4. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.2.1. Kết quả ựịnh typ vi khuẩn Actinobacillus, Pasteurella phân lập ựược
ựược
Chúng tôi tiến hành ựịnh typ huyết thanh học của các chủng vi khuẩn
A.pleuropneumoniae phân lập ựược dựa vào kháng huyết thanh chuẩn của Nhật Bản và Úc. Còn với các chủng vi khuẩn P.multocida, chúng tôi sử dụng phản ứng Multiplex - PCR ựể xác ựịnh các typ giáp mô A, B, D của các chủng P.multocida phân lập ựược theo quy trình ựã ựược chuẩn hóa của Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y (đỗ Ngọc Thúy và cs, 2007).
Kết quả xác ựịnh serotyp của các chủng vi khuẩn A.pleuropneumoniae
và P.multocida phân lập ựược trình bày ở bảng 4.4
Kết quả ở bảng 4.4 cho thấy: 10 chủng A.pleuropneumoniae phân lập ựược chọn ựều thuộc các serovar 2 và 5. Trong ựó, ựa số các chủng thuộc về serovar 2, với 7/10 chủng, chiếm tỷ lệ 70,0%; Tiếp ựến là 3 chủng thuộc serovar 5, chiếm tỷ lệ 30,0%, không có chủng nào thuộc serovar 1.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 43
Bảng 4.4 Kết quả xác ựịnh serotyp của các chủng vi khuẩn
A.pleuropneumoniae và P.multocida phân lập ựược sử dụng chế vacxin
Vi khuẩn Số chủng thử Phương pháp Kết quả ựịnh typ Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Serovar 1 0 0,0 Serovar 2 7 70,0 A.pleuropneumoniae 10 Ngưng kết, PCR Serovar 5 3 30,0 Serotyp A 6 60,0 P.multocida 10 Ngưng kết, PCR Serotyp D 4 40,0
Như vậy, các chủng A.pleuropneumoniae mà chúng tôi phân lập ựược ựều thuộc serovar 2 và 5, kết quả này có thể thấy vai trò gây bệnh viêm phổi của lợn của A.pleuropneumoniae tại nước ta thuộc serovar 2 và 5, ựặc biệt là serovar 2.
- Với vi khuẩn P.multocida: Giáp mô là yếu tố ựộc lực quan trọng của vi khuẩn P.multocida, nó ựóng vai trò quan trọng trong quá trình gây bệnh của vi khuẩn này. P.multocida ựược chia làm 5 typ giáp mô là A, B, D, E và F tùy thuộc vào cấu trúc của Polysaccharide bề mặt. Trong ựó các typ gây bệnh ở lợn ựược thông báo là A và D.
Các cặp mồi mà chúng tôi sử dụng cho phản ứng PCR ựịnh typ giáp mô vi khuẩn P.multocida là: CAPA-F và CAPA-R dùng ựể xác ựịnh typ A cho kắch cỡ sản phẩm là 1044bp, CAPB-F và CAPD-F và CAPD-R ựể xác ựịnh typ D cho sản phẩm là 657bp. Các bước tiến hành phản ứng PCR như ựã mô tả ở phần nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu.
Chúng tôi ựã tiến hành xác ựịnh serotyp của vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập ựược, kết quả ựược trình bày ở bảng 4.4 cho thấy: trong số 10 chủng Pasteurella multocida phân lập ựược chọn có 6 chủng thuộc serotyp A, chiếm tỷ lệ 60.0%, có 4 chủng thuộc serotyp D, chiếm tỷ lệ 40,0%.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 44
Như vậy, các chủng Pasteurella multocida mà chúng tôi phân lập ựược chọn ựều thuộc serotyp A và D, kết quả này có thể thấy vai trò gây bệnh viêm phổi của lợn của Pasteurella multocida tại nước ta thuộc serotyp A và D, ựặc biệt là serotyp A.
Hình 4.1: Kết quả của phản ứng PCR ựịnh typ vi khuẩn P.multocida