4. kết quả và thảo luận
4.2.2. Đặc điểm hình thái của nấm gây bệnh thán th− trên vả
Chúng tôi tiến hành phân lập nấm từ những mẫu thu đ−ợc ở ngoài đồng có triệu chứng của bệnh thán th− tại phòng thí nghiệm Trung tâm Phân tích giám định và Thí nghiệm Kiểm dịch thực vật - Cục Bảo vệ thực vật. Sau quá trình nuôi cấy thu đ−ợc 3 loại nấm thuần đ−ợc ký hiệu lần l−ợt Al, Fu và Co. Để tìm hiểu rõ tác nhân gây ra bệnh thán th− chúng tôi tiếp tục lây bệnh trở lại đối với cả 3 loại nấm trên ở điều kiện thí nghiệm trong phòng. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 2.
Bảng 2- Xác định tác nhân gây bệnh thán th− hại vải
Ký hiệu
mẫu nấm Đặc điểm hình dạng của nấm
Số mẫu lây
bệnh
Số mẫu thể
hiện triệu
Al Sợi nấm màu nâu nhạt. Cành bào tử phân sinh ngắn, mọc thành cụm, màu nâu. Bào tử mọc thành chuỗi, đa bào, hình chuỳ, màu nâu, có vách ngăn ngang và dọc, có cổ dài và hẹp.
15 0
Fu Sợi nấm màu trắng. Cành bào tử không màu, mọc thẳng. Bào tử không màu, cong hình l−ỡi liềm, có nhiều vách ngăn.
15 0
Co Sợi nấm màu xám nhạt. Đĩa cành màu nâu nhạt, bào tử đơn bào hình ovan, không màu, có giọt dầu, có lông cứng màu nâu đậm.
15 12
Sau thí nghiệm chúng tôi nhận thấy: Chỉ ở những mẫu đ−ợc lây nhiễm nấm có ký hiệu Co mới biểu hiện triệu chứng đốm giống với triệu chứng trên mẫu thu đ−ợc ban đầu với tỷ lệ 80%, còn đối với những nấm ký hiệu Al và Fu
trên mẫu lây bệnh không biểu hiện triệu chứng. Vì vậy, chúng tôi khẳng định loại nấm ký hiệu Co chính là tác nhân gây ra triệu chứng thán th− trên vải và tiến hành nghiên cứu tìm hiểu đặc điểm hình thái, sinh học của loại nấm này trong thời gian tiếp theo.
Trên môi tr−ờng PDA tản nấm có màu trắng đến màu xám nhạt, ở chính giữa tản nấm hơi phồng lên, càng ra phần dìa mép càng xẹp dần. Sợi nấm đâm nhánh, đa bào, không màu hoặc nâu nhạt.
Đĩa cành hình thành trên cả 2 mặt vết bệnh mọc qua lớp biểu bì của ký chủ, hình cầu, kích th−ớc 110-132 àm. Trên đĩa cành có nhiều lông cứng màu
nâu đậm, hình trụ, mọc thẳng, có 1-2 vách ngăn, phần gốc hơi phồng nhẹ và thon dần ở đỉnh, kích th−ớc 32-38 x 4 àm. Cành bào tử phân sinh hình trụ ngắn. Bào tử phân sinh hình trụ, không màu, có 02 giọt dầu ở hai đầu, kích th−ớc 12,5-15 x 4-5 àm.
Qua theo dõi chúng tôi nhận thấy sau khi cấy trên môi tr−ờng PDA khoảng từ 4 - 4,5 ngày, bào tử nấm bắt đầu xuất hiện ở khu vực giữa của tản nấm, khoảng 5 - 6 ngày sau cấy bào tử nấm xuất hiện trên hầu hết các vị trí của tản nấm và đĩa cành xuất hiện các lông gai màu nâu.
Khi nuôi cấy ở điều kiện trong phòng thí nghiệm (nhiệt độ 25 - 28°C và ẩm độ bão hoà), bào tử nấm bắt đầu nảy mầm sau 10 - 12 giờ. Sau 12 - 24 giờ, ống mầm phát triển dài ra và hình thành các giác bám hình quả đấm, màu nâu nhạt đến nâu tối. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 3:
Bảng 3- Đặc điểm hình thái của bào tử và cơ quan sinh sản nấm gây bệnh thán th− trên vải (*)
Đĩa cành Bào tử Lông gai
Tản nấm Hình dạng Kích th−ớc Hình dạng Kích th−ớc Hình dạng Kích th−ớc
Hơi phồng lên ở giữa và xẹp dần về phía dìa mép, màu trắng đến màu xám nhạt Hình cầu 110 - 132 àm Hình trụ, không màu, không có vách ngăn, hai đầu hơi tròn và bên trong có hai giọt dầu Chiều dài 12,5 - 15 àm, chiều rộng 4 - 5 àm Hình trụ, mọc thẳng, có 1-2 vách ngăn, màu nâu, hơi phồng nhẹ ở phần gốc và thon dần về phía đỉnh 32 - 38 x 4 àm
Ghi chú: (*): Nấm đ−ợc nuôi cấy trên môi tr−ờng PDA
Từ kết quả thu đ−ợc ở bảng 3, triệu chứng bệnh trên đồng ruộng kết hợp so sánh và đối chiếu với các khoá phân loại của L. Roger, 1951; Sutton và Cannon, 1996; Barnett và Barry, 1998, b−ớc đầu chúng tôi xác định bệnh thán th− hại vải tại khu vực Hà Nội và các vùng phụ cận là do nấm Colletotrichum gloeosporioides gây ra.
Nấm có giai đoạn vô tính thuộc: Họ: Melanconiaceae
Bộ: Melanconiales
Lớp: Deuteromycetes
và giai đoạn hữu tính có tên là Glomerella cingulata thuộc: Họ: Phyllachoraceae
Bộ: Polysticmatales
Sau khi thu đ−ợc dòng thuần nấm gây bệnh thán th− hại vải, chúng tôi tiến hành một số thí nghiệm nghiên cứu đặc điểm sinh học của nấm để tìm hiểu khả năng sinh tr−ởng và gây hại của chúng.