Đặc điểm
Hợp chất TI-F1A (14.8 mg) thu được từ phân đoạn TI-F1.1 (sơ đồ 2.3), có những đặc điểm như sau:
- Dạng bột màu vàng, tan trong dung môi acetone. TLC pha thường với hệ dung môi etyl acetate : acetone (9:1) thấy hiện vết tròn với Rf = 0,65 và hấp thu UV.
- Phổ 1H-NMR (acetone-d6, 500 MHz) ( phụ lục 1 ).
- Phổ 13C và DEPT-NMR (acetone-d6, 125 MHz) ( phụ lục 2, 3, 4 ). - Phổ COSY, HSQC, HMBC-NMR ( phụ lục 5,6).
Biện luận cấu trúc
Phổ 1H-NMR của hợp chất TI-F1A cho thấy tại vùng từ trường thấp xuất hiện các nhóm tín hiệu của hai vòng benzene. Nhóm tín hiệu δH 6,01 (1H; d; J= 3,0 Hz; H-8) và 5,91 (1H, d; J= 2,0 Hz; H-6) là của hai proton ghép cặp meta của vòng benzene A. Nhóm tín hiệu δH 7,04 (1H; d; J=2,0 Hz; H-2'); 6,78 (1H; dd; J= 8,5 & 2,0 Hz; H-5') và 6,83 (1H; d; J= 8,5 Hz; H-6') của ba proton vòng benzene có ba nhóm thế tương ứng với hệ ABX, đó là vòng benzene B. Ngoài ra, còn có tín hiệu hai proton methylene
δH 2,53 (1H; dd; J= 16,8 & 3,0 Hz; H-4a); 2,85 (1H; dd; J= 16,8 & 4,5 Hz, H-4b) và tín hiệu của hai proton oxymethine δH 4,87 (1H; d; J= 8,0 Hz; H-2); 4,2 (1H; m; H-3).
Phổ 13C và DEPT-NMR của hợp chất TI-F1A cho thấy có 15 tín hiệu carbon trong đó có 12 carbon thơm chia đều cho hai vòng benzene bao gồm 5 cacbon methine thơm, 3 cacbon thơm tứ cấp, 4 cacbon thơm tứ cấp gắn oxy, 2 cacbon của hai nhóm oxymethine δC 79,4 (C-2); 66,9 (C-3) và 1 cacbon của nhóm methylene δC 28,9 (C-4).
29
Từ những dữ kiện của phổ 13 C-NMR kết hợp kỹ thuật DEPT-NMR và phổ 1 H- NMR, chúng tôi dự đoán hợp chất TI-F1A có khung flavonoid
Phân tích phổ COS giúp xác nhận tương quan của H-3 với H-2 và H-4. Phổ HMBC cho biết H-3 có tương quan với δC 132,2 (C-1') của vòng B, δC 157,1 (C-4a) của vòng A và δC 79,4 (C-2) và δC 28,9 (C-4) của vòng C (hình 3.1).
Phân tích số liệu phổ của hợp chất TI-F1A, cho thấy cấu trúc khung sườn của TI- F1A là một flavan-3-ol với các nhóm thế hydroxyl lần lượt gắn tại các vị trí 5,7,3',4'. Bảng 3.1: Số liệu phổ của hợp chất TI-F1A so sánh với (-)-epicatechin(*)
Vị
trí Loại C
Hợp chất TI-F1A(acetone-d6) (-)- epicatechin (CD3OD) [62]
δH δC HMBC (1H13 C) δH δC 2 >CH-O- 4,87 s 79,4 3, 4, 1', 2', 6' 4,83 s 79,9 3 >CH-O- 4,20 m 66,9 2, 4, 1', 4a 4,19 m 67,5 4 -CH2- 2,85 dd (16,8 & 4,5) 2,53 dd (16,8 & 3,0) 28,9 2, 3, 4a, 5 2,86 dd (16,8& 4,8) 2,73 dd (16,8 & 2,7) 29,3 4a >C= 157,1 157,7 5 >C= 157,6 157,9 6 =CH- 5,91 d (2,5) 96,3 7, 8, 4a 5,93 d (2,3) 96,4 7 >C= 157,6 157,9 8 =CH- 6,01 d (2,5) 95,7 6, 8, 4a 5,96 d (2,3) 95,9 8a >C= 99,8 100,1 1' >C= 132,2 132,3 2' =CH- 7,04 d (1,5) 115,3 2, 1', 3', 4', 6' 6,99 d (1,7) 115,3 3' >C= 145,5 145,9 4' >C= 145,4 145,8 5' =CH- 6,78 d (8,0) 115,5 1', 3', 4' 6,77 d (8,2) 115,9 6' =CH- 6,83 dd (8,0& 1,5) 119,3 2, 2', 4' 6,81 dd (8,2 & 1,7) 119,4 (*): trị số trong ngoặc là J tính bằng Hz
Hình 3.1: Tương quan HMBC (mũi tên) và COS (kẻ đậm) trong hợp chất TI-F1A
30
So sánh tài liệu cho thấy, hợp chất TI-F1A có thể là (+)-catechin, (-)-epicatechin, (bảng 3.1).Tuy nhiên, khi so sánh hằng số ghép (J) của proton ở vị trí C-2 và C-3 của (+)-catechin và (-)-epicatechin cho thấy nếu là (+)-catechin thì J 7-8 Hz; nếu là (-)- epicatechin thì J 0 Hz (mũi đơn) [62]. Nhận thấy, proton ở vị trí C-2 của hợp chất
TI-F1A là mũi đơn (s) nên kết luận TI-F1A là (-)-epicatechin.