L *i cam oan
1.4.3.M.t sy ut làm t ng sc kháng ông ca tinh trùng
Khi ông l/nh ho-c gi i ông, các hi n t!"ng nêu trên sN e do/ s s ng
c a tinh trùng, nh!ng khi có bi n pháp ch ng ông thì kh n ng t)n t/i c a tinh
trùng là th c t . Các y u t sau ây giúp tinh trùng t)n t/i khi ông l/nh ho-c
1.4.3.1. Thành ph n c a môi tr ng pha loãng
- Thành ph,n c& b n c a môi tr!*ng pha loãng tinh d0ch là !*ng
saccharid, ch#t m và lòng 1 tr ng gà. S c s ng c a tinh trùng khi ông l/nh
và gi i ông khác nhau tùy theo các thành ph,n này.
- N)ng . t i !u c a lòng 1 tr ng tB 15% n 20%, n u n)ng . này quá
th#p ho-c quá cao thì không t t cho tinh trùng, m-c dù lòng 1 tr ng ã b o v
tinh trùng không b0 t>n h/i trong khi ông l/nh. Ch c n ng này ch y u do tác
.ng c a lipoprotein và lecithin trong lòng 1. !*ng saccharide óng vai trò
quan tr ng trong môi tr!*ng, do tác .ng n áp su#t thGm th#u, nó có tác d6ng
b o v tinh trùng khi = nhi t . th#p và là ngu)n n ng l!"ng cho tinh trùng.
- NhFng saccharide có kh i l!"ng phân tD cao, làm cho ho/t l c c a tinh trùng t t h&n sau khi ông l/nh và gi i ông. Các saccharide có phân tD l!"ng cao (tính theo phân tD l!"ng gi m d,n) bao g)m. Trisaccharide, disaccharide, hexoses
và pentone. Trong s hexose thì glucose có hi u qu nh#t, còn các ch#t a !*ng
polysaccharide thì ít có tác d6ng. B o v l/nh bMng saccharide là nh* có nhi3u nhóm
hydroxy (-OH) trong c#u trúc, do ó có xu h!+ng hình thành liên k t hydro.
- Ch#t m có vai trò quan tr ng trong duy trì màng sinh ch#t c a tinh trùng
khi ông l/nh và khi gi i ông, trong kích thích trao >i ch#t di n ra bình th!*ng =
tinh trùng sau gi i ông )ng th*i duy trì s c s ng c a chúng. Ch#t m ph i phù
h"p nh! là môi tr!*ng khi ông l/nh và ph i có -c tính sau:
+ Duy trì m c th#p nh#t v3 s t>n h/i cho tinh trùng do các mu i gây ra. + Ph i tan trong n!+c v+i hMng s phân ly i n tích là 6-8.
+ Kh n ng th#m qua màng sinh ch#t ph i th#p và có s c 3 kháng m/nh v+i các enzyme. m ion zwitter có nhFng tính ch#t trên nên nó t t h&n so v+i m
phosphat ho-c m Natri citrat. m ion zwitter là Trihydroxy methylaminomethane
(Tris) và N-hydroxymethyl-2- aminoethanesulfonic acid (TES). + B o qu n = 50C tr!+c khi ông l/nh
- B o qu n = 50C tr!+c khi ông l/nh sN t ng c!*ng s c kháng ông cho
tinh trùng bò. Thông th!*ng tinh bò sau khi khai thác và tiêu chuGn pha ch
+ Pha loãng l,n ,u tinh d0ch = 350C.
+ Làm l/nh d,n xu ng 50C và b o qu n tB 1,5 n 2 gi* (cách 1). + Pha loãng l,n hai v+i môi tr!*ng có ch a glycerol.
+ Cân bMng trong 2 n 3 gi*.
+ ông l/nh tinh trùng. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
+ B o qu n tinh trùng ã làm l/nh = 50C tr!+c khi pha loãng l,n hai ã
nâng cao áng k5 t@ l s ng c a tinh trùng sau khi ông l/nh và gi i ông.
- M.t cách khác (cách 2) c a ph!&ng pháp này là b o qu n qua êm (tB
20 n 22 gi*), tinh trùng ã làm l/nh = 50C, tr!+c khi pha loãng l,n hai. S c
s ng c a tinh trùng theo cách xD lý hai t t h&n so v+i cách sD lý thông th!*ng
(cách 1). Cách 3 là b o qu n tinh trùng qua êm khi ã cân bMng v+i glycerol
trong 20 n 22 gi*, = 50C sau khi pha loãng l,n hai. Cách hai t t h&n nhi3u so
v+i cách 3 và i3u này th5 hi n s c kháng ông c a tinh trùng có khác nhau tùy
theo giai o/n nh/y c m v+i nhi t . th#p (Takahashi, 1992).
1.4.3.2. N ng c a glycerol và th i gian cân b ng
Hình 1.10. nh h ;ng c a glycerol trong dung d0ch NaCl so v6i n8ng .:
NaCl trong dung d0ch còn l,i khi dung d0ch NaCl (0,154M) . *c .ông l,nh (Masuda, 1992)
- N)ng . glycerol trong môi tr!*ng pha loãng cu i cùng 5 làm ông l/nh tinh trùng bò vào kho ng 7%, nh!ng t@ l này có h&i khác nhau tùy theo các thành ph,n c a môi tr!*ng pha loãng. N)ng . t i !u cho s c s ng c a tinh trùng là 11% v+i sFa khD b&. N)ng . glycerol trong môi tr!*ng pha loãng có m i t!&ng quan áng tin c y v+i t c . gi i ông, ó là n)ng . glycerol cao trong môi
tr!*ng pha loãng là c,n thi t cho t c . gi i ông nhanh (Masuda, 1992).
- Th*i gian tB lúc b> sung glyceryl vào môi tr!*ng pha loãng (pha loãng
l,n hai) n khi b2t ,u làm ông l/nh !"c g i là th*i gian cân bMng glycerol.
1.4.3.3. T c làm l nh
- T c . làm l/nh quá nhanh sN gây t>n h/i t+i tinh trùng vì nó gây ra siêu l/nh, th5 vGn và n!+c l!u giF trong t bào. i3u ó gây ra ông l/nh ngo/i bào
và sau ó ông l/nh n.i bào. T c . làm l/nh ch m sN gây ra t p trung n)ng .
cho c dung d0ch ngo/i bào và dung d0ch n.i bào và sN làm r i lo/n t bào, ây !"c coi là nh h!=ng c a dung d0ch. T c . làm l/nh t i !u là t c . làm gi m t i a c ông l/nh n.i bào và nh h!=ng c a dung d0ch.
- T c . làm l/nh t i !u này khác nhau không ch( theo lo/i t bào mà còn
theo các y u t nh! các thành ph,n c a th5 vGn t bào và lo/i ch#t ch ng ông
b ng. ChAng h/n dung d0ch !*ng saccharide !"c ông l/nh nhanh ( ông l/nh
tB 2 n 4 phút, 50C xu ng âm 790C), cho ho/t l c tinh trùng sau gi i ông cao
h&n so v+i ông l/nh ch m ( ông l/nh 45 phút, tB 50C xu ng âm 790C), vì ã ng n c n !"c nh h!=ng c a dung d0ch. Môi tr!*ng pha loãng có n)ng . glycerol tB 5 n 7% !"c ông l/nh nhanh ( ông l/nh tB 3 n 5 phút, tB 50C xu ng -1300C) cho ho/t l c tinh trùng cao h&n so v+i ông l/nh ch m ( ông l/nh
tB 20 n 40 phút, tB 50C xu ng âm 790C)(Masuda, 1992).
1.4.3.4. T c gi i ông
- T c . gi i ông tinh ông l/nh có nh h!=ng l+n n s c s ng, ho/t l c,
Hình 1.11. Bi n .>i v1t lý trong t bào khi .ông l,nh (Mazur, 1980)
- Gi i ông tinh c ng r/ bMng n!+c 350C s c s ng tinh trùng cao h&n so v+i n!+c 40C ho-c 200C. Gi i ông = n!+c tB 350C n 750C c4ng cho t@ l acrosome bình th!*ng cao h&n so v+i n!+c 40C ho-c 200C. Nh!ng n u gi i ông bMng n!+c có nhi t . cao h&n nFa, chAng h/n n!+c 900C, sN làm gi m s c s ng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
c a tinh trùng. N u tinh trùng !"c b o qu n = nhi t . 370C sau khi gi i ông,
c ng r/ nào !"c gi i ông nhanh = nhi t . cao h&n sN có s c s ng tinh trùng cao h&n.
1.4.3.5. Th i gian b o qu n
- Tinh trùng ông l/nh ph i luôn luôn !"c b o qu n ng p chìm trong nit& l1ng (âm 1960C), n u b o qu n t t sau vài ch6c n m, t@ l s ng và s c ho/t .ng c a tinh trùng v'n không thay >i, kh n ng th6 tinh v'n không b0 gi m (Hà V n
Chiêu, 1996). L Th6y S?, tinh bò ông l/nh b o qu n 20 n m v'n th6 tinh và bò
mJ C bê con ngày 25/7/1975.
- L Nh t B n, tinh c ng r/ b o qu n tB 4 n m n 13 n m v'n có ho/t l c
tinh trùng sau gi i ông tB 45% n 55% và có t@ l th6 tinh 54%. Có nhi3u tr!*ng h"p tinh ông l/nh b o qu n 20 n m v'n có t@ l th6 tinh cao, lên n 69,8% (Masuda, 1992).
1.5. Tình hình nghiên c+u trong và ngoài n 6c
1.5.1. L ng xu t tinh
- L!"ng xu#t tinh (kh i l!"ng tinh d0ch, th5 tích tinh d0ch:V) là s ml tinh d0ch l#y !"c trong m.t l,n xu#t tinh thành công (ml/l,n khai thác). L!"ng xu#t tinh liên quan ch-t chN t+i gi ng, tu>i, ch . ch m sóc, nuôi d!%ng, kích th!+c d0ch hoàn, mùa v6, m c . kích thích tính d6c tr!+c khi l#y tinh, ph n x/ nhGy giá và k? thu t khai thác tinh.
- Garner et al. (1996) cho bi t, bò c gi ng Holstein Friesian trC có l!"ng xu#t tinh ít h&n bò tr!=ng thành. L bò c gi ng, l!"ng xu#t tinh bình quân th!*ng tB 5 n 6 ml, dao .ng tB 2ml n 12ml. N u l#y tinh hai l,n thì l!"ng xu#t tinh thu !"c l,n l#y th hai th!*ng cao h&n l,n l#y ,u.
- Trong th c t s n xu#t, không ph i tinh d0ch c a l,n l#y tinh nào c4ng
/t tiêu chuGn pha ch và s n xu#t tinh ông l/nh (Hoàng Kim Giao và Nguy n
Thanh D!&ng, 1997), ch( nhFng l,n l#y tinh qua ki5m tra ánh giá có các ch( tiêu /t tiêu chuGn quy 0nh c a tBng n!+c, = Vi t Nam theo tiêu chuGn Vi t Nam
TCVN 8925 : 2012 quy 0nh ho/t l c tinh trùng ≥70%, n)ng . tinh trùng ≥800
tri u tinh trùng/ml, k$ hình tinh trùng ph i nh1 h&n 20% m+i tiêu chuGn pha ch s n xu#t tinh ông l/nh, n u không /t tiêu chuGn thì lo/i b1 ngay.
- Theo nghiên c u c a Brito et al. (2002), = Brazil, bò c gi ng nói
chung có l!"ng xu#t tinh tB 6,0ml/l,n khai thác n 7,8 ml/l,n khai thác; = bò c gi ng Holstein Friesian có l!"ng xu#t tinh trung bình /t 7,0 ml/l,n khai thác; trong lúc ó, = bò c gi ng Brahman có l!"ng xu#t tinh trung bình /t 6,6 ml/l,n khai thác. Tác gi Sarder (2003) cho bi t, l!"ng xu#t tinh c a bò c gi ng = Pakistan tB 5 ml/l,n khai thác n 6 ml/l,n khai thác.
- Nghiên c u trên gi ng bò Brahman nuôi t/i Florida, M?, Michael et al.
(1982) cho bi t, l!"ng xu#t tinh trung bình /t 5,3ml/l,n khai thác. Leon et al.
(1991) nghiên c u trên 30 bò c Nâu Th6y S? và 30 bò c Zêbu cho bi t,
l!"ng xu#t tinh /t 6,4ml/l,n khai thác. Ahmad et al.(2003) nghiên c u trên bò
c gi ng Sahiwal = Pakistan cho bi t l!"ng xu#t tinh /t 4,59ml/l,n khai thác.
tâm th6 tinh nhân t/o Singosari = Indonesia bi n .ng tB 2 ml/l,n khai thác n 14 ml/l,n khai thác.
- T/i Vi t Nam, Hà V n Chiêu (1999) nghiên c u trên àn bò c
Holstein Friesian và Brahman nuôi t/i Vi t Nam công b : = bò c gi ng
Holstein Friesian l!"ng xu#t tinh trung bình /t 5,7 ml/l,n khai thác và = bò c gi ng Brahman l!"ng xu#t tinh trung bình /t 4,25 ml/l,n khai thác.
- K t qu nghiên c u c a Tr,n Tr ng Thêm và cs. (2004) trên bò c
gi ng Holstein Friesian cho bi t l!"ng xu#t tinh bi n .ng tB 3ml/l,n khai thác n 5ml/l,n khai thác. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
- Nghiên c u trên nhóm bò lai F3- Holstein Friesian, Nguy n V n c và
cs. (2004) công b , l!"ng xu#t tinh bình quân là 4,11ml/l,n khai thác; Lê Bá Qu
và cs. (2009), nghiên c u trên bò c gi ng Holstein Friesian tr!=ng thành cho
bi t l!"ng xu#t tinh trung bình /t 7,41 ml/l,n khai thác. Phùng Th H i và cs.
(2009), nghiên c u trên bò c gi ng Holstein Friesian trC sinh ra t/i Vi t Nam
công b l!"ng xu#t tinh /t 5,42 ml/l,n khai thác. Ph/m V n Ti3m và cs. (2009),
nghiên c u trên bò c gi ng Brahman cho bi t l!"ng xu#t tinh /t 6,89 ml/l,n
khai thác.
1.5.2. Ho t l c tinh trùng
- Ho/t l c tinh trùng (A) là s c s ng hay s c ho/t .ng c a tinh trùng, là
ch( tiêu th5 hi n s l!"ng tinh trùng ho/t .ng ti n thAng trong tinh d0ch và !"c
x p theo ph,n tr m, tB 0% n 100%.
- Tinh trùng ti n thAng !"c là nh* c#u trúc -c bi t c a uôi và ngu)n n ng l!"ng tB lò xo ty th5. T c . di chuy5n ti n thAng c a tinh trùng ph6 thu.c vào các i3u ki n n.i t/i và ngo/i c nh nh! gi ng, cá th5, niêm d0ch !*ng sinh d6c ti t ra nhi3u hay ít và . co bóp c a các b. ph n sinh d6c c a con cái (Tr,n Ti n D4ng và cs., 2002). Ho/t l c tinh trùng có liên quan ch-t chN t+i t@ l th6
thai trên àn bò cái (Eric et al., 1943, Mostari et al., 2005).
- Theo Tr,n Ti n D4ng và cs. (2002), tu$ theo s c s ng mà tinh trùng sN
+ Ti n thAng: là s v n .ng c a tinh trùng mà ph!&ng th c vect& v n .ng >n 0nh.
+ Xoay vòng: là v n .ng c a tinh trùng mà ph!&ng th c vect& luôn b0
thay >i.
+ L2c l!: là s v n .ng c a tinh trùng nh!ng h,u nh! không có vect& v n .ng, không thay >i v0 trí t!&ng i c a chúng.
- Ch( có tinh trùng v n .ng ti n thAng m+i có kh n ng tham gia quá trình
th6 tinh. Do v y ng!*i ta ánh giá ch#t l!"ng tinh d0ch thông qua !+c l!"ng t@ l tinh trùng ti n thAng ho-c m c "sóng .ng’’ c a m-t thoáng vi tr!*ng tinh d0ch do ho/t l c c a tinh trùng t/o nên.
- Trong s n xu#t tinh bò ông l/nh, ch( nhFng l,n khai thác tinh d0ch có ho/t l c tinh trùng tB 70% tr= lên m+i !"c !a vào pha ch 5 s n xu#t tinh
ông l/nh.
- K t qu c a Michael et al. (1982) nghiên c u trên gi ng bò Brahman t/i
Florida, M? cho bi t ho/t l c tinh trùng /t 47%. Theo nghiên c u c a Masuda
(1992) trên bò c gi ng Holstein Friesian = Nh t B n, ho/t l c c a tinh trùng
dao .ng tB 60 % n 90 %. Sugulle (1999) công b , ho/t l c tinh trùng = bò
c gi ng t/i Bangladesh /t tB 60% n 68%.
- Nghiên c u c a Brito et al. (2002) t/i Brazil th#y rMng, ho/t l c tinh trùng
c a bò c gi ng Holstein Friesian /t tB 57,5% n 61,2 % trên bò c gi ng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Brahman /t 59 %. Ahmad et al. (2003) nghiên c u trên bò c gi ng Sahiwal =
Pakistan cho bi t ho/t l c tinh trùng /t 65,14%. Tatman et al. (2004) nghiên c u
trên bò Brahman = M? cho bi t ho/t l c tinh trùng trung bình /t 60,0%.
- Hoflack et al. (2006) nghiên c u trên bò c gi ng Holstein Friesian =
B( cho bi t, ho/t l c tinh trùng dao .ng tB 40% n 95%. Hoflack et al. (2008)
nghiên c u = bò c gi ng Belgian Blue t/i B( công b s dao .ng ho/t l c tinh
trùng r#t l+n tB 5% n 90%.
- T/i Vi t Nam, Hà V n Chiêu (1999) cho bi t, ho/t l c tinh trùng c a
gi ng bò Holstein Friesian nuôi = Vi t Nam /t 61,82% và ho/t l c tinh trùng
- Nguy n V n c và cs (2004) công b , ho/t l c tinh trùng bình quân
c a bò c gi ng Holstein Friesian lai /t 61,77% = bò c gi ng F2- Holstein
Friesian và 51,79% = bò c gi ng F3–Holstein Friesian.