Bả ng 2.4. Bi ế n s ố nghiên cứu căn nguyên gây bệ nh và m ức nhạ y cảm kháng sinh
2.3.7. Các k ỹ thu ật sử d ụng trong nghiên c ứu
2.3.7.1. Cấ y máu tìm vi sinh vậ t
Như quy trình cấ y máu ở mụ c tiêu 1
2.3.7.2. Th ự c hi ện kháng sinh đồ
- Môi trường: Muller Hinton ho ặ c Muller Hinton + 5% máu c ừu - Khoanh gi ấy xác định độ nh ạ y: OXOID - Anh
- Xác định độ nh ạ y
Biến số Định nghĩa Phân
loại
Phương pháp thu
thập
Cấy máu Định danh vi sinh vật trên máy
Định
danh Xét nghiệm Nhuộm soi Gram Xác định vi khuẩn Gram
dương, Gram âm. Phân bố vi sinh vật
theo thời điểm khởi phát bệnh
Tính tỷ lệ các vi sinh vật theo thời điểm khởi phát nhiễm
khuẩn Phân bố vi sinh vật theo giới tính. Tính tỷ lệ các vi sinh vật theo giới tính. Kháng sinh đồ
Đánh giá mức độ nhạy, trung gian, kháng với kháng sinh
của căn nguyên gây bệnh
Thứ bậc
+ Đị nh tính: Dùng khoanh gi ấ y t ẩ m kháng sinh v ớ i n ồng độ nh ất định để tìm vòng kháng khu ẩn. Dựa vào kích thước vòng vô khu ẩn và căn cứ vào các tiêu chuẩn để phiên gi ả i nh ạ y/kháng.
+ Định lượ ng nồng độ ức ch ế tố i thiể u (MIC): Sử d ụng h ệ th ống t ự động Vitek 2.
Nguyên lý: Th ẻ kháng sinh theo nhóm (E-test), có kho ả ng riêng cho t ừng lo ại vi khu ẩn (quy trình vi khu ẩn kháng thu ốc b ằng h ệ thống t ự động Vitek 2).
Đọ c k ết qu ả: S ử dụ ng n ồng độ ức ch ế t ối thi ể u (MIC) t ự động.
2.3.8. Các ch ỉ s ố áp d ụng trong nghiên cứu
- Xác định vi sinh vậ t gây b ệ nh:
+ C ấ y máu: N ế u vi sinh v ật mọ c, mẫu máu đượ c chuyể n vào máy để định danh vi khuẩ n t ự động.
+ Nhuộm soi máu: Xác đị nh vi khu ẩn Gram dương, Gram âm. - Xác định mức độ nh ạy cả m v ớ i kháng sinh
+ Chuyển mẫu vi khuẩn cấy được vào máy đánh giá kháng sinh đồ + Đọc kết quả trên máy: Đối với từng loại vi sinh vật và trả lời với 3 mức độ đáp ứng v ới kháng sinh: Nh ạ y, kháng, trung gian.