t các nhóm methoxy (COOCH3+"8泳ng c衣nh các nhóm ÎCOOH t詠 do, t衣o thành acid pectinic ho員c acid pectic và methanol.
Î Polygalacturonase (PG): Xúc tác s詠 th栄y phân các m嘘i liên k院v" g-1,4- glucoside. Các exo-PG phân c逸t t瑛 eƒe"8亥u không kh穎 và endo-PG t医n công ng磯u nhiên vào gi英a m衣ej"e挨"ej医t.
Î Ngoài ra còn có m瓜t s嘘 lo衣i rgevkpcug"pj逢<"Rgevkp"n{cug"*RN"jc{"RPN+"z¿e"vƒe"
s詠 phân c逸v"eƒe"8挨p"x鵜 icncevwtqpcvg"8«"d鵜 ester hóa, pectate lyase (PEL) xúc tác s詠 phân c逸v"eƒe"8挨p"x鵜 galacturonate không b鵜guvgt"j„c.È
21
Hình 1.10: Mô hình hoＴv"8じng cてa hう enzyme pectinase
Các y院u t嘘違pj"j逢荏pi"8院p"8瓜ng h丑c c栄a pectinase [11]
- pH: PE t瑛 vi sinh v壱t có pH t嘘i 逢u t瑛6.2"ejq"8院n 9,00"Vw{"pjk‒p."8嘘i v噂i các PE t瑛 n医m m嘘c, pH ho衣v"8瓜ng t嘘k"逢w"fcq"8瓜ng trong kho違ng h姻p t瑛 4,0 - 4,5. Còn PG ch栄 y院u b隠n 荏 pH t瑛 4,0 Î 6,0.
- Nhi羽v"8瓜: Nhi羽v"8瓜 t嘘k"逢w"ejq"jq衣v"8瓜ng c栄c"RG"fcq"8瓜ng trong kho違ng t瑛
30 Î 45OC, ph映 thu瓜c vào ngu欝n enzyme. M員c dù v壱{."vtqpi"8k隠u ki羽nthay
8鰻i áp su医t, nhi羽v"8瓜 t嘘k"逢w"ejq"jq衣v"8瓜ng c栄c"gp¦{og"e pi"vjc{"8鰻i. Nhi羽t
8瓜 t嘘k"逢w"e栄c"8c"u嘘 PG là kho違ng 40OC, 荏 nhi羽v"8瓜 này PG b隠n v英pi."pj逢pi"
s胤 b鵜 m医t ho衣t tính khi nhi羽v"8瓜v<pi"n‒p"72"Î 60OC.
1.3.3.2 永ng d映ng c栄a enzyme pectinase [22, 23, 50]
Trong nhi隠u th院 k益 qua, enzyme pectinase 8«"8逢嬰c s穎 d映ng trong nhi隠u lo衣i
th詠c ph育o"e pi"pj逢 các ngành công nghi羽p khác. Nhóm enzyme pectinase t瑛
vi sinh v壱t chi院m t益 tr丑ng t瑛35'"n‒p"8院n 25% trong s嘘 các enzyme th詠c ph育m tiêu th映 trên toàn c亥u.
Các 泳ng d映ng công nghi羽p l噂n nh医v" x " n¤w" 8運i nh医t c栄a enzyme pectinase