12 R=H (dãy IIIa-l), CH3 (dãy IVa-l)
3.5.5. Ứng dụng bộ kít để chẩn đoán dòng tế bào trên bệnh nhân bị bệnh bạch cầu cấp
bệnh nhân bị bệnh bạch cầu cấp
Đã sử dụng bộ kít sản xuất từ cơ chất naphtol AS-OL
-clopropionat tổng hợp được và kít của hãng Sigma với cơ chất là naphtol AS-D cloaxetat nhuộm esteraza đặc hiệu 20 mẫu tuỷ của bệnh nhân đã được chẩn đoán dòng bằng
44
các phương pháp miễn dịch và di truyền theo tiêu chuẩn FAB tại viện Huyết học-Truyền máu TW. Kết quả bộ kit chế tạo được có tính đặc hiệu tương đương với sản phẩm của hãng Sigma, nhưng độ nhạy cao hơn 1,22 lần. Đặc biệt đối với thể M3 độ nhạy của bộ kít cao hơn 30% so với bộ kít của hãng Sigma.
KẾT LUẬN
1. Đã nghiên cứu tổng hợp được 16 dẫn xuất 3-hiđroxi-N-(xiclohexyl/aryl thế)naphtalen- 2-cacboxamit, trong đó có ba chất mới bằng phương pháp truyền thống một giai đoạn và bằng kỹ thuật mới sử dụng lò vi sóng. Kết quả thực nghiệm chứng tỏ phương pháp lò vi sóng có ưu thế vượt trội về thời gian, năng lượng tiêu hao, hiệu suất sản phẩm, nhờ đó các hợp chất cacboxamit thu được với giá thành hợp lý, có thể dùng làm nguyên liệu để điều chế cơ chất nhuộm esteraza đặc hiệu bạch cầu người.
2. Đã nghiên cứu cải tiến quy trình phản ứng giữa các 3-hiđroxi-N-(xiclohexyl/ aryl thế)naphtalen-2-cacboxamit với dẫn xuất α-clo của clorua axít khác nhau. Kết quả đã tổng hợp được 38 este 3-(xiclohexyl/aryl thế cacbamoyl)naphtalen-2-yl cacboxylat, trong đó có 36 chất mới có thể làm cơ chất nhuộm tế bào bạch cầu người. 3. Đã nghiên cứu xác định độ tinh khiết, cấu trúc của các dẫn suất 3-hiđroxi-N- (xiclohexyl/aryl thế)naphtalen-2-cacboxamit và các cơ chất tương ứng bằng các phương pháp hóa lý hiện đại. Kết quả thu được đã khẳng định các hợp chất tổng hợp được có cấu trúc phù hợp với dự kiến và đạt độ tinh khiết tương đương sản phẩm nhập ngoại.
4. Đã nghiên cứu sử dụng các cơ chất điều chế được để nhuộm tế bào bạch cầu. Kết quả cho thấy cả 38 dẫn xuất 3-(xiclohexyl/aryl thế cacbamoyl)naphtalen-2-yl cacboxylat đều có hoạt tính đối với esteraza đặc hiệu bạch cầu người, trong đó naphtol AS-OL α-clopropionat có hoạt tính cao hơn sản phẩm thương mại naphtol AS-D cloaxetat do hãng Sigma chế tạo.
5. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của hiệu ứng electron, hiệu ứng không gian của các nhóm thế và các góc nhị diện tạo bởi nhóm cacboxyl lên độ đặc hiệu, độ nhạy của cơ chất đối với phản ứng nhuộm esteraza cho thấy: Các nhóm thế đẩy cho điểm nhuộm cao hơn các nhóm thế hút điện tử, các nhóm thế hút điện tử ở vị trí octo- cho điểm nhuộm cao hơn ở vị trí para-; điểm nhuộm cao nhất thuộc về các nhóm N- hiđrocacbon amit thế và cacboxylat kích thước trung bình.
6. Đã nghiên cứu tối ưu hóa quy trình nhuộm esteraza bằng phương pháp quy hoạch hóa thực nghiệm đơn hình và ứng dụng để chế tạo bộ kít nhuộm esteraza đặc hiệu bạch cầu người bằng cơ chất mới naphtol AS-OL α-clopropionat tổng hợp được. Kết quả kiểm định trên máu của người bình thường và tủy bệnh nhân ở Viện Huyết học- Truyền máu trung ương cho thấy, bộ kit chế tạo được có tính đặc hiệu tương đương với sản phẩm của hãng Sigma, nhưng độ nhạy cao hơn 1,188 lần, được khuyến cáo đưa vào sản xuất thay thế sản phẩm nhập ngoại.
46
KIẾN NGHỊ
Được nghiên cứu triển khai sản xuất kít nhuộm esteraza đặc hiệu bạch cầu người thương mại cung cấp cho các phòng xét nghiệm Huyết học - Truyền máu tại Việt Nam thay thế hàng nhập khẩu.
References TIẾNG VIỆT
1. Đỗ Thị Vinh An, Phạm Quang Vinh, Phan Văn Chi, Nguyễn Thị Bích Nhi (2010), “Bước đầu tìm hiểu một số biến đổi protein ở bệnh nhân lơ xê mi cấp dòng lympho tại khoa Huyết học Truyền máu bệnh viện Bạch Mai”, Tạp chí Y học Việt Nam tập 373, tr. 267-270.
2. Nguyễn Bá Đức, Nguyễn Chấn Hùng, Huỳnh Quyết Thắng, Nguyễn Duy Thăng, Lại Phú Thưởng, Nguyễn Văn Vy, Phó Đức Mẫn, Tôn Thất Cầu, Vũ Hô, Nguyễn Lam Hòa, Nguyễn Hoài Nga và CS (2004), “Kết quả bước đầu nghiên cứu dịch tễ học mô tả một số bệnh ung thư tại 6 vùng địa lý Việt Nam giai đoạn 2001-2003”, Tạp chí Y học thực hành tập 498, tr. 11-15.
3. Nguyễn Phương Liên, Nguyễn Ngọc Diệp, Nguyễn Tấn Bỉnh (2010), “Xác định kiểu hình dấu ấn miễn dịch tế bào phù hợp để đánh giá tế bào tồn lưu ác tính ở bệnh nhân mắc bệnh bạch cầu cấp”, Tạp chí Y học Việt Nam tập 373, tr. 339-344.
4. Phan Tống Sơn, Trần Quốc Sơn, Đặng Như Tại (1980), Cơ sở hóa học hữu cơ, tập 1, NXB ĐH&THCN, Hà Nội.
5. Đặng Như Tại, Ngô Thị Thuận (2010), Hóa học hữu cơ tập 1, NXBGD, Hà Nội.
6. Nguyễn Anh Trí (2010), Tiền lơxêmi và lơxêmi cấp, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội.
7. Phan Nguyễn Thanh Vân, Nguyễn Thị Kim Định, Phan Thị Xinh (2010), “Khảo sát 4 tổ hợp gen thường gặp trong bạch cầu cấp dòng lympho tại BV Truyền máu- Huyết học TP HCM”, Tạp chí Y học Việt Nam tập 373, tr. 180-185.
8. Nguyễn Triệu Vân, Lê Xuân Hải, Thiều Thị Hằng (2010), “Bước đầu ứng dụng kỹ thuật flow cytometry để xếp loại lơxêmi cấp tại Viện Huyết học-Truyền máu trung ương”, Tạp chí Y học Việt Nam tập 02, tr. 237-243.
TIẾNG ANH
9. Albert Bartk-Partay (2010), The Gaussian Approximation Potential: An Interatomic Potential Derived from first principles quantum mechanic, Springer, New York.
10. Ales Imramovsky, Jarmila Vinsova, Juana Monreal Ferriz, Vladimir Buchta, Josef Jampilek (2009), “Salicylanilide esters of N-protected amino acid as novel antimicrobial agent”, Bioogarnic & medicinal chemistry letters, Czech Vol 19, pp. 348- 351.
11. Allen D W., John C. Tebby, C Dennis Hall (2005), Organophosphorus Chemistry, Vol 34, Royal Society of Chemistry.
12. Ankit K. Jain, Rajeev K. Singla (2011), “An overview of microwave assisted technique: green synthesis”, Pharmaceutical sciences, India Vol 2 (9), pp. 1-3. 13. Arieh Warshel (2001), Computer modeling of chemical reactions in enzymes and solutions, John Wiley & Sons, Inc., New York.
14. Barrnett, R. J. And Seligman, A. M. (1951), “Histochemical demonstration of esterase by production of indigo”, Science Vol 114, pp. 579-582.
15. Barth EE, Hallworth R, Nichols MG (2005), “A comparison of the sensitivity of photodamage assays in rat basophilic leukemia cells”, J. Photochem Photobiol Vol 81 (3), pp. 556-62.
16. Bennett JM, Catovsky D, Daniel MT, et al.(1976), “Proposals for the
classification of the acute leukaemias. French-American-British (FAB) co-operative
group”, Br. J. Haematol. Vol 33 (4), pp. 451–458.
17. Bruce C. Gates, Helmut Knözinger (2006), Advances in Catalysis, Academic press, Elsevier, California.
18. Burstone, M. S. (1957), “Esterase activity of developing bones and teeth”, A. M. A. Arch. Path. Vol 60, pp. 164 – 167.
19. Carl A. Burtis, Edward R. Ashwood, DBruns (2006), Tietz textbook of Clincal chemistry and molecular diagnostics, Elsevier Saunders, USA.
20. Catovsky D (1994), Practical Haematology, Churchill Livingstone, Hong Kong.
21. Charlotte Wiles, Paul Watts (2011), Micro Reaction Technology in Organic Synthesis, CRC Press, New York.
22. Chemat F., M. Poux, J-L Di Martino, J. Berlan (1996), “An original microwave-ultrasound combined reactor suitable for organic synthesis: application to
48
pyrolysis and esterification”, J. of microwave power and electromagnetic energy Vol 31(1), pp. 19-21.
23. Christoph Tamm (1992), “Pig liver esterase catalysed hydrolysis substrate specificity and stereoselectivity”, Pure & Pppl. Chem Vol 64 (8), pp. 1187-1191.
24. Clément Cazorla, Émilie Pfordt, Marie-Christine Duclos, Estelle Métay and Marc Lemaire (2011), “O-Alkylation of phenol derivatives via a nucleophilic substitution”, Green Chem. Vol (13), pp. 2482-2488.
25. David C. Young (2001), Computational chemistry, John Wiley & Sons Inc., Canada.
26. David M. Levine, Mark L. Berenson, David Stephan (1997), Statistics for managers using Microsoft® Excel, Prentice-Hall Inc., New York.
27. David Swirsky and Barbara J. Bain (2006), Practical Haematology, Churchill Livingstone, Hong kong.
28. Davis NF, Callanan A, McGuire BB, Flood HD, McGloughlin TM. (2011), “Evaluation of viability and proliferative activity of human urothelial cells cultured onto xenogenic tissue-engineered extracellular matrices”, J. Urology Vol 77 (4), pp. 1001-7.
29. Divyen Patel and et al (2008), “Subcellular Fractionation studies indicate an intracellular localzation for human specific esterase (MSE)”, British Journal of Haematology Vol 84 (4), pp. 608-614.
30. Donald W. Rogers (2003), Computational chemistry using the PC, John Wiley & Sons, Inc., New Jersey.
31. Eric Jean Amigues, Christopher Hardacre, Gillian Keane, Marie Eugenie Migaud (2008), “Solvent-modulated reactivity of PCl3 with amines”, J. Green Chemistry Vol 10 (6), pp. 660-669.
32. European Commission (1997), European Customs Inventory of Chemical Substances: Numerical list (by CUS-number); Correlation between CAS- and CUS- numbers, Office for Official Publications of the European Communities.
33. Evelyn H.Wilson, Highland Park, N.J (1959), Process for producing oxy aromatic acid chlorides, United States, Patent 2899458.
34. Fei Xuenging, Zhang Tiangyong, Zhou Chunlong (1999), “Synthesis of derivatives of naphtol AS containing polar group and modification used for C.I. pigment red 57”, Dyes and pigments Vol 40, pp. 199-204.
35. Fei Xuening, Zhang Tianyong, Zhou Chunlong (1999), “Synthesis of derivatives of Naphtol AS containing polar groups and modification used for C.I. Pigment Red 57”, Dyes and Pigments, Elsevier Vol 40(2), pp. 199–204.
36. Gaithersburg MD (2010), NIST Standard Reference Database, National Institute of Standards and Technology.
37. George V. Artwelle, Francis G. Wislon, Marc Ansseau, Julien S. Baker, Carolyn A. Bondy (2008), New Human Growth Hormone Research, Nova Science Publishers, Inc., New York.
38. Gignac SM, Hu ZB, Denkmann SA, Uphoff CC, Drexler HG (1996), “Esterase isoenzyme profiles of 255 leukemia-lymphoma cell lines from all hematopoietic cell lineages”, Leuk Lymphocytesm Vol 22, pp. 143-151.
39. Gomori G (1953), “Chloroacyl esters as histochemical substrates”, J. Histochemistry & Cytochemistry Vol 1, pp. 469-470.
40. Guo L, Q L Wang, Q Q Jiang, Q J Jiang, Y B Jiang (2007), “Anion-Trigger Sub-Dependent Conformation Switch of Salicylanilide. Rel Understanding Inhibitory Mech Salicylanilide [protein tyrosine kinase EGFR]”, JOC Vol.72 (26), pp. 9947-9953. 41. Hashimoto Mitsuru (1981), New disazo compound and production thereof, Japan, Patent No. 56152868.
42. Hashimoto, Mitsuru (1995), Bisazo compounds useful as charge generating materials, Japan, Patent No. 5459247.
43. Hayhoe FGJ, Quaglino D (1980), Haematological cytochemistry, Edinburgh Churchill Livingstone, London.
44. Henryk Dancygier (2010), Clinical Hepatology: Principles and Practice of Hepatobiliary Diseases, Vol 1, Springer, New York.
45. Herbst W, Hunger K (2004), Industrial organic pigments, Wiley-VCH,
Darmstadt.
46. Horwitz D. A., D.Allinson P., Ward & Nancy Kight (1977), “Identification of human mononuclear leukocyte populations by”, Clin. exp. Immunol. Vol 30, pp. 289- 298.
47. Jagat J. Mukherjee, Francis T. Jay and Patrick C.Choy (1993), “Purification, characterization and modulation of a microsomal carboxylesterase in rat liver for the hydrolysis of acyl-CoA”, J. Biochem Vol 295, pp. 81-86.
48. Jan-Christer Janson (2011), Protein Purification: Principles, High Resolution Methods, and Applications, Wiley, New Jersey.
50
49. Janice L. Hyatt, Randy M. Wadkins, Lyudmila Tsurkan, Latorya D. Hicks, M. Jason Hatfield, Carol C. Edwards, Charles R. Ross II, Stephanie A. Cantalupo, Guy Crundwell, Mary K. Danks, R. Kip Guy, Philip M. Potter (2007), “Planarity and constraint of the carrbonyl groups in 1,2-diones are determinants for selective inhibition of human carboxylesterase 1”, J. Med. Chem Vol 50 (23), pp. 5727–5734.
50. Janice R. Connor, Robert A. Dodds, Ian E. James, Maxine Gowen (1995), “Human osteoclast and giant cell differentiation, The apparent switch from nonspecific esterase to tartrate resistant acid phosphatase activity coincides with the in situ expression of osteopontin mRNA”, J. Histochemistry and Cytochemistry Vol 43 (12), pp. 1193- 1201.
51. Jarmila Vinsova, Ales Imramovsky, Vladimir Buchta, Martina Ceckova, Martin Dolezal, Frantisek Staud, Josef Jampilek and Jarmila Kaustova (2007), “Salicylanilide acetates: Synthesis and antibacterial evaluation”, J. Molecular, pp. 1420-3049.
52. Jeanette E. Stok, Andrey Goloshchapov, Cheng Song, Craig E. Wheelock, Maher B.H. Derbel, Christophe Morisseau, Bruce D. Hammock (2004), “Investigation of the role of a second conserved serine in carboxylesterases via site-directed mutagenesis”, Archives of Biochemistry and Biophysics Vol 430, pp. 247–255.
53. John P. Greer, John Foerster, George M. Rodgers, Frixos Paraskevas, Bertil Glader, Daniel A. Arber, Robert T. Means, Jr. (2009), Wintrobe’s clinical hematology Vol 1, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, USA.
54. John Shore, Geoffrey Hallas (2002), Colorants and auxiliaries organic chemistry and application properties, Society of dyers and colourists, Bradford.
55. Jose Manuel Andrade-Garda (2009), Basic Chemometric Techniques in Atomic Spectroscopy, RSC Publishing, London.
56. Joseph Chayen, Lucille Bitensky (1994), Practical histochemistry, Wiley, London.
57. Judith E. Karp (2007), Acute myelogenous leukemia, Humana Press, Totowa, New Jersy.
58. Kaphalia BS, Fritz RR, Ansari GA (1997), “Purification and characterization of rat liver microsomal fatty acid ethyl and 2-chloroethyl ester synthase and their relationship with carboxylesterase, issue pI 6,1”, Chem Res Toxical Vol 10 (2), pp. 211-218.
59. Kock-Yee Law, Ihor W. Tarnawskyj (1994), “Azo pigments and their intermediates. A new class of couplers for red and near-IR sensitive photogenerating azo pigments”, Dyes and Pigments Vol 25 (4), pp. 281–293.
60. Koichi Tanaka (2003), Solvent-free organic synthesis, Wiley-VCH Verlag GmBH & Co. KGaA, Weinheim.
61. Kurt Faber (2011), Biotransformations in Organic Chemistry: A Textbook, Springer, New York.
62. Langmann T, Aslanidis C, Schuierer M and Schmitz G (1997), “Differentiation-dependent expression of a human carboxylester- ase in monocytic cells and transcription factor binding to the promoter”, Biochem Biophys Res Vol 230, pp. 215-219.
63. Lawrence I. Gilbert, Sarjeet S. Gill (2010), Insect Pharmacology: Channels, Receptors, Toxins and Enzymes, Elsevier, San Diego.
64. Leder L. D (1970), “Diagnostic experiences with the naphthol AS-D chloroacetate esterase reaction”, Annals of Hematology Vol. 21 (1), pp. 1-8.
65. Li CY, Lam KW, Yam LT (1973), Esterases in human leucocytes”, J. Histochem. Cytochem Vol 21, pp. 1-12.
66. Li Xu (2008), Mass spectrometric analysis of environmentally relevant phenolic compounds, Proquest, New Jersey.
67. Liu, W. Yan, Q. Wang, H. Xiong, J. Zhou, He, H. Yang, C. Hu (2001), “Process for preparing Naphthol AS products”, Chem Abstr, Faming Zhuanli Shenging Gongkai Shuomingshu, CN 1251834.
68. Margaret Robson Wright (2004), An introduction to chemical kinetics, John Wiley & Sons, Ltd, UK.
69. Mark David Gottsegen (2006), The painter's handbook: a complete reference, Watson-Guptill.
70. Medda S, Proia RL (1992), “The carboxylesterase family exhibits C- terminal sequence diversity reflecting the presence or absence of endoplasmic-reticulum- retention sequences”, “Eur J Biochem” Vol 206 (3), pp. 801-806.
71. Meniai-Belayat FZ, Coignoul F, Meniai K, Dewaele A (1990), “Alveolar macrophages of sheep: purification and identification”, Ann Rech Vet. Vol 21 (3), pp. 205-209.
72. Merck (1995), “Enzyme cytochemistry Leucognost/HematoGnost Fe; Working instructions for simpified cytochemical staining for differentiation of leukaemias and myelodysplastic syndromes”, E. Merck, D-64271 Darmstadt, pp. 9-17.
52
73. Michael Coleman (2010), Human Drug Metabolism: An Introduction,
Wiley, Wilts, UK.
74. Moe W., Kazutaka K., Yasushi M. et al (2008), “Diagnosis of acute myeloid leukemia according to the WHO classification in the Japan adult leukemia study group AML-97 protocol”, International Journal of Hematology Vol 87 (2), pp. 144-151. 75. Nicola J. Roger, Simon C. Apte (2004), “Azo dye method for mapping relative sediment enzyme activity in situ at precise spatial locations”, Environ. Sci. Technol Vol 38, pp. 5134-5140.
76. Paul R. Blakemore, Philip J. Kocieński, Andrew Morley, Kenneth Muir (1999), “A synthesis of herboxidiene”, J. Chem. Soc Vol 1, p. 955.
77. Pedro J. Chedrese (2009), Reproductive Endocrinology: A Molecular Approach, Springer, New York.
78. Ramesh Chandra Gupta (2009), Handbook of toxicology of chemical warfare agents, Elservier, San Diego.
79. Robert E. Lenga, Kristine L. Votoupal (1993), The Sigma-Aldrich library of regulatory and safety data, Sigma-Aldrich Corporation Vol 2, pp. 2275 - 2033.
80. Robert Irving Krieger, Wayland J. Hayes (2010), Hayes’ handbook of pesticide toxicology, Elsevier, San DiegoVol 2, p. 1435.
81. Robert N. Fontaine, Christopher P. Carter, David Y. Hui (1991), “Structure of the rat pancreatic cholesterol esterase gene”, Biochemistry Vol 30 (28), pp. 7008– 7014.
82. Robert O. Dillman (2009), Principles of Cancer Biotherapy, 5th edition, Springer, California.
83. Ronai A, Berning W, Gaa A, von Deimling O. (1993), “Esterase-30 (ES- 30) of the house mouse: biochemical characterization and genetics of a new carboxylesterase isozyme linked to cluster-2 loci on chromosome 8”, Biochem Genet Vol 31 (7-8), pp. 279-294.
84. Rozenszajn L, Leibovich M, Shoham D, Epstein J (1968), “The esterase activity in megaloblasts, leukaemic and normal haemopoietic cells”, Br. J. Haematol, Vol 14, pp. 605-619.
85. Ruth Nussinov, Gideon Schreiber (2009), Computational protein-protein interactions, Taylor & Francis group, LLC., Maryland.
86. Sabnis R.W. (2007), Hand book of acid-Base indicators, Taylor and frames, inc, San Francisco.
87. Scott DF, Chacko TL, Maxwell DM, Schlager JJ, Lanclos KD (1999), “Expression and partial purification of a recombinant secretory form of human liver carboxylesterase”, Protein Expr Purif Vol 17 (1), pp.16-25.
88. Shiotsuki T, Kato Y (1999), “Induction of carboxylesterase isozymes in Bombyx mori by E. coli infection”, Insect Biochem Mol Biol Vol 29 (8), pp. 731-736. 89. Sigma-Aldrich (2003), “Naphthol AS-D Chloracetate Esterase” (Procedure No.91), Catalougue, Sigma-Aldrich, pp. 1-3.
90. Sir John V. Dacie, S.M Lewis (1994), Practical Haematology, Longman Group Ltd, Hong Kong.
91. Stefan Faderl, Hagop Kantarjian (2011), Leukemias: Principles and Practice of Therapy, Blackwell, Oxford.
