- Máy đo mật độ quang
III – PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH
Tiến hành tương tự như nhau ở cả hai loại dd ADN và ARN theo các bước sau
Bước 1
Pha lỗng 10 lần bằng cách trộn chung 100µl dịch acid nucleic với 0.9ml nước cất, trộn kỹ bằng pipetman và xen lẫn vortex. Trữ lạnh và đậy nắp kỹ.
Bước 2
Pha lỗng tiếp 2 lần bằng cách hút bổ sung 1ml nước cất
Bước 3
Chuẩn OD bằng nước cất và tiến hành đo ở 2 bước sĩng 260 nm và 280 nm
Bước 4
Ghi nhận kết quả và tính tốn kết quả
IV – YÊU CẦU
BÀI 11 & 12:
PHƯƠNG PHÁP ĐIỆN DI (ELECTROPHORESIS)
I. NGUYÊN TẮC
Trong một điện trường, các phân tử nằm trong pha lỏng sẽ di chuyển với vận tốc phụ thuộc tỉ lệ giữa điện tích và khối lượng của chúng, nếu hai phân tử cùng khối lượng, phân tử nào cĩ diện tích lớn hơn sẽ di chuyển về điện cực ngược dấu nhanh hơn.
Kỹ thuật này thường được sử dụng để phân tách các nucleic acid và protein. Bài này chỉ đề cập đến kĩ thuật điện di nucleic acid.
Ở lĩnh vực này, điện di thường được tiến hành trên những giá thể bán rắn là các gel. Các gel này là mơi trường xốp với các lỗ nhỏ cho phép các phân tử nucleic acid đi qua, phân tử cĩ kích thước càng lớn thì di chuyển trong gel càng chậm. Tùy theo kích thước các phân tử cần phân tách và mức độ phân tách, người ta sẽ sử dụng một trong hai loại gel là agarose hay polyacrylamide.