III. Tách và xác định cấu trúc hợp chất
Chơng III: Kết quả và thảo luận
I . Xác định cấu trúc của hợp chất D (TDVV16) từ vỏ
vối
Hợp chất TDVV16 có dạng tinh thể vàng nhạt
Cấu trúc của hợp chất D đợc xác định bằng các phơng pháp phổ cộng hởng từ hạt nhân 1H-NMR va 13C-NMR, so sánh với phổ chuẩn
Hợp chất D là hợp chất Flavonoit: Rhamnocotrin, công thức cấu tạo
O O OH OH OH O H3C 1' 2' 3' 4' 5' 6' 2 3 4 5 6 7 10 8 9
Nhìn vào công thức cấu tạo của Rhamnocotrin, ta thấy ở vòng thơm A ở vị trí số 5 đợc thay thế bởi nhóm OH, ở vị trí số 7 đợc thay thế bởi nhóm –OCH3, vị trí 1’ ở vòng A có 2 protron thơm ở các vị trí 6 và 8. Vòng B thế para có 4 proton thơm proton 2’ tơng đơng với proton 6’; proton 3’ tơng đơng với proton 5’; proton 2’ tơng tác với proton 3’ (cũng nh proton 5’ tơng tác với proton 6’) hằng số tơng tác octo 6-9 Hz.
*)Trên phổ cộng hởng từ hạt nhân 1H-NMR của hợp chất D ta thấy - Tín hiệu cộng hởng của 3 proton nhóm metoxy (-OCH3) có độ chuyển dịch hoá học δ = 3,830 ppm (s)
- Tín hiệu cộng hởng của proton thơm vòng A vị trí 6 có độ chuyển dịch hoá học δ = 6,524 ppm (s), vị trí số 8 có độ chuyển dịch hoá học
δ=6,501ppm(s)
- Tín hiệu cộng hởng của proton thơm vòng B vị trí 2’ (cũng nh vị trí 6’) có độ chuyển dịch hoá học δ = 7,832 ppm (d) J = 8,5 Hz do tơng tác octo với proton 3’ (cũng nh proton 6’ tơng tác octo với proton 5’)
- Tín hiệu cộng hởng của proton thơm vòng B vị trí 3’ (cũng nh vị trí 5’) có độ chuyển dịch hoá học δ = 6,927 ppm (d) J = 8,5 Hz do tơng tác octo với proton 2’ (cũng nh proton 5’ tơng tác octo với proton 6’)
*)Phổ cộng hởng từ hạt nhân 13C-NMR của hợp chất D có những tín hiệu đặc trng sau :
Nguyên tử C của nhóm C = O vị trí C4, có độ chuyển dịch hoá học cao
Các nguyên tử của vòng thơm A, B liên kết với nhóm –OH hoặc oxy (oxy có độ âm điện lớn có độ chuyển dịch hóa học tơng đối cao
- Tín hiệu cộng hởng của C5 có độ chuyển dịch hoá học δ = 160.630 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C7 có độ chuyển dịch hoá học δ = 165.194 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C9 có độ chuyển dịch hoá học δ = 157.140 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C4’ có độ chuyển dịch hoá học δ = 160.016 ppm Các nguyên tủa liên kết đôi, liên kết với nhóm –OH hay có độ chuyển dịch hoá học tơng đối cao
- Tín hiệu cộng hởng của C2 có độ chuyển dịch hoá học δ = 147.150 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C3 có độ chuyển dịch hoá học δ = 136.007 ppm Các nguyên tử C của vòng thơm A,B không liên kết với nhóm –OH hoặc oxy có độ chuyển dịch hoá học không cao, nguyên tử C2’ tơng đơng với C6’, C3’ tơng đơng với C5’
- Tín hiệu cộng hởng của C10 có độ chuyển dịch hoá học δ = 105.126 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C6 có độ chuyển dịch hoá học δ = 98.248 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C8 có độ chuyển dịch hoá học δ = 94.024 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C2’ = C6’ có độ chuyển dịch hoá học δ =130.640 ppm - Tín hiệu cộng hởng của C3’ = C5’ có độ chuyển dịch hoá học δ =115 .292 ppm
Nguyên tử C của nhóm - OCH3 có độ chuyển dịch hoá học thấp δ = 61.050 ppm.
Số liệu phổ cộng hởng từ 1H- NMR và 13C- NMR của hợp chất D đợc thể hiện ở bảng sau
Bảng 10: Số liệu cộng hởng từ hạt nhân của hợp chất TDVV16
(Dung môi CDCl3 +MeOD; T= 300 0K, thiết bị Brucker tần số 500 MHz)
Số C Nhóm C 13C-NMR (ppm) 1H-NMR 1 C= 147,150 2 C = 136,007 3 C= O 175,998 4 =C-OH 160,630 5 CH = 98,805 6,524 (s)
6 = C –OCH3 165,1947 CH = 94,024 6,501(s) 7 CH = 94,024 6,501(s) 8 C= 157,140 9 C= 105,126 10 C = 122,480 1’ CH = 130,640 7,832 (d) J = 8,5 2’ CH = 115,292 6,927 (d) J =8,5 3’ =C-OH 160,016 4’ CH = 115,292 6,927 (d) J = 8,5 5’ CH = 130,646 7,832 (d) J = 8,5 6’ -OCH3 61,050 3,830 (s)
Từ các số liệu phổ: H-NMR, C-NMR, DEPT so sánh với phổ chuẩn đã xác định đợc hợp chất D (TDVV16) là Rhamnocotrin có cấu trúc : O O OH OH OH O H3C 1' 2' 3' 4' 5' 6' 2 3 4 5 6 7 10 8 9
Kết luận
1. Vỏ vối khô đợc chiết với metanol, cao metanol đợc phân tán vào nớc và chiết lần lợt với các dung môi n-hexan, clorofom, etylaxetat và n- butanol. Cao etylaxetat đợc tách trên cột silicagen, hệ dung môi rửa giải cloroform: metanol, tỉ lệ 85-15. Tách đợc hợp chất D
2. Bằng các phơng pháp phổ cộng hởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C- NMR, so sánh với phổ chuẩn, đã xác định đợc cấu trúc và hợp chất D là Rhamnocotrin
Công thức cấu tạo của hợp chất nh sau: O O OH OH OH O C H3 2 3 4 5 6 7 8 9 1' 2' 3 ' 4' 5' 6' Rhamnocotrin
Tài liệu tham khảo
1. Cây thuốc và động vật làm thuốc Việt Nam (2005), Viện Dợc liệu. 2. Nguyễn Xuân Dũng, Đào Hữu Vinh và các cộng sự (1985), các phơng
pháp sắc ký, NXB Khoa học Kỹ thuật.
3. Nguyễn Xuân Dũng, Hoàng Văn Lựu, Tạ Thị Khôi and Piet A. Leclercq (1984), "GC and GC/MS Analysis of the leaf oil of cleistocalyx operculatus (Roxb). Merr et Perry", Journal of Essential Oil Reseach, 6, 661-662.
4. Nguyễn Xuân Dũng, Trần Đình Thắng, Hoàng Văn Lựu,"Nghiên cứu thành phần hóa học của tinh dầu hoa sim ", Tạp chí dợc liệu, số 4 -, tập 4, Tr 108 - 109
5. Lê Thị Anh Đào, Nguyễn Xuân Dũng, Hoàng Văn Lựu (1997), "Nghiên cứu thành phần hóa học cây vối ở Nghệ An", Tạp chí hóa hóa học, T 35, số 3, Tr 47 - 51
6. Nguyễn Văn Đậu, Nguyễn thị Thuận, Đỗ Thị Thanh, "Phân lập một số hợp chất từ lá cây vối (2007)", Tuyển tập công trình hội nghị khoa học và công nghệ hóa học hữu cơ toàn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 311 - 315
7. Phan Minh Giang, Trần Thị Hà, Nguyễn Hồng Anh, Phan Tống Sơn (2007), "Nghiên cứu hóa thực vật cây sim (rhodomyrtus tomentosa (Ait) Hassk. Myrtaceae", Tuyển tập công trình hội nghị khoa học và công nghệ hóa học hữu cơ toàn quốc lần thứ IV, Hà Nội, Tr 340 - 345.
8. Nguyễn Quang Huy, Phan Tuấn Nghĩa, Ngô Văn Quang, Phan Văn Kiên (2007), "Axit asiatic phân lập từ cây sắn thuyền (syzygium resinosum) và có tác dụng lên vi khuẩn streptoccus mutans", Tạp chí Dợc học số 7.
9. Văn Ngọc Hớng, Nguyễn Xuân Sinh (2003), "Isolasion and Identification of two triterpenoids from the leaves of syzygium resinosum Gagnep". 8th Eurasia comference on chemical sciences, Ha Noi, october 21 - 24, p.p.355
10. Đỗ Tất Lợi (2005), những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất bản Y học.
11. Hoàng văn Lựu (1996), Nghiên cứu thành phần hóa học một số cây thuộc họ Sim (Myrtaceae) ở Nghệ An, Luận án Phó tiến sĩ khoa học Hóa học - ĐHQGHN, Trờng ĐHSP Hà Nội.
12. Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Xuân Dũng, Lê Thị Anh Đào (1994), "Đặc trng hóa học tinh dầu hoa vối (cleistocalyx operculatus Roxb. Merr et Perry) của Việt Nam", Thông báo khoa học, Đại học s phạm Hà Nội I, (4), 32 - 34.
13. Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Quang Tuệ (2004), "Thành phần hóa học của cây gioi", Tạp chí phân tíc hóa, lý và sinh học, Tập 9, số 1, tr 20 - 23 14. Nguyễn Đức Minh (1975), Tính kháng khuẩn của cây thuốc Việt
Nam, NXB Y học.
15. Nguyễn Duy Nh (2008), "Trị tiêu chảy bằng ổi", Tạp chí Khoa học phổ thông, số 87, tr 14 - 16
16. Trịnh Thị Thuỷ, Trần Văn Sung (1993 - 1994), "Kết quả nghiên cứu hóa học một số cây thuốc Việt Nam" Tuyển tập các báo cáo Khoa học - Viện Hóa học, 213.
17. Hoàng Thị Sản (2001), Phân loại thực vật, NXB Y học. 18. Http://agriviet.com
19. Http://dictionary.bachkhoatoanthu.gov.vn 20. Http://www.ctu.edu.vn
21. Http://www.thaythuoccuaban.gov.vn 22. Http://www.wikipedia.vn
23. C. l. ye, J. W. Liu, D. z. Wei, Y. H. Lu, F. Quian
Cancer chemother
24. Corie Djadjo, Michel Delmee, Joelle Quetin - Leclercq, "Antimicrobial activity of bark extract of Syzygium jambor (L) Alston (Myrtaceae)", Journal of Ethnopharmacology 71, 108 - 109
25. Dachriyanus, Salni, Meloyn V. Sargent, Brian W. Skelton, Iwang Soediro, Mumu Sutisna, Allan H. White and Elin Yulinal (2002), "Rhodomyrtone, an antibiotic from Rhodomyrtus tomentosa", Austr. J. Chem, 55, 229 - 232
26. Karla Slowing, Monica Sollhuber, Emilia Carretero and Angel Villor (1994), "Flavonoid glycosid from Eugenia jambor", Phytochemistry, Vol. 37. No 1, pp 255 - 258.
27. Ebrhard Breitmaier (2002), "Structure elucidation by NMR in Organic chemistry", John Wiley & son, ltd, p, 1-65.
28. Myint Myint Khine (2006), "Isolation and Characterization of phytoconstituents from Myanmar Medicinal Plants", Dissertation, p, 29-33.
29. L, John Goad, Toshihiro Akihisa (1997), "Analysis of Sterols",
Blackie Academic & Professional.
30. Zhang Fengxian, Liu Meifang and Lu Renrong (1990), "Chemical constituents from the bud of Cleistocalyx operculatus" Zhwu xuebao
32 (6), 469.
31. Wai Hean Hui and Man Moon Li (1997), "Two new tritecpenoids from Rhodomyrtus tomentosa", Phytochemitry, Vol. 15, pp 1741 - 1743. 32. Min BS, Thu CV , Đat NT, Jang HS and Hung TM
Antioxidative Flavonoids From cleistocalyx operculatus buds chemical & Pharmaceutical Bulletin 56(12) ,1725-1728, 2008 Dec
Mục lục
trang Lời cảm ơn
Mở đầu 1
1. Lí do chọn đề tài 1
2. Nhiệm vụ nghiên cứu 2
3. Đối tợng nghiên cứu 2
Chơng I: Tổng quan 3
I. Đại cơng về thực vật học và hoá học cây họ sim 3
I.1 Đại cơng về thực vật học 3
I.2 Giới thiệu một số cây họ Sim 3
I.2.1 Cây sim(Rhodomyrtus tomenetosa ) 3
I.2.2 Cây ổi (Psidium guyjavaL) 9
I.2.3 Cây gioi (Engenia jambos) 11
I.2.4 Cây sắn thuyền (Syzy gium Resinosum) 13
II. Đại cơng về thực vật học và hoá học cây vối 16
II.1. Tên gọi 16
II.2. Đặc điểm thực vật 16
II.3. Phân bố 17
II.4. Thành phần hóa học cây vối 17
II.5. Tác dụng dợc lí 30
Chơng II: Phơng pháp nghiên cứu và thực nghiệm 32
I Phơng pháp nghiên cứu 32
I.1. Phơng pháp lấy mẫu 32
I.2. Phơng pháp phân tích, phân tách và phân lập các chất 32
I.3. Phơng pháp xác định cấu trúc các hợp chất 32
II. Thực nghiệm 32
II.1. Thiết bị và hoá chất 32
II.1.1. Dụng cụ và thiết bị 32
II.1.2. Hoá chất 33
II.1.3. Các phơng pháp sắc kí 34
III. Tách và xác định cấu trúc hợp chất 34
III.1. Tách các hợp chất 34
III.1.1. Thu hái mẫu 34
III.1.2. Chiết và tác các hợp chất từ vỏ vối 34 III.2. Xác định cấu trúc các hợp chất 37
Chơng III: Kết quả và thảo luận 38
Xác định cấu trúc của hợp chất D(TDVV16) từ vỏ vối 38
Kết luận 48
Tài liệu tham khảo 49