L *i cam oan
1.3.4.Ch dinh d!%ng
- Th c n là m.t trong nhFng y u t c& b n có nh h!=ng tr c ti p và gián ti p n s l!"ng và ch#t l!"ng tinh d0ch. Trao >i ch#t c a bò c gi ng cao h&n bò th!*ng 10 - 12%, thành ph,n tinh d0ch c4ng -c bi t h&n các s n phGm khác. Vì v y, nhu c,u th c n cho bò c gi ng òi h1i ,y c v3 s l!"ng và ch#t l!"ng (Nguy n Xuân Tr/ch và Mai Th0 Th&m, 2004).
- Ch . dinh d!%ng cho bò c gi ng kém làm ch m thành th6c v3 tính,
gi m tính h ng, gi m s hình thành tinh trùng, t ng t@ l tinh trùng k$ hình, rút
ng2n th*i gian hFu ích. Ch . nuôi d!%ng t t, cân bMng dinh d!%ng có tác d6ng
làm cho con c s+m thành th6c v3 tính, kh n ng sinh tinh cao. Nh!ng n u ch
. dinh d!%ng quá cao sN làm bò c béo, trong thân th5 và d0ch hoàn tích m%,
tu,n hoàn máu kém l!u thông, làm gi m kh n ng sinh tinh, t ng t( l tinh trùng
ch t và t( l tinh trùng k$ hình cao (Hurley và Doane, 1989; Bùi c L4ng và cs.,
1995, V4 Duy Gi ng, 2007).
- KhGu ph,n n cân i, giàu /m, giàu vitamin sN làm t ng s l!"ng tinh
d0ch và tinh trùng. Th c n thi u vitamin A ho-c ít caroten, quá trình sinh tinh b0
gi m i rõ r t, khGu ph,n th c n giàu ch#t xanh sN kh2c ph6c !"c nh!"c i5m
trên. Trong th c t ch n nuôi = mi3n B2c n!+c ta, vào v6 ông - Xuân do thi u
khGu ph,n n các lo/i vitamin c,n thi t c4ng nh! các ch#t khoáng -c bi t là khoáng vi l!"ng. KhGu ph,n n cho bò ph i áp ng !"c nhu c,u dinh d!%ng c a chúng, theo tu>i, gi ng, t c . t ng kh i l!"ng, kh i l!"ng c& th5 và n ng l c s n xu#t tinh d0ch.
- Nhi3u nghiên c u cho th#y, thi u vitamin A trong khGu ph,n n nh h!=ng x#u n quá trình sinh tinh = bò c, t ng t@ l tinh trùng k$ hình (Rode et al., 1995).
- Vitamin D không ch( nh h!=ng tr c ti p n kh n ng sinh s n c a gia
súc mà nó còn nh h!=ng gián ti p thông qua s chuy5n hóa các nguyên t canxi
và ph tpho (Hurley và Doane, 1989).
1.3.5. Kho ng cách l y tinh
- Th*i gian tB ngày l#y tinh này n ngày l#y tinh ti p theo là kho ng cách
l#y tinh c a c gi ng. Kho ng cách l#y tinh nh h!=ng n l!"ng xu#t tinh, ch#t l!"ng, n)ng . và ho/t l c c a tinh trùng. i v+i bò c gi ng th!*ng kho ng cách tB 3 n 5 ngày l#y tinh m.t l,n là t t nh#t, n u kho ng cách l#y tinh ng2n có th5 mIi l,n l#y tinh !"c ít, nh!ng t>ng l!"ng xu#t tinh trong m.t kho ng th*i gian nh#t 0nh cao h&n so v+i l#y tinh có kho ng cách dài.
- N u kho ng cách l#y tinh dài, l!"ng xu#t tinh l#y !"c nhi3u nh!ng t@ l
tinh trùng ch t cao, ho/t l c tinh trùng y u. Vi c xác 0nh kho ng cách l#y tinh
ph i c n c vào l!"ng xu#t tinh và ch#t l!"ng tinh l#y !"c l,n tr!+c c a tBng
con bò c 5 xác 0nh l,n l#y tinh ti p theo. 5 duy trì kh n ng sinh s n lâu dài
c a bò c thì kho ng cách l#y tinh thích h"p cho bò tB 3 n 4 ngày/l,n (Hà
V n Chiêu, 1996).
1.3.6. Ch m sóc – Nuôi d ng
- Ch m sóc, nuôi d!%ng là công vi c tác .ng tr c tri p lên c& th5 bò c
gi ng g)m: v sinh chu)ng tr/i, máng n, máng u ng, cách cho n, t2m ch i, v n
.ng, thái . c a ng!*i ch m sóc và l#y tinh sN có nh h!=ng r#t l+n n s l!"ng và ch#t l!"ng tinh khai thác. Có th5 sN không l#y !"c ít tinh d0ch nào (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
trong m.t th*i gian dài và có th5 làm h1ng bò c gi ng n u ch m sóc qu n lý
- Chu)ng tr/i s/ch sN, thoáng mát v3 mùa hè, #m áp v3 mùa ông, bò !"c
t2m, ch i, v n .ng tho i mái hàng ngày sN làm t ng tu,n hoàn máu l!u thông
vv…, giúp bò c khoC m/nh, làm t ng kh n ng sinh tinh và ch#t l!"ng tinh c4ng !"c t ng lên.
1.3.7. Tay ngh c a k thu t viên khai thác tinh d ch
- 5 có !"c tinh d0ch có ch#t l!"ng t t thì ngoài các y u t trên, tay ngh3 c a k? thu t viên khai thác tinh d0ch c4ng là m.t trong nhFng y u t h t s c quan
tr ng. TB khâu chuGn b0 bò c gi ng khai thác tinh, ch n l a bò giá nh!: thao
tác b2t, c 0nh, v sinh t2m ch i, thao tác cho nh y nh , nh y th t… chuGn b0
d6ng c6 th6 tinh nh!: âm /o gi , . nh+t, . #m, . c ng trong lòng âm /o gi … (n u khai thác tinh bMng ph!&ng pháp dùng âm /o gi ), chuGn b0 máy,
ph u h ng tinh, ng h ng tinh… (n u khai thác tinh bMng i n). Các thao tác
chuGn b0 c a k? thu t viên m b o t t theo úng quy trình sN làm cho bò c
gi ng c m th#y !"c g,n nh! nh y tr c ti p sN cho s l!"ng, ch#t l!"ng tinh d0ch t t h&n.
1.4. M:t s) nguyên lý c b n v=.ông l,nh tinh trùng
Tinh trùng là m.t t bào s ng, v n .ng ngoài c& th5, r#t m'n c m v+i s
thay >i c a i3u ki n môi tr!*ng xung quanh. Trong quá trình ông l/nh tinh
d0ch, ngoài vi c d a vào nguyên lý lý h c, hóa h c còn ph i d a vào nguyên lý
sinh h c và m i t!&ng tác c a chúng sao cho tinh trùng khi ông b ng v'n giF
nguyên hình thái, trao >i ch#t t/m ngBng và sau khi gi i ông tinh trùng v'n
ho/t .ng bình th!*ng (Nguy n Xuân Hoàn, 1993).
1.4.1. Hi n t ng ông b ng ch t l ng
- Trong quá trình ông l/nh, tinh trùng sN ch0u nh h!=ng c a hi n t!"ng ông b ng ch#t l1ng.
- Khi m.t ch#t l1ng !"c làm l/nh, quá trình ông b ng x y ra, quá trình
này g)m: Ti3n ông b ng (Supercooling), t/o nhân (nucleation), giãn n= c a tinh
th5 b ng (growth of ice crystals) và k t tinh hoàn thi n t/i m.t nhi t . nh#t 0nh (Eutectic Point), di n bi n nhi t . trong quá trình ông b ng theo ) th0 nh! hình 1.8 và hình 1.9.
Hình 1.8. Quá trình .ông l,nh dung d0ch (Masuda, 1992)
Hình 1.9. ông l,nh n 6c mu)i sinh lý (Masuda, 1992)
Khi ông l/nh tinh d0ch s t/o tinh th5 và giãn n= tinh th5 b ng ch( x y ra trong i3u ki n ông l/nh ch m, còn khi ông l/nh c c nhanh thì hai hi n t!"ng
trên không x y ra, mà x y ra hi n t!"ng th y tinh hóa (Vitrification), t/o ra các
h/t b ng nh1 li ti, lo/i trB !"c hi n t!"ng giãn n= tinh th5 (Mazur, 1980).
1.4.2. nh h ng c a hi n t ng ông b ng lên t bào tinh trùng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
1.4.2.1. Hi n t ng ông b ng n i bào
Tinh trùng b0 ch t ho-c m#t n ng l c ho/t .ng, khi c#u t/o n.i bào b0 phá v% do vi c hình thành tinh th5 n!+c n.i bào. N u tinh trùng nMm trong dung d0ch mu i sinh lý có th5 lo/i trB !"c hi n t!"ng này vì !"c các phân tD n!+c d/ng l1ng bao quanh, m-c dù dung d0ch ngo/i bào b2t ,u ông b ng = nhi t . -20C
ho-c -50C. Nh! v y quá trình ông b ng sN không làm h/i t+i t bào tinh trùng
cho n khi n!+c n.i bào ông l/nh m-c dù dung d0ch môi tr!*ng bao quanh ã
ông l/nh (Mazur, 1980).
1.4.2.2. S m t n c c a t bào tinh trùng
- N u n!+c n.i bào thoát ra ngoài, tinh trùng sN b0 teo l/i, nh!ng v'n có tinh trùng s ng !"c = nhi t . th#p ho-c siêu th#p chAng h/n âm 1960C. Trong quá trình làm l/nh, n!+c ngo/i bào ông b ng làm áp su#t thGm th#u chênh l ch, n!+c n.i bào thoát ra kh1i tinh trùng và ti p t6c ông b ng ph,n ngo/i bào. Có 80% n!+c n.i bào b0 ông l/nh = âm 150C và !"c thoát ra ngoài do ó ng n ngBa !"c hi n t!"ng ông b ng n.i bào (Hà V n Chiêu, 1999).
- Ph,n l+n n!+c n.i bào thoát ra kh1i tinh trùng = âm 300C. Tinh trùng có th5 ch0u l/nh = âm 300C, có th5 t)n t/i !"c = âm 1960C, còn t bào bình th!*ng
thì b0 phá h y, tuy nhiên c4ng có tinh trùng không có kh n ng ch0u l/nh do các
bi n >i lý - hoá - sinh x y ra. NhFng bi n >i lý - hóa - sinh có th5 x y ra trong t bào b0 phá h y = nhi t . th#p, thay >i trong c#u trúc n.i bào là do thay >i liên k t hydro = chuIi polyme. S ông -c hóa không th5 quay tr= l/i nh! c4 và s k t t a protein do m#t n!+c c a nguyên sinh ch#t (Iritani, 1980).
1.4.2.3. Hi n t ng ông b ng ngo i bào
Trong khi ông l/nh ngo/i bào, sN x y ra hi n t!"ng n)ng . ch#t hòa tan
kèm theo áp su#t thGm th#u t ng lên và kéo theo nhFng thay >i v3 . pH. Các
ch#t i n gi i nh! Natri và Kali có nhi3u nh#t trong tinh thanh và chúng t)n t/i = d/ng Natri clorua, Kali clorua. L i5m eutectic, n)ng . các mu i này cao nh#t,
là khi nhi t . âm 21,20C i v+i Natri clorua và âm 11,10C i v+i Kali clorua
và biên . nhi t . này có h/i cho tinh trùng. Do có s t ng n)ng . ch#t hòa tan i kèm v+i t ng áp su#t thGm th#u c4ng nh! pH thay >i t#t c x y ra trong biên
. nhi t . này, mà ng!*i ta không rõ cái gì có tác h/i nh#t n tinh trùng (Hà
V n Chiêu, 1999).
1.4.2.4. Chuy n ng c a n c và s dãn n c a tinh th n c
- Hi n t!"ng gi i ông gi ng nh! ông l/nh có nh h!=ng n tinh trùng
trùng và s dãn n= c a các tinh th5 n!+c á trong quá trình ông l/nh ho-c tan b ng có th5 gây t>n th!&ng tinh trùng. B t khí t)n t/i trong tinh th5 b ng c4ng có th5 gây t>n h/i tinh trùng trong quá trình này (Hà V n Chiêu, 1999).
- Các t>n th!&ng trên có th5 lo/i trB !"c bMng cách gi m kích c% các tinh th5 b ng và làm t ng s l!"ng tinh th5 nh1 h&n. T c . làm l/nh nhanh có th5 làm t ng tinh th5 nh1. Nói cách khác là khi làm l/nh nhanh sN ng n ch-n !"c s l+n lên c a các tinh th5 b ng trong dung d0ch và t/o i3u ki n ông l/nh gi ng
nh! th y tinh hóa. Tuy v y, b ng th y tinh g)m các tinh th5 b ng sN không >n
0nh = nhi t . trên âm 1290C và s chuy5n .ng và tái tinh th5 hóa c a chúng sN gây t>n h/i t bào tinh trùng. Chuy5n .ng sN t ng lên = trên âm 400C và d gây t>n h/i tinh trùng -c bi t là = kho ng âm 200C (Masuda, 1992).
- NhFng nh h!=ng trên có th5 gây bi n >i hình thái tinh trùng, -c bi t là s d0 hình acrosome; gây rò r( lipide ra kh1i th5 (nh, = tinh trùng bò c th#y rõ hi n t!"ng rò r( choline plasmalogen, lecithin và sphingomielin, gây ra phá
h y màng sinh ch#t và gi m ngu)n n ng l!"ng cho t bào tinh trùng; gây hi n
t!"ng th#m qua c a các h"p ch#t vô c&, v+i tinh trùng bò c, ion K+ và Mg+ ra kh1i t bào còn ion Na+ và Ca+ thì = l/i; các h"p ch#t cao phân tD thoát kh1i tinh
trùng nh! các enzyme g)m: Hyaluronidase, lactic dehyrogenase, glutamic-
oxaloacetic transaminase và alkaline phosphatase.
- Nói chung, hi n t!"ng ông b ng làm gi m s c s ng, s c v n .ng và trao (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
>i ch#t, có kho ng tB 10% n 50% s tinh trùng trong tinh d0ch b0 ch t, m-c dù ã !"c pha vào môi tr!*ng có ch a glyceryl. Tuy nhiên, các tinh trùng s ng có c các tinh trùng v n .ng và trao >i ch#t kém. S gi m trao >i ch#t c a tinh trùng th#y rõ = quá trình glycolysis h&n là quá trình hô h#p (Masuda, 1992).
1.4.3. M t s y u t làm t ng s c kháng ông c a tinh trùng
Khi ông l/nh ho-c gi i ông, các hi n t!"ng nêu trên sN e do/ s s ng
c a tinh trùng, nh!ng khi có bi n pháp ch ng ông thì kh n ng t)n t/i c a tinh
trùng là th c t . Các y u t sau ây giúp tinh trùng t)n t/i khi ông l/nh ho-c
1.4.3.1. Thành ph n c a môi tr ng pha loãng
- Thành ph,n c& b n c a môi tr!*ng pha loãng tinh d0ch là !*ng
saccharid, ch#t m và lòng 1 tr ng gà. S c s ng c a tinh trùng khi ông l/nh
và gi i ông khác nhau tùy theo các thành ph,n này.
- N)ng . t i !u c a lòng 1 tr ng tB 15% n 20%, n u n)ng . này quá
th#p ho-c quá cao thì không t t cho tinh trùng, m-c dù lòng 1 tr ng ã b o v
tinh trùng không b0 t>n h/i trong khi ông l/nh. Ch c n ng này ch y u do tác
.ng c a lipoprotein và lecithin trong lòng 1. !*ng saccharide óng vai trò
quan tr ng trong môi tr!*ng, do tác .ng n áp su#t thGm th#u, nó có tác d6ng
b o v tinh trùng khi = nhi t . th#p và là ngu)n n ng l!"ng cho tinh trùng.
- NhFng saccharide có kh i l!"ng phân tD cao, làm cho ho/t l c c a tinh trùng t t h&n sau khi ông l/nh và gi i ông. Các saccharide có phân tD l!"ng cao (tính theo phân tD l!"ng gi m d,n) bao g)m. Trisaccharide, disaccharide, hexoses
và pentone. Trong s hexose thì glucose có hi u qu nh#t, còn các ch#t a !*ng
polysaccharide thì ít có tác d6ng. B o v l/nh bMng saccharide là nh* có nhi3u nhóm
hydroxy (-OH) trong c#u trúc, do ó có xu h!+ng hình thành liên k t hydro.
- Ch#t m có vai trò quan tr ng trong duy trì màng sinh ch#t c a tinh trùng
khi ông l/nh và khi gi i ông, trong kích thích trao >i ch#t di n ra bình th!*ng =
tinh trùng sau gi i ông )ng th*i duy trì s c s ng c a chúng. Ch#t m ph i phù
h"p nh! là môi tr!*ng khi ông l/nh và ph i có -c tính sau:
+ Duy trì m c th#p nh#t v3 s t>n h/i cho tinh trùng do các mu i gây ra. + Ph i tan trong n!+c v+i hMng s phân ly i n tích là 6-8.
+ Kh n ng th#m qua màng sinh ch#t ph i th#p và có s c 3 kháng m/nh v+i các enzyme. m ion zwitter có nhFng tính ch#t trên nên nó t t h&n so v+i m
phosphat ho-c m Natri citrat. m ion zwitter là Trihydroxy methylaminomethane
(Tris) và N-hydroxymethyl-2- aminoethanesulfonic acid (TES). + B o qu n = 50C tr!+c khi ông l/nh
- B o qu n = 50C tr!+c khi ông l/nh sN t ng c!*ng s c kháng ông cho
tinh trùng bò. Thông th!*ng tinh bò sau khi khai thác và tiêu chuGn pha ch
+ Pha loãng l,n ,u tinh d0ch = 350C. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
+ Làm l/nh d,n xu ng 50C và b o qu n tB 1,5 n 2 gi* (cách 1).