Một hỗn hợp của 64 (500mg; 1,78 mmol; 1 eq), các anhydride dicarboxylic tương ứng (1.2 eq), DMAP (4,47 mg; 0,89 mmol; 0,5 eq) trong CH2Cl2 (15 mL) được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 12 -15 giờ. Phản ứng được kiểm tra bằng TLC với hệ dung môi triển khai CH2Cl2: MeOH = 20: 1. Hỗn hợp phản ứng được pha loãng với CH2Cl2 (15mL) và chiết lần lượt với H2O, % HCl. Pha hữu cơ tách ra được làm khan với Na2SO4, bốc hơi dung môi dưới áp suất giảm. Các hợp chất 65a- e thu được bằng sắc ký cột silica gel sử dụng hệ dung môi MeOH (9,5: 0,5).
4-Oxo-4-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)amino)butanoic acid (65a)
Chất dầu, 80%; Rf = 0,48 (DCM: MeOH = 9,5: 0,5); IR (film, cm-1): 3291(OH, NH), 2927, 2865 (CH, CH2), 1695 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 6.59 (d, J = 9,5 Hz, 1H, NH); 5,42 (s, 1H, H-12); 5,34 (t, J = 10.5 Hz, 1H, H-10); 2,77-2,72 (m, 1H, H-2´); 2,68-2,62 (m, 1H, H-2´); 2,56(t, J = 6,5 Hz, 2H, H- 1´); 2,42-2,33 (m, 2H, Hα, H-9); 2,03-2,00 (m, 1H, H-β); 1,92-1,87 (m, 1H, H-8α); 1,78-1.71 (m, 1H, H-5α, H-8β); 1,62-1,58 (m, 1H, H-7β); 1,49-1,44 (m, 3H, H-6, H- 8a, H-5β); 1,41(s, 3H, H-14); 1,38-1,33 (m, 1H, H-5a); 1,05-1,00 (m, 1H, H-7α); 0,97 (d, J = 6,0 Hz, 3H, H-15); 0,85 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)) 172,1 (COOH); 171,1 (CONH); 104,5 (C-3); 91,7 (C-10); 80,5 (C- 12); 76,3 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,3 (C-6); 36,3 (C-4); 34,1 (C-7); 32,6 (C-2´); 30,9 (C-1´); 29,3 (C-9); 25,9 (C-14); 24,6 (C-5); 21,7 (C-8); 20,3 (C-15);
12,9 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 384.20313; lý thuyết C19H30NO7[M + H]+: 384.20223.
5-Oxo-5-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)amino)pentanoic acid (65b)
Chất dầu, 78%, oil; Rf = 0,50 (DCM: MeOH = 10: 0,5); IR (film, cm-1): 3298(OH, NH), 2929, 2866 (CH, CH2), 1705 (C=O). 1NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm)): 6,81 (m, 1H, -NH); 5,42 (s, 1H, H-12); 5,36 (t, J = 10,5 Hz, 1H, H-10); 2,43-2,37 (m, 4H, H-9, H-4α, H-3´´); 2,35-2,30 (m, 2H, H-1´´); 2,05-2,00 (m, 1H, H-4β); 2,01-1,95 (m, 2H, H-2´´), 1,91-1,87 (m, 2H, H-8α, H-5α); 1,78-1,71 (m, 1H, H-8β); 1,62-1,57 (m, 1H, H-7β); 1,52-1,42 (m, 2H, H-8a, H-5β); 1,40 (s, 3H, H-14); 1,38-1,33 (m, 1H, H-6); 1,30-1,24 (m, 1H, H-5a); 1,05-1,00 (m, 1H, H-7α); 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,85 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm)): 176,2 (COOH); 172,8 (CON); 104,5 (C-3); 91,8 (C-10); 80,6 (C-12); 76,2 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,3 (C-1´´); 36,3 (C-6); 35,3 (C-4); 34,1 (C-7); 32,6 (C-3´´); 30,9 (C-9); 25,9 (C-14); 24,6 (C-5); 21,3 (C-8); 20,4 (C-2´´); 20,3 (C- 15); 13,1 (C-16). ESI-HRMS tím thấy: 392.21749; lý thuyết: C20H32NO7[M + H]+: 392.21788.
3,3-Dimethyl-5-oxo-5-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)- 3,6,9- trimethyldecahydro-3H-3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-
Chất dầu, 84%; Rf = 0,52 (DCM: MeOH = 10: 0,5); IR (film, cm-1): 3302 (OH, NH), 2937, 2885 (CH, CH2), 1717 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3; δ (ppm)): 6,74 (d, J = 9,5 Hz, 1H, -NH); 5,43 (s, 1H, H-12); 5,36 (t, J = 10,0 Hz, 1H, H-10); 2,51 (d, J = 13,0 Hz, 1H, H-3´); 2,45-2,34 (m, 4H, H-1´, H-9, H-4α); 2,29 (d, J = 13,5 Hz, 1H, H-3´); 2,07-2,02 (m, 1H, H-4β); 1,94-1,89 (m, 1H, H-8α); 1,91- 1,88 (m, 1H, H-5α); 1,82-1,74 (m, 2H, H-8β); 1,65-1,61 (m, 1H, H-7β); 1,54-1,45 (m, 2H, H-8a, H-5β); 1,42 (s, 3H, CH3, H-14); 1,38-1,35 (m, 1H, H-5a); 1,32-1,26 (m, 1H, H-6); 1,17 (s, 3H, CH3); 1,13 (s, 3H, CH3), 1,08-1,0 (m, 1H, H-7α); 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,89 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm)): 173,3 (COOH); 173,2 (CON); 104,4 (C-3); 91,7 (C-10); 80,3 (C-12); 76,4 (C-12a); 51,7 (C-5a); 47,2 (C-1´); 46,4 (C-3´); 45,5 (C-8a); 37,3 (C- 6); 36,2 (C-4); 34,0 (C-7); 32,4 (C-2´); 29,2 (C-9); 29,1 (2CH3); 25,9 (C-14); 24,6 (C-5); 21,6 (C- 8); 20,2 (C-15); 13,1(C-16). ESI-HRMS Tìm thấy: 426.24910; lý thuyết: C22H36NO7[M + H]+: 426.24918.
(Z)-4-Oxo-4-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)amino)but-2-enoic acid (65d)
Chất dầu, 86%; Rf = 0,49 (DCM: MeOH = 10: 0,5); IR (film, cm-1): 3301(OH, NH), 2937, 2884 (CH, CH2), 1697 (C=O), 1562 (C=C). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ (ppm)): 11,20 (s, 1H, OH); 9,31 (d, J = 9,0 Hz, 1H, NH); 6,32 (d, J = 12,0 Hz, 1H, H-1´); 6,30 (d, J = 12,0 Hz, 1H, H-2´); 5,46 (s, 1H, H-12); 5,13 (t, J = 9,5 Hz, 1H, H-10); 2,35-2,30 (m, 1H, H-9); 2,21-2,15 (dt, J= 8,5Hz, 14,0 Hz, 1H, H-4α); 2,00-1,97 (m, 1H, H-4β); 1,83-1,79 (m, 1H, H-8α); 1,64-1,61(m, 2H, H- 5α, H-8β); 1,55-1,46 (m, 2H, H-8a, H-5β); 1,41-1,38 (m, 1H, H-7β); 1,36-1,30 (m, 1H, H-6); 1,27 (s, 3H, H-14); 1,20-1,14 (m, 1H, H-5a), 0.99-0.93 (m, 1H, H-7α); 0,90 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,75 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ (ppm)): 166,5 (COOH); 164,6 (CON); 132,4 (C-2´); 130,0 (C-1´); 103,4 (C-3); 90,4 (C-10); 80,0 (C-12); 75,5 (C-12a); 51,4 (C-5a); 45,0 (C-8a); 39,0 (C-6); 36,1 (C-4); 35,9 (C-7); 31,5 (C-9); 25,6 (C-14); 24,3 (C-5); 20,8 (C-8); 20,1 (C-15); 12,7 (C- 16). ESI-HRMS tìm thấy: 382.1848; lý thuyết: C19H28NO7 [M +H]+: 382.18658.
2-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)carbamoyl)benzoic acid (65e)
Chất dầu, 70%; Rf = 0,53 (DCM: MeOH = 12: 0,5); IR (film, cm-1): 3281(OH, NH), 2926, 2855 (CH, CH2), 1684 (C=O), 1577 (C=C). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)) 9,6 (s, 1H); 7,71 (m, 1H, H-2´); 7,54-7,45 (m, 3H, H-3´, H-4´, H-5´); 5,46 (s, 1H, H-12); 5,25(t, J = 9,5 Hz, 1H, H-10); 2,40-2,36 (m, 1H, H- 9); 2,22-2,16 (td, J = 4,0 Hz, 14,0 Hz, 1H, H-4α); 2,01-1,98 (m, 1H, H-4β); 1,85- 1,79 (m, 1H, H-8α); 1,66-1,60 (m, 3H, H-5α, H-8β, H-7β); 1,41-1,29 (m, 6H, H-5β, H-6, H-8a, H-14); 1,19-1,16 (m, 1H, H-5a); 0,99-0,95 (m, 1H, H-7α); 0,91 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,82 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6),
δ (ppm)): 168,2 (COOH, CON); 129,7 (C-1´); 129,3 (C-6´); 127,9 (C-3´); 126,8 (C- 4´); 126,4 (C-2´); 125,2 (C-5´); 103,3(C-3); 90,7 (C-10); 80,1 (C-12); 75,6 (C-12a); 51,5 (C-5a); 45,5 (C-8a); 36,2 (C-6); 36,0 (C-4); 33,8 (C-7); 31,4 (C-9); 25,6 (C- 14); 24,3 (C-5); 20,9 (C-8); 20,1 (C-15); 12,9 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 432.20211; lý thuyết: C23H30NO7[M+ H]+: 432.20223. 3.2.3. Tổng hợp chất 65f, g
Một hỗn hợp của 10β-aminoartemisinin (64) (500 mg; 1,78mmol; 1 eq), mono methyl adipate hoặc suberic acid monomethyl ester (1,2 eq) và DMAP (104,47 mg; 0,89 mmol; 0,5 eq) trong CH2Cl2 (15 mL) được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 12 giờ. Kiểm tra phản ứng bằng TLC hệ dung môi CH2Cl2: MeOH = 30:1). Hỗn hợp phản ứng được pha loãng với CH2Cl2 (15mL), chiết với H2O (2×10 mL). Pha hữu cơ được tách ra, làm khan với Na2SO4, cô dung môi dưới áp suất giảm. Cặn phản ứng sau đó được thủy phân trong hỗn hợp dung môi CH2Cl2: MeOH = 9: 1 sử dụng NaOH 0.2N % trong EtOH) trong 20 giờ. Hỗn hợp thủy phân sau đó được pha loãng bằng CH2Cl2 (15 mL) và chiết với H2O (2× 15 mL). Pha nước được gom lại, axit hóa đến pH = 3 bằng 0.2 N HCl, chiết với CH2Cl2 (3×15 mL). Pha hữu cơ được tách ra, làm khan bằng bằng Na2SO4. Chất 64f, g thu được bằng sắc ký cột silica gel sử dụng hệ dung môi CH2Cl2: MeOH.
6-Oxo-6-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)amino)hexanoic acid (65f):
Chất dầu, 74%; Rf = 0,51 (DCM: MeOH = 15: 0,5); IR (film, cm-1): 3320 (OH, NH), 2939, 2845 (CH, CH2), 1688 (C=O). 1HNMR (500 MHz, DMSO-
d6, δ (ppm)): 11,8 (s, 1H, OH); 8,51(d, J = 9,5 Hz, 1H, NH); 5,40 (s, 1H, H-12); 5,07 (t, J = 9,5 Hz, 1H, H-10); 2.27-2.26 (m, 1H, H-9); 2,21-2,17 (m, 3H, H-4α, H- 4´); 2,14-2,10 (m, 2H, H-1´); 1,99-1,96 (m, 1H, H-4β); 1,82-1,78 (m, 3H, H-8α, H- 5α, H-8β); 1,63-1,60 (m, 2H, H-7β); 1,53-1,38 (m, 6H, H-2´, H-3´, H-8a, H-5β);
1,35-1,30 (m, 1H, H-6); 1,26 (s, 3H, H-14); 1,18-1,22 (m, 1H, H-5a); 0,97-0,92 (m, 1H, H-7α); 0,89 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,71 (d, J = 7,50 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6. δ (ppm)): 174,4 (COOH); 172,2 (CON); 103,3 (C-3); 90,6 (C-10); 80,1 (C-12); 75,2 (C-12a); 51,4 (C-5a); 45,1(C-8a); 36,1 (C-6); 36,0 (C-1); 35,0 (C-4); 33,7 (C-7); 33,5(C-4); 31,4 (C-9); 25,6 (C-14); 24,6 (C-2); 24,3 (C-3); 24,1(C-5); 20,9 (C-8); 20,1 (C-15); 12,9 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 412.23351; lý thuyết: C21H34NO7[M + H]+: 412.23353.
8-Oxo-8-(((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)amino)octanoic acid (65g):
Chất dầu, 80%, Rf = 0,53 (DCM: MeOH = 15: 0,5); IR (film, cm-1): 3299 (OH, NH), 2921, 2868 (CH, CH2), 1699 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ (ppm)): 11,9 (s, 1H, OH); 8,49 (d, J = 9,0 Hz, 1H, NH); 5,40 (s, 1H, H-12); 5,08 (t, J = 4,0 Hz, 1H, H-10); 2,31-2,26 (m, 1H, H-9); 2,16-2,12 (m, 3H, H-6´, H-4α); 2,09-2,05 (m, 1H, H-4β); 1,99-1,96 (m, 4H, H-8α, H-5α, H-1´); 1,82-1,78 (m, 1H, H-8β); 1,63-1,60 (m, 1H, H-7β); 1,51-1,43 (m, 6H, H-2´, H-5´, H-8a, H-5β); 1,38- 1,31 (m, 1H, H-6); 1,26-1,23 (m, 7H, H-3´, H-4´, H-14); 1,18-1,12(m, 1H, H-5a); 0.80-0.92 (m, 1H, H-7α); 0,89 (d, J = 6,0 Hz, 3H, H-15); 0,71 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H- 16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 174,5 (COOH); 172,3 (CON); 103,3 (C-3); 90,6 (C-10); 80,1 (C-12); 75,1 (C-12a); 51,4 (C-5a); 45,1 (C-8a); 36,1 (C-1); 36,0 (C-6); 35,3 (C-4); 33,7 (C-7); 33,6 (C-6); 31,6 (C-9); 28,3 (C-3, C-4); 25,6 (C- 14); 24,9 (C-2); 24,4 (C-5); 24,3 (C-8); 24,2 (C-5); 20,1 (C-15); 12,9 (C-16). ESI- HRMS tìm thấy: 440.26478; lý thuyết C23H38NO7 [M + H]+: 440.26426.
Quy trình chung tổng hợp 66a-g
Một hỗn hợp của 10β-aminoartemisinin (250mg; 0,89 mmol, 1 eq) và axit tương ứng 65a-g (1,1eq), DMAP (22,4 mg; 0,445 mmol; 0,5 eq), EDC (217 mg; 1,1
eq) trong CH2Cl2 (15 mL) được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 20 giờ. Kiểm tra tiến trình phản ứng bằng TLC hệ dung môi triển khai (CH2Cl2: MeOH = 30:1). Hỗn hợp phản ứng sau đó được pha với CH2Cl2 (15 mL), chiết lần lượt với H2O, 5% HCl. Pha hữu cơ được tách ra, làm khan bằng Na2SO4. Bốc hơi dung môi dưới áp suất giảm thu được các cặn phản ứng. Các sản phẩm 66a-g thu được nhờ sắc ký cột silica gel.
Sơ đồ 19. Tổng hợp các dimer artemisinin 66a-g
(i) 7, EDC.HCl, DMAP, CH2Cl2, nhiệt độ phòng, 20 giờ, 68-76%.
N1, N4-Bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)succinamide (66a) Chất bột trắng, 71%, Rf = 0,51 (DCM: MeOH = 25: 0,5); IR (film, cm-1): 3289 (NH), 2922, 2868 (CH, CH2), 1675 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 6,66 (d, J= 9,50 Hz, 2H, NH); 5,41 (s, 2H, H-12); 5,31 (t, J = 10,0 Hz, 2H, H-10); 2,68-2,64 (m, 2H, H-9); 2,52-2,48 (m, 2H, H-4α); 2,41-2,32 (m, 4H, H-1´, H-2´); 2.03-1.99 (m, 2H, H-4β); 1,90-1,86 (m, 2H, H-8α, H-5α); 1,75-1,70 (m, 2H, H-8β); 1,60-1,56 (m, 2H, H-7β); 1,51-1,43 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,41 (s, 6H, 2CH3,
H-14); 1,37-1,33 (m, 2H, H-6), 1.28-1.22 (m, 2H, H-5a); 1,04-0,99 (m, 2H, H-7α); 0,96 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,82 (d, J = 7,5 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 172,0 (CON); 104,3 (C-4); 91,6 (C-10); 80,4 (C-12); 76,1 (C-12a); 53,5 (C-5a); 45,6(C-8a); 37,3 (C-6); 36,3(C-4); 34,1 (C-7); 32,5 (C-1´, C-2´); 31,3 (C-9); 26,1 (C-14); 24,7 (C-5); 24,4 (C-8); 20,3 (C-15); 13,0 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 649.37114; lý thuyết: C34H53N2O10 [M + H]+: 649.37002. N1, N5-Bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)glutaramide (66b) Chất rắn, 69%, Rf= 0,52 (DCM: MeOH = 30: 0,5); IR (film, cm-1): 3335 (NH), 2918, 2878 (CH, CH2), 1679 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 6,50 (d, J = 10,0 Hz, 2H, NH); 5,41 (s, 2H, H-12); 5,34 (t, J = 10,5 Hz, 2H, H-10); 2,68-2,66 (m, 2H, H-9); 2,44-2,41 (m, 2H, H-4), 2.40-2.33 (m, 4H, H-1´, H-3´), 2.31-2.29 (m, 4H, H-4α); 2,04-1,99 (m, 4H, H-2´); 1,91-1,86 (m, 2H, H-8α, H-5α); 1,78-1,71 (m, 2H, H-8β); 1,62-1,58 (m, 2H, H-7β); 1,53-1,43 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,41 (m, 6H, 2CH3, H-14); 1,38-1,32 (m, 2H, H-6); 1,30-1,24 (m, 2H, H-5a); 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,90-0,86 (m, 2H, H-7α); 0,84 (d, J = 7,5 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 172,9 (CON); 104,3 (C-3); 91,6 (C-10); 80,5 (C-12); 76,2 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,3 (C-6); 36,3 (C-4); 35,2 (C-1´, C-3´); 34,1 (C-7); 32,3 (C-9); 26,1 (C-14); 24,7 (C-5); 24,3 (C-8); 21,7 (C-2´); 20,3 (C-15); 13,2 (C-16). ESIHRMS tìm thấy: 663.38517; lý thuyết: C35H55N2O[M + H]+: 663.38567.
3,3-Dimethyl-N1, N5-bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9- trimethyldecahydro-3H-3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-
Chất rắn, 68%, Rf= 0,54 (DCM: MeOH = 30: 0,5); IR (film, cm-1): 3346 (NH), 2918, 2868 (CH, CH2), 1689 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 7,0 (d, J = 9,5 Hz, 2H, NH); 5,40 (s, 2H, H-12); 5,32 (t, J = 10,0 Hz, 2H, H-10); 2.43-2.31 (m, 4H, H-9, H-4α); 2,25 (d, J = 13,5 Hz, 2H, H-?); 2,03-1,98 (m, 2H, H- 4), 1.90-1.84 (m, 4H, H-8α, H-5α); 1,80-1,70 (br, 4H, H-1´, H-3´); 1,60-1,56 (m, 2H, H-7β); 1,53-1,44 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,40 (s, 6H, 2CH3, H-14); 1,38-1,32 (m, 2H, H-6); 1,28-1,22 (m, 2H, H-5a); 1,11 (s, 6H, 2CH3, H-4´); 1,05-0,98 (m, 2H, H- 7α); 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,85 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13 C NMR (125 MHz, CDCl3, δ(ppm)): 172,0 (CON); 104,2 (C-3); 91,5 (C-10); 80,3 (C-12); 76,0 (C-12a); 51,8 (C-5a); 47,1 (C-1´, C-3´); 45,7 (C-8a); 37,3 (C-6); 36,3 (C-4); 34,1 (C-7); 33,9 (C-2´); 32,3 (C-9); 26,3 (C-4´); 26,0 (C-14); 24,7 (C-5); 21,7 (C-8); 20,3 (C-15); 13,3 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 691.41608; lý thuyết: C37H59N2O10 [M + H]+: 691.41697.
N1, N4-Bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)maleamide (66d)
(NH), 2938, 2869 (CH, CH2), 1685 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ(ppm)): 7,22 (d, J = 9,5 Hz, 2H, NH); 6,99 (s, 2H, H-1´, H-2´); 5,49 (s, 2H, H-12); 5,41 (t, J = 10,0 Hz, 2H, H-10); 2,51-2,47 (m, 2H, H-9); 2,39-2,32 (m, 2H, H-4α); 2,02 (m, 2H, H-4β); 1,91-1,86 (m, 4H, H-8α, H-5α); 1,78-1,72 (m, 2H, H-8β); 1,64-1,59 (m, 2H, H-7β); 1,55-1,44 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,41 (s, 6H, 2CH3, H-14); 1,30-1,25 (m, 4H, H-6, H-5a); 1.06-1.0 (m, 2H, H-7α); 0,97(d, J = 6,0 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,87 (d, J = 7,0 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 164,3 (CON); 133,7 (C-1´, C-2´); 104,5 (C-3); 91,7 (C-10); 80,5 (C-12); 76,4 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,2 (C-6); 36,3 (C-4); 34,1 (C-7); 32,5 (C-9); 26,0 (C- 14); 24,6 (C-5); 21,6 (C-8); 20,3 (C-15); 13,0 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 647.35146; lý thuyết: C34H51N2O10 [M + H]+: 647.35437. N1, N2-Bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)phthalamide (66e)
Chất rắn (foam) 69%, Rf= 0,53 (DCM: MeOH = 30: 0,5); IR (film, cm- 1): 3346 (NH), 2918, 2865 (CH, CH2), 1688 (C=O), 1571 (C=C). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 7,86 (m, 2H, H-2´, H-5´); 7,74 (m, 2H, H-3´, H-4´); 5,48 (s, 2H, H-12); 5,41 (t, J = 10,0 Hz, 2H, H-10); 2,44-2,38 (m, 2H, H-9); 2,05-2,00 (m, 2H, H-4β); 1,93-1,88 (m, 4H, H-8α, H-5α); 1,79-1,72 (m, 2H, H-8β); 1,63-1,60 (m,
2H, H-7β); 1,55-1,47 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,40 (s, 6H, 2CH3, H-14); 1,38-1,24 (m, 4H, H-6, H-5a); 1,11-1,03 (m, 2H, H-7α); 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,87 (d, J = 7,0 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 167,9 (CON); 134,3 (C-1´, C-6´); 132,2 (C-3´, C-4´); 123,6 (C-2´,C-5´); 104,5 (C-3); 92,2 (C-10); 79,9 (C-12); 76,8 (C-12a); 51,8 (C-5a); 45,7 (C-8a); 37,3 (C-6); 36,3 (C-4); 34,7 (C-7); 27,8 (C-9); 25,9 (C-14); 24,7 (C-5); 20,9 (C-8); 20,3 (C-15); 12,7 (C- 16). ESI-HRMS tìm thấy: 697.36947; lý thuyết: C38H53N2O10[M + H]+: 697.37002.
N1, N6-Bis ((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)adipamide(66f)
Chất rắn (foam), 74%; Rf = 0,55 (DCM: MeOH = 30: 0,5); IR (film, cm-1): 3331 (NH), 2923, 2865 (CH, CH2), 1677 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 6.52 (d, J = 9,5 Hz, 2H, NH); 5,42 (s, 2H, H-12); 5,34 (t, J = 10,5 Hz, 2H, H-10); 2,41-2,32 (m, 2H, H-9); 2,28-2,24 (br, 4H, H-1´,H-4´); 2,02-2,00 (m, 2H, H- 4β); 1,90-1,86 (m, 4H, H-8α, H-5α); 1,77-1,66 (m, 6H, H-8β, H-2´, H-3´); 1,61-1,57 (m, 2H, H-7β); 1,50-1,45 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,41 (s, 6H, 2CH3, H-14); 1,38-1,36 (m, 2H, H-6); 1,29-1,25 (m, 2H, H-5a); 1,03-1,0 (m, 2H, H-7α); 0,97 (d, J = 6,5 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,84 (d, J = 7,0 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm): 172,9 (CON); 104,3 (C-3); 91,6 (C-10); 80,5 (C-12); 76,0 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,2 (C-6); 36,3 (C-4); 36,1 (C-1´, C-4´); 34,0 (C-7); 27,9 (C-9); 26,4 (C-2´, C-3´); 26,0 (C-14); 24,8 (C-5); 21,6 (C-8); 20,2 (C-15); 13,1 (C- 16). ESI HRMS tìm thấy: 677.40113; lý thuyết: C36H57N2O10[M + H]+: 677.40132.
N1,N8-Bis((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)-octanediamide (66g)
Chất rắn (foam), 76%, Rf = 0,57 (DCM: MeOH = 30: 0,5); IR (film, cm-1): 3329 (NH), 2919, 2866 (CH, CH2), 1669 (C=O). 1H NMR (500 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 6,42 (d, J = 10,5 Hz, 2H, NH); 5,42 (s, 2H, H-12); 5,38 (t, J = 10,5 Hz, 2H, H-10); 2,42-2,32 (m, 2H, H-9); 2,28-2,18 ((br, 4H, H-1´, H-6´); 2,02 (m, 2H, H-4β); 1,91-1,87 (m, 4H, H-8α, H-5α); 1,78-1,71 (m, 2H, H-8β); 1,64-1,57 (m, 6H, H-7β, H-2´, H-4´); 1,52-1,45 (m, 4H, H-8a, H-5β); 1,41 (s, 6H, 2CH3, H-14); 1,36-1,34 (m, 6H, H-6, H-3´, H-4´); 1,29-1,23 (m, 2H, H-5a), 1.03-1.00 (m, 2H, H-7α); 0,97 (d, J = 6,0 Hz, 6H, 2CH3, H-15); 0,85 (d, J = 7,0 Hz, 6H, 2CH3, H-16). 13C NMR (125 MHz, CDCl3, δ (ppm)): 173,2 (CON); 104,3 (C-3); 91,7 (C-10); 80,5 (C-12); 75,9 (C-12a); 51,7 (C-5a); 45,6 (C-8a); 37,3 (C-6); 36,4 (C-4); 36,2 (C-1´, C-6´); 34,0 (C-7); 27,7 (C-9); 28,6 (C-3´, C-4´); 26,0 (C-14); 24,9 (C-2´, C-5´, C-5); 21,7 (C-8); 20,2 (C-15); 13,1 (C-16). ESI-HRMS tìm thấy: 705.43267; lý thuyết: C38H61N2O10[M + H]+: 705.43262.
3.4. Tổng hợp các dẫn xuất artemisinin chứa nhóm axit hydroxamic (67a-g)
Quy trình chung
Một hỗn hợp của NH2O-THP (60 mg; 1eq; 0,51 mmol), 65a-g (1,0 eq), EDC.HCl (97,0 mg; 0,51 mmol; 1 eq), DMAP (30,5 mg; 0,25 mmol; 0,5 eq) trong CH2Cl2 (15 mL) được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 6 giờ. Kiểm tra tiến trình phản ứng bằng TLC hệ dung môi CH2Cl2: MeOH = 30: 1. Phản ứng sau đó được pha loãng với CH2Cl2 (15 mL), chiết với H2O. Pha hữu cơ được tách ra, làm khan bằng Na2SO4, bốc hơi dung môi dưới áp suất giảm thu được cặn tương ứng. Cặn sau đó được hòa trong EtOH (5 mL), làm lạnh bằng nước đá. Nhỏ vào hỗn hợp 2 giọt benzoylchloride và khuấy tiếp 3 giờ. Hỗn hợp phản ứng sau đó được pha loãng với
H2O (10 mL), chiết với CH2Cl2 (2×15 mL). Pha hữu cơ được tách ra, làm khan với Na2SO4, bốc hơi dung môi dưới áp suất giảm thu được cặn phản ứng. Cặn sau đó được tách bằng cột silica gel, hệ dung môi CH2Cl2: MeOH (10:1) cho 67a-g.
Sơ đồ 20. Tổng hợp các dẫn xuất artemisinin chứa nhóm hydroxamic axit
(i) (CH3)3SiCl, NaN3, KI, CH2Cl2, 0 C, 2.5 giờ, 45%; (ii) Ph3P, THF/H2O (1:1), 65 oC, 8 giờ, 81%; (iii) succinic anhydride, glutaric anhydride, 3,3- dimethylglutaric anhydride, maleic anhydride, naphthalic anhydride, EDC.HCl, DMAP, CH2Cl2, nhiệt độ phòng, 12–15 giờ, 70–86%; (iv) adipic acid monomethyl ester, suberic acid monomethyl ester, EDC.HCl, DMAP, CH2Cl2, rt, 12-15 giờ; (v) NaOH 0.2 N trong MeOH, CH2Cl2: MeOH (9: 1), 20 giờ, 74-80% (2 bước); vi) O- (tetrahydro-2H-pyran-2-yl)hydroxylamine (H2N-O-THP), EDC.HCl, DMAP, CH2Cl2, 6 giờ; vii) EtOH, benzoylchloride (2 giọt), 3 giờ, 35–50% (hai bước).
N1-hydroxy-N4-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)succinamid (67a).
Chất dầu, 35%, IR (film, cm-1): 3261 (OH), 3055 (NH), 2927, 2865 (CH, CH2), 1650, 1629 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 8,61 (d, J = 9,0 Hz, 1H, NH); 5,40 (s, 1H, H-12); 5,06 (t, J = 10,0 Hz, H-10); 2,42–2,39 (t, J = 7,0 Hz, 2H); 2,30–2,36 (m, 1H); 2,20–2,14 (td, J = 3,5 Hz, 14,0 Hz, 1H); 1,98 (m, 3H); 1,81–1,78 (m, 1H); 1,63–1,60 (m, 1H); 1,52–1,39 (m, 3H); 1,38–1,29 (m, 1H); 1,27 (s, 3H, H-14); 0,99–0,94 (m, 1H); 0,88 (d, J = 6,5 Hz, 1H, H-15); 0,71 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 172,7; 171,2; 104,3; 91,6; 80,4; 76,0; 51,7; 45,6; 37,3; 36,3; 34,0; 32,8; 31,2; 29,4; 26,0; 24,6; 22,7; 20,2; 12,9. ESI-HRMS tìm thấy: 399.21311; lý thuyết: C19H31N2O7 [M+H]+: 399.21258.
N1-hydroxy-N5-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)-3,6,9- trimethyldecahydro-3H-3,12- epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)glutaramide (67b).
Chất dầu, 45%, IR (film, cm-1): 3267 (OH), 3059 (NH), 2921, 2876 (CH, CH2), 1670, 1639 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 8,54 (d, J = 9,0 Hz, 1H, NH); 5,41 (s, 1H, H-12); 5,08 (t, J = 10,0 Hz, H-10); 2,30–2,35 (m, 3H); 2,19– 2,11 (m, 3H); 2,0–1,97 (m, 1H); 1,82–1,67 (m, 4H); 1,63–1,57 (m, 1H); 1,52–
1,44 (m, 4H); 1,27–1,23 (m, 4H); 0,89 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,85–0,82 (m, 1H); 0,73 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ(ppm)): 172,7; 171,1; 104,3; 91,7; 80,4; 76,0; 51,7; 45,6; 37,3; 36,2; 34,1; 32,8; 31,2; 29,3; 26,0; 24,6; 23,6; 21,6; 20,2; 12,9. ESI-HRMS tìm thấy: 413.22876; lý thuyết: C20H33N2O7 [M+H]+: 413.22823.
N1-hydroxy-3,3-dimethyl-N5-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)- 3,6,9-
trimethyldecahydro-3H-3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10- yl)pentanediamide (67c).
Chất dầu, 45%, IR (film, cm-1): 3227 (OH), 3046 (NH), 2929, 2879 (CH, CH2), 1679, 1628 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 10,41 (s, 1H, NH); 8,73 (s, 1H, OH); 8,63 (d, J = 9,0 Hz, 1H, NH); 5,39 (s, 1H, H-12); 5,08 (t, J = 10,0 Hz, 1H, H-10); 2,29–2,27 (m, 1H); 2,20–2,12 (m, 3H); 2,04–1,97 (m, 3H); 1,82–1,78 (m, 1H); 1,62–1,60 (m, 2H); 1,52–1,37 (m, 3H); 1,36–1,30 (m, 1H); 1,26 (s, 3H, H-14); 1,18–1,12 (m, 1H); 0,99 (m, 6H, 2CH3); 0,90 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H- 15); 0,83–0,76 (m, 1H); 0,73 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 171,0; 167,7; 103,3; 90,6; 80,1; 75,0; 51,4; 46,9; 45,2; 43,6; 36,2; 36,0; 33,7; 32,9; 31,2; 30,6; 25,6; 24,3; 23,6; 20,8; 13,0. ESI-HRMS tìm thấy: 441.26006; lý thuyết: C22H37N2O7 [M+H]+: 441.25953.
N1-hydroxy-N4-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)maleamide (67d).
Chất dầu, 50%, IR (film, cm-1): 3278 (OH),3049 (NH), 2922, 2878 (CH, CH2), 1669, 1637 (C=O), 1579 (C=C). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 6,95 (d, J = 15,5 Hz, 1H); 6,85(d, J = 15,5 Hz, 1H); 6,53 (d, J = 9,5 Hz, 1H, NH); 5,45–5,41 (m, 2H, H-12, H-10); 2,45–2,42 (m, 1H); 2,37–2,33 (m, 1H); 2,05–2,01 (m, 1H); 1,92–1,88 (m, 1H); 1,80–1,73 (m, 1H); 1,66–1,60 (m, 1H); 1,54–1,46 (m, 4H); 1,41 (s, 3H, H-14); 1,29–1,26 (m, 1H); 1,06–1,02 (m, 1H); 0,98 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,86 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 165,4; 163,3; 135,9; 131,4; 104,4; 91,7; 80,4; 76,3; 51,7; 45,6; 37,3; 36,3; 34,0; 32,8; 25,9; 24,6; 23,7; 20,2; 12,9. ESI-HRMS tìm thấy: 397.19746; lý thuyết: C19H29N2O7 [M+H]+: 347.19693. N1-hydroxy-N2-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)phthalamide (67e). Chất rắn, 44%, đnc 173oC; IR (KBr, cm-1): 3264 (OH), 3039 (NH), 2931, 2877 (CH, CH2), 1676, 1629 (C=O), 1549 (C=C). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 7,96–7,88 (m, 4H, H-Ar); 5,59 (s, 1H, H-12); 5,37 (d, J = 11,0 Hz, 1H, H- 10); 3,54–3,49 (m, 1H); 2,24–2,17 (td, J = 4,0 Hz, 14,0 Hz, 1H); 2,0–1,97 (m, 1H);
1,84–1,80 (m, 1H); 1,67–1,61 (m, 3H); 1,50–1,46 (m, 1H); 1,36–1,29 (m, 2H); 1,24–1,18 (m, 4H); 1,02–0,97 (m, 1H); 0,91 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,72 (d, J = 7,0 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 167,9; 166,7; 134,3; 134,0; 132,2; 131,4; 123,5; 104,5; 92,3; 79,9; 76,8; 51,6; 45,7; 37,3; 36,3; 34,1; 30,9; 25,9; 24,7; 20,9; 20,2; 12,7. ESI-HRMS tìm thấy: 447.21311; lý thuyết: C23H31N2O7 [M+H]+: 447.21258.
N1-hydroxy-N6-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)adipamide (67f).
Chất dầu, 45%; IR (film, cm-1): 3230 (OH), 3029 (NH), 2922, 2869 (CH, CH2), 1681, 1635 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 9,80 (s, 1H, NH); 8,6 (s, 1H, NH); 7,0 (s, 1H, OH); 5,40 (s, 1H, H-12); 5,35 (t, J = 9,5 Hz, 1H, H-10); 2,25–2,22 (m, 4H); 2,21–2,0 (m, 1H); 2,10 (m, 2H); 1,95–1,85 (m, 1H); 1,70–1,60 (m, 5H); 1,58–1,48 (m, 1H); 1,43 (s, 3H, H-14); 1,42–1,32(m, 4H); 1,10– 1,00 (m, 1H); 0,99 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,97–0,92 (m, 1H); 0,87 (d, J = 7,50 Hz, 3H, H-16). 13C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 174,0; 171,0; 106,0; 91,9; 80,7; 76,3; 51,7; 45,6; 37,3; 36,3; 35,7; 34,9; 32,2; 32,1; 26,1; 24,6; 24,1; 21,7; 20,3; 13,2. ESI-HRMS Tìm thấy: 427.24441; lý thuyết: C21H35N2O7 [M+H]+: 427.24388.
N1-hydroxy-N8-((3R, 6R, 9R, 10S, 12R, 12Ar)-3,6,9-trimethyldecahydro-3H- 3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)octanediamide (67g).
Chất dầu, 60%, IR (film, cm-1): 3278 (OH), 3029 (NH), 2931, 2856 (CH, CH2), 1675, 1645 (C=O). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6, δ (ppm)): 9,80 (s, 1H, NH); 8,6 (s, 1H, NH); 7,02 (s, 1H, OH); 5,45 (s, 1H, H-12); 5,35 (t, J = 9,5 Hz, 1H, H-10); 2,50– 2,11 (m, 6H); 2,10–2,0 (m, 1H); 1,92–1,84 (m, 1H); 1,80–1,76 (m, 2H); 1,75–1,58 (m, 5H); 1,50–1,42 (m, 2H); 1,40 (s, 3H, H-14); 1,39–1,20 (m, 7H); 1,12–1,10 (m, 1H); 0,98 (d, J = 6,5 Hz, 3H, H-15); 0,84 (d, J = 7,5 Hz, 3H, H-16). 13 C NMR (125 MHz, DMSO-d6, δ(ppm)): 174,0; 171,3; 104,5; 91,9; 80,7; 75,9; 51,7; 45,6; 37,3; 36,3; 35,9; 32,4; 32,2; 28,4; 28,0; 27,9; 26,1; 24,8; 24,6; 24,5; 21,6; 20,3; 13,2. ESI-HRMS tìm thấy: 455.27571; lý thuyết: C23H39N2O7 [M+H]+: 455.27518.
CHƯƠNG 4
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. Tổng hợp các dẫn xuất triazole artemisinin 61a-l, 62a-l sử dụng phản
ứng Click
Phản ứng Click ngày càng được ứng dụng rộng rãi trong lĩnh vực nghiên cứu phát triển thuốc. Sự hình thành 1,2,3-triazole từ azit và axetylen sử dụng đồng (I) làm xúc tác là con đường rất hữu ích để tạo ra một thư viện các hợp chất mới cho hoạt động sàng lọc hoạt tính sinh học. Phản ứng Click có tính đặc hiệu, thân thiện môi trường và có khả năng tương thích sinh học cao của các chất phản ứng. Hơn nữa, triazole là cầu nối dễ dàng liên kết với đích tác dụng thông qua liên kết hydro và tương tác lưỡng cực [107, 108]. Trong nghiên cứu này, bằng việc sử dụng phản ứng Click, một loạt các dẫn xuất mới triazole của artemisinin được thiết kế và tổng hợp như ở sơ đồ 15 và 16.
Trước hết các azit 58a-i và 59a-i được điều chế như ở sơ đồ 15 [109]. Trước tiên, axit 4-aminobenzoic và axit 3-aminobenzoic được sử dụng làm nguyên liệu đầu. Những axit này trước hết được điazo hóa với NaNO2 trong môi trường axit HCl sau đó phản ứng ngay với NaN3 cho các azide tương ứng 57 và 57b với hiệu suất cao. Phản ứng của 57 và 57b với một loạt của các amin sử dụng hệ xúc tác EDC và DMAP trong CH2Cl2 ở nhiệt độ thường. Sau khi kết thúc phản ứng, hỗn hợp được pha loãng với CH2Cl2, chiết liên tiếp với H2O, 5% NaHCO3, HCl 5% và rửa bằng H2O. Pha hữu cơ được làm khan bởi Na2SO4, bay hơi dưới áp suất giảm thu được azido amide 58a-i và 59a-i tương ứng với hiệu suất 49–71%. Các chất trung gian này đủ sạch cho bước tiếp theo mà không cần tinh chế gì thêm.
Tiếp theo là tổng hợp chất trung gian 60 chứa mạch axetilen (Sơ đồ 16). Hợp chất này được tổng hợp qua phản ứng của dihydroartemisinin (10) với propargyl alcohol trong dung môi CH2Cl2 xúc tác BF3.Et2O với hiệu suất 82%, sản phẩm có cấu hình 10β dựa trên phân tích phổ và tài liệu tham khảo [110].
Các dẫn xuất triazole mới 61a – i và 62a – i được tổng hợp bằng cách sử dụng phản ứng Click (Sơ đồ 16). Trong nghiên cứu này, các khảo sát đã được thực hiện để tổng hợp các dẫn xuất triazole bằng cách sử dụng phản ứng cộng đóng vòng 1,3 Huisgen với xúc tác Cu (I) giữa các azit 58a – i, 59a – i và alkyne 60. Nói chung, phản ứng này được báo cáo là đơn giản, dễ thực hiện và là phương pháp hiệu quả để tổng hợp một thư viện dẫn xuất triazole cho các thử nghiệm sinh học [108, 111]. Phản ứng này thường không yêu cầu các điều kiện khắt khe và tiến hành ở
nhiệt độ môi trường phòng, trong môi trường nước với nhiều loại đồng dung môi hữu cơ, bao gồm tert-butanol, etanol, DMSO, THF hoặc MeCN. Để tối ưu hóa phản ứng cộng đóng vòng 1,3 sử dụng đồng (I), các hợp chất đích ban đầu được tổng hợp bằng cách xử lý alkyne 60 và các azit khác nhau trong tert-butanol: H2O (1: 1), sử dụng CuSO4.5H2O và natri ascorbate làm hệ chất xúc tác. Tuy nhiên, phản ứng đã không xảy ra. Sau đó, phản ứng được thực hiện trong các đồng dung môi hữu cơ khác nhau, bao gồm CH2Cl2, THF, MeOH, MeCN và DMSO, nhưng tất cả đều không thành công. Cuối cùng, các hợp chất triazole 61a – i và 62a – i được tổng hợp như trong sơ đồ 16, sử dụng CuI làm chất xúc tác trong MeCN ở nhiệt độ phòng trong 3-5 giờ cho một loạt các dẫn xuất 1,2,3-triazole artemisinin 61a – i và