Sàng lọc xạ khuẩn sinh kháng sinh

Một phần của tài liệu khả năng sinh kháng sinh kháng vi sinh vật từ xạ khuẩn (Trang 28)

e. Tetracycline là nhóm kháng sinh phổ tương ñố ig ần nhau do Streptomyces spp sinh ra.

2.2.3Sàng lọc xạ khuẩn sinh kháng sinh

Trước tiên, tất cả các chủng xạ khuẩn ñược hoạt hóa trong ñĩa môi trường YS ở 30°C trong 3–4 ngày. Sau ñó các chủng ñược nuôi trong môi trường ñậu tương lỏng (tinh bột 25 g, bột ñậu tương 15 g, cao nấm men 1 g, CaCO3 4 g, nước cất 1 L, pH 6,2) ở 30°C trong 3 ngày có lắc với tốc ñộ 100 vòng/phút. Sau thời gian nuôi cấy, dịch nuôi ñược ly tâm ở 8.000 vòng/phút trong 15 phút. Dịch nổi thu ñược ñược dùng ñểñánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật. Có hai bước ñánh giá hoạt tính:

a. Phương pháp thỏi thạch

Các mảnh thạch có ñường kính 5 mm ñược cắt từ ñĩa môi trường YS có chủng xạ khuẩn mọc rất tốt ñược ñặt lên bề mặt các ñĩa thạch trước ñó ñã ñược cấy vi sinh vật kiểm ñịnh và nuôi trong ñiều kiện thích hợp trong 2 ngày. Hiệu quả kìm hãm ñược ñánh giá thông qua sự tạo thành các vùng kìm hãm quanh mảnh thạch có xạ khuẩn và hoạt tính ñược ño bằng ñường kính của các vùng này (Ichikawa T. và cộng sự, 1971).

b. Phương pháp khuếch tán dịch nuôi

Các giếng nhỏ ñược ñục trên các ñĩa thạch rắn trước ñó vừa ñược cấy vi sinh vật kiểm ñịnh. Nhỏ khoảng 25 µ l dịch nuôi ñã ly tâm vào các giếng và nuôi trong 2 ngày dưới các ñiều kiện thích hợp với vi sinh vật kiểm ñịnh. Hoạt tính kháng sinh ñược ñánh giá thông qua các vòng kìm hãm ñược tạo thành quanh giếng. Các thí nghiệm ñược lặp lại hai lần và dịch môi trường ban ñầu ñã khử trùng ñược dùng làm ñối chứng âm (Alex Y. l. T., Hai M.T. 2006).

Một phần của tài liệu khả năng sinh kháng sinh kháng vi sinh vật từ xạ khuẩn (Trang 28)