3. VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
3.5 PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨ U
3.5.1 Phương phỏp nghiờn cứu trong phũng
* Phương phỏp chẩn ủoỏn nhanh bệnh HXVK
- Lấy mẫu bệnh cú triệu chứng ủiển hỡnh, cắt ngang ủoạn thõn sỏt rễ dài 3 - 5 cm nhỳng trong cốc nước sạch, quan sỏt thấy dũng dịch màu trắng sữa chảy ra ủầu lỏt cắt, ủú là triệu chứng bệnh HXVK.
3.5.2 Phương phỏp ủiều tra bệnh HXVK ngoài ủồng ruộng
- điều tra bệnh HXVK dựa theo tài liệu của Bộ Nụng nghiệp và Phỏt triển nụng thụn (2006) Tiờu chuẩn ngành 10 TCN 982: 2006 BVTV [2].
- điều tra theo phương phỏp 5 ủiểm chộo gúc, mỗi ủiểm 50 - 70 cõy, cỏc ủiểm chọn ngẫu nhiờn, ủiều tra theo từng giai ủoạn sinh trưởng phỏt triển cõy trồng : giai ủoạn cõy con, giai ủoạn cõy ra hoa, ủậu quả, quả lớn, thu hoạch lứa ủầu... Dựa vào triệu chứng ủiển hỡnh của bệnh HXVK trờn ủồng ruộng tớnh tỷ lệ bệnh theo cụng thức: Tớnh tỷ lệ bệnh theo cụng thức: A TLB (%) = B X 100 Trong ủú : TLB : Tỷ lệ bệnh (%) A : Số cõy bị bệnh B : Tổng số cõy ủiều tra 3.5.3 Thớ nghiệm ngoài ủồng ruộng 3.5.3.1 Thớ nghiệm thăm dũ một số giống cà chua Thớ nghiệm ủỏnh giỏ khả năng khỏng bệnh HXVK, khả năng năng suất, chất lượng của một số giống cà chua chế biến trờn ủồng ruộng tại Trại giống rau Hải Phũng.
Thực hiện theo quy phạm khảo nghiệm ủược Bộ NN&PTNT ban hành cho cõy cà chua 10 TCN 219-95. Khảo nghiệm thăm dũ bố trớ trồng tuần tự
khụng nhắc lại.
Thớ nghiệm gồm cỏc giống cà chua mới thu thập và một số giống trồng phổ biến tại vựng nguyờn liệu Hải Phũng và phụ cận.
- Số lượng giống tham gia khảo nghiệm : 12 giống - Diện tớch ụ thớ nghiệm (1 giống) : 15 mỗ - Bố trớ tuần tự từng giống, khụng nhắc lại - Thời vụ trồng : vụủụng xuõn 2008 - địa ủiểm thực hiện : Trại giống rau Hải Phũng. Cỏc biện phỏp kỹ thuật ủược thực hiện ủồng ủều ở cỏc cụng thức thớ nghiệm : Phõn bún cho một sào : Phõn chuồng ủ mục : 500 kg đạm urea : 10 kg Lõn super : 30 kg Kalyclorua : 12 kg
Thuốc BVTV : Phun sõu ủục quả và bệnh sương mai
Chăm súc, tỉa cành ở cỏc cụng thức thớ nghiệm theo quy trỡnh thõm canh của Nhà mỏy, Sở Nụng nghiệp Hải Phũng và giới thiệu giống của cỏc Cụng ty cung ứng giống.
Theo dừi, thu thập số liệu ngoài ủồng và chỉ tiờu nghiờn cứu - Cỏch theo dừi :
+ Cốủịnh 10 cõy/1 ủiểm ủể theo dừi cỏc chỉ tiờu bằng phương phỏp
ủo ủếm trực tiếp.
+ Một số ủặc ủiểm nụng sinh học và sinh trưởng phỏt triển của cỏc giống khảo nghiệm. Hỡnh thỏi cõy, dạng hoa, quả, màu sắc thõn lỏ, quả, năng suất lý thuyết, năng suất thực thu.
+ Năng suất, cỏc yếu tố cấu thành năng suất của cỏc giống: số quả/cõy, trọng lượng quả, năng suất lý thuyết, năng suất thực thu. Cỏc chỉ tiờu ủịnh lượng dựng thước, cõnẦ ủểủo, ủếm. Cỏc chỉ tiờu ủịnh tớnh dựng trực quan ủể
quan sỏt ủỏnh giỏ.
+ Khả năng khỏng bệnh HXVK và một số bệnh chủ yếu trờn ủồng ruộng của cỏc giống cà chua khảo nghiệm.
- điểm ủỏnh giỏ sinh trưởng, phỏt triển, chống chịu của giống theo thang
ủiểm :
- điểm 1 : Sinh trưởng kộm, chống chịu rất kộm - điểm 3 : Sinh trưởng trung bỡnh, chống chịu kộm
- điểm 5 : Sinh trưởng trung bỡnh, chống chịu trung bỡnh - điểm 7 : Sinh trưởng khoẻ, chống chịu khỏ
- điểm 9 : Sinh trưởng khoẻ, chống chịu tốt + Chỉ tiờu về chất lượng quả :
Lấy mẫu quả theo vị trớ phõn bổ chựm quả trờn cõy, số lượng mẫu : 1 kg/giống.
Phõn tớch chất lượng quả cà chua tại Trung tõm kiểm tra chất lượng Rau quả, Nụng sản KCS Ờ Tổng Cụng ty Rau quả nụng sản Việt Nam và Phũng phõn tớch của Nhà mỏy chế biến cà chua Hải Phũng, bao gồm:
- độ Brix (% chất khụ hoà tan) : ủo bằng mỏy chiết quang kế
- độ cứng quả : ủo trờn mỏy (ủơn vị LB = kg/cm) - Hàm lượng axit (tớnh theo axit citric)
- Hàm lượng thịt quả : % sử dụng ủược
- Tiờu chuẩn nguyờn liệu : Căn cứ theo Tiờu chuẩn ngành TCN Ờ 2003 Cà chua nguyờn liệu chế biến do Bộ Nụng nghiệp và phỏt triển nụng thụn ban hành 2003.
- độ Brix: ≥ 4% - độủường: ≥ 2,5% - pH : 4,1 - 4,4%
- độ axit: 0,3 - 0,4% (tớnh theo Axit citric) - Màu A/B : ≥ 2,1 (chớn ủỏ tươi)
- Tiờu chuẩn chung : Chọn ủược cỏc giống cà chua thớch hợp từng thời vụ trồng. Cỏc giống lựa chọn phải ủạt năng suất cao vụủụng từ 40 tấn/ha trở
lờn, vụ xuõn hố ủạt từ 30 tấn/ha trở lờn, cú khả năng khỏng bệnh HXVK, ủạt tiờu chuẩn chất lượng nguyờn liệu chế biến bổ sung vào cơ cấu mựa vụ cho vựng sản xuất cung cấp nguyờn liệu cho NMCBCC Hải Phũng.
3.5.3.2 Thớ nghiệm ủỏnh giỏ khả năng phũng trừ bệnh HXVK hại cà chua
a. Nghiờn cứu, ủỏnh giỏ khả năng phũng trừ bệnh HXVK hại cà chua bằng
biện phỏp sử dụng chất kớch khỏng, chế phẩm sinh học (Bion, PenacP, Chitosan No1)
- Thớ nghiệm ủược tiến hành ở vụ xuõn hố 2009
- Số giống tham gia khảo nghiệm : 4 giống : DV987, DV988, K002 và VL510
- Mỗi giống gồm 5 cụng thức, bố trớ theo kiểu RCBD, mỗi cụng thức nhắc lại 3 lần, mỗi lần là 1 ụ cú diện tớch 25 mỗ.
+ Cụng thức 1 : Khụng xử lý thuốc (C. thức ủối chứng)
+ Cụng thức 2 : Xử lý thuốc Bion : xử lý ủất 3,6 gam/sào (100 gam/ha). Phun 3 lần vào giai ủoạn cõy con; giai ủoạn ra hoa - quả non và giai ủoạn sau thu ủợt 1. Liều lượng thuốc 100 gam/ha một lần phun.
+ Cụng thức 3 : Xử lý thuốc PenacP : xử lý ủất 2 gúi/sào (mỗi gúi 10 gram). Phun 3 lần như cụng thức 2, nồng ủộ 0,1%.
+ Cụng thức 4 : Xử lý thuốc Chitosan No1 : Phun 3 lần như 2 cụng thức trờn, nồng ủộ 0,1%.
+ Cụng thức 5 : Tổng hợp giữa phun thuốc Chitosan No1 : Phun 3 lần, nồng
ủộ 0,1% với kết hợp bún vụi (50 kg/sào Bắc Bộ) và làm luống cao (> 50 cm). Trong cụng thức 2 và 3 cú xử lý ủất trước khi trồng thỡ trộn cựng với ủất bột ủể bún vào cụng thức xử lý.
- địa ủiểm thực hiện : Trại giống rau Hải Phũng. - điều tra tỷ lệ bệnh vào giai ủoạn sau thu quảủợt 1. Tớnh ủộ hữu hiệu của thuốc theo cụng thức Abbott Q% = (1 Ờ Ta/Ca) x 100
Trong ủú : Q% - độ hữu hiệu của thuốc (hiệu lực của thuốc)
Ta Ờ Mức ủộ gõy hại ở ụ thớ nghiệm sau khi xử lý thuốc Ca - Mức ủộ gõy hại ở ụ ủối chứng sau khi xử lý thuốc - Chỉ tiờu theo dừi :
+ Khả năng phũng trừ bệnh HXVK của chất kớch khỏng, chế phẩm sinh học. Tớnh tỷ lệ (%) cõy bệnh và hiệu quả phũng trừ.
+ Khả năng năng suất, chất lượng quả cà chua của cỏc giống thớ nghiệm sử dụng chế phẩm.
b. Nghiờn cứu, ủỏnh giỏ khả năng phũng trừ bệnh HXVK hại cà chua bằng
biện phỏp sử dụng bún bổ sung bột tụm (vỏ tụm khụ nghiền)
- Thớ nghiệm ủược tiến hành ở vụ xuõn hố trờn 2 giống : VL510 và K002.
- Mỗi giống gồm 2 cụng thức, mỗi cụng thức nhắc lại 3 lần, mỗi lần là 1 ụ cú diện tớch 50 mỗ.
+ Cụng thức 1 : Khụng xử lý (C. thức ủối chứng)
+ Cụng thức 2 : Xử lý bún bổ sung bột tụm, lượng : 5 kg/sào - địa ủiểm thực hiện : Trại giống rau Hải Phũng.
- Chỉ tiờu theo dừi :
+ Khả năng phũng trừ bệnh HXVK bằng biện phỏp bún bổ sung bột tụm vào ủất trước khi trồng. Tớnh tỷ lệ (%) cõy bệnh và hiệu quả phũng trừ.
+ Khả năng năng suất, chất lượng quả cà chua của thớ nghiệm bún bổ sung bột tụm.
3.6 PHƯƠNG PHÁP XỬ Lắ SỐ LIỆU
Số liệu thu thập ủược tớnh toỏn và xử lý theo phương phỏp thống kờ sinh học sử dụng phần mền trờn mỏy tớnh theo chương trỡnh IRRISTAT và Excel.
4. KẾT QUẢ NGHIấN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.1 NHẬN BIẾT TRIỆU CHỨNG BỆNH HẫO XANH VI KHUẨN VÀ
PHƯƠNG PHÁP CHẨN đOÁN NHANH TRấN đỒNG RUỘNG
4.1.1 Triệu chứng bệnh hộo xanh vi khuẩn trờn ủồng ruộng
Bệnh xuất hiện trờn cõy con và cõy trưởng thành, nhưng gõy hại chủ
yếu từ ra hoa ủến thu hoạch ủợt ủầu. đặc ủiểm của bệnh là cõy hộo ủột ngột, chết nhanh mà lỏ khụng kịp chuyển màu vàng. Cõy mới bị bệnh thường hộo vào ban ngày, lỳc nắng to và tươi lại vào sỏng sớm và chiều mỏt, sau một vài ngày thỡ cõy hộo rũ rồi chết hẳn. Nếu cõy cà chua bị nhiễm bệnh ở giai ủoạn cõy con thỡ toàn bộ lỏ hộo rũ nhanh chúng, cõy gục xuống và sau 2 Ờ 3 ngày thỡ cõy chết hẳn. Nếu cõy bị nhiễm ở giai ủoạn trưởng thành từ giai ủoạn nụ
hoa trở ủi thỡ ban ủầu cỏc lỏ ngọn bị hộo rũ xuống trước, cú thể chỉ hộo một cành, một nhỏnh hoặc về một phớa, sau ủú lan xuống phớa dưới gốc và cỏc cành bỏnh tẻ, cỏc nhỏnh khỏc tiếp tục hộo xanh và cụp xuống. Ban ủầu cõy vẫn cũn khả năng hồi phục về ban ủờm và sỏng sớm, sau ủú toàn bộ cõy bị
hộo rũ tỏi xanh gục xuống và chết. Lừi cõy và rễ bị ỳng nước và sau ủú chuyển màu nõu. đụi khi lừi cõy trở nờn rỗng. Rễ cú thể mọc ra từ thõn cõy sau ủú chuyển vàng và thối rễ, số lỏ khụ và hộo tăng cho ủến khi cõy chết. Quan sỏt cõy bị nhiễm bệnh thường thấy phần vỏ thõn dưới gốc vẫn xanh, sự sỡ, khi cắt ngang thõn cành sẽ thấy cỏc bú mạch dẫn cú màu nõu ủen hoặc nõu sẫm, ấn mạnh vào ủầu lỏt cắt cú thể thấy dịch vi khuẩn màu trắng sữa tiết ra.
đõy là một trong những nột ủặc trưng ủiển hỡnh của bệnh HXVK hại cà chua
ủể phõn biệt với cỏc tỏc nhõn gõy hộo khỏc. Tuy nhiờn cũn cú thể ỏp dụng biện phỏp chẩn ủoỏn nhanh khỏc bằng phương phỏp giọt dịch (R. French, Carlos, Martin (1985) [45]. Khi cõy mới bị bệnh nếu cắt ngang ủoạn thõn gần rễ dài 3 - 5 cm nhỳng trong cốc nước sạch sau vài phỳt cú dũng dịch vi khuẩn
màu trắng sữa chảy ra ở ủầu lỏt cắt. đú là triệu chứng bệnh hộo xanh vi khuẩn. Chất dịch này ủược gọi là ooze và chứa nhiều vi khuẩn. Cỏc mụ thõn gỗ chuyển sang màu nõu và rễ cú thể bắt ủầu mọc ra từ thõn cõy. Vi khuẩn gõy thối nhũn cú thể xõm nhiễm vào cỏc bộ phận của cõy.
Cõy cà chua nhiễm bệnh vào mọi giai ủoạn sinh trưởng nhưng mạnh nhất vào thời kỳ cõy ra hoa kết quả, quả lớn.
Một số hỡnh ảnh bệnh hộo xanh vi khuẩn trờn cỏc giống ở cỏc ủiểm ủiều tra
a b
c d
Ảnh 4.1. Triệu chứng bệnh hộo xanh vi khuẩn gõy hại trờn cõy trồng vụ thu ủụng sớm 2008
(Nguồn: Dương Thị Nhung)
a,b,c. triệu chứng trờn cà chua giai ủoạn cõy con trờn giống Gandeeva, giai ủoạn ủang thu quả trờn giống Savior tại Bàng La - đồ Sơn.
e g
Ảnh 4.2. Triệu chứng bệnh hộo xanh vi khuẩn vụủụng xuõn 2008
e.triệu chứng trờn dưa chuột giống ủịa phương tại Kỳ Sơn Ờ Thuỷ Nguyờn
g. Triệu chứng trờn ớt chỉ thiờn tại An Dương
4.1.2 Phương phỏp chẩn ủoỏn nhanh bệnh HXVK
- Lấy mẫu bệnh cú triệu chứng ủiển hỡnh, cắt ngang ủoạn thõn sỏt rễ dài 3 - 5 cm nhỳng trong cốc nước sạch, quan sỏt thấy dũng dịch màu trắng sữa chảy ra ủầu lỏt cắt, ủú là triệu chứng bệnh HXVK.
Ảnh 4.3. Chẩn ủoỏn nhanh bệnh HXVK trờn giống cà chua Savior tại Bàng La - đồ Sơn Ờ HP vụ xuõn hố 2009
4.2 đIỀU TRA, đÁNH GIÁ MỨC đỘ PHỔ BIẾN, TÁC HẠI CỦA
BỆNH HXVK TRấN CÀ CHUA VÀ MỘT SỐ CÂY Kắ CHỦ VỤ THU
đễNG, đễNG XUÂN VÀ XUÂN Hẩ 2008 - 2009 TẠI HẢI PHềNG VÀ
VÙNG PHỤ CẬN
4.2.1 Tỡnh hỡnh bệnh HXVK tại vụ thu ủụng sớm 2008
Bệnh hộo xanh vi khuẩn (HXVK) hại cà chua do vi khuẩn R.
solanacearum gõy ra. Bệnh xuất hiện gõy hại từ khi cõy con ủến khi thu hoạch.
Bệnh HXVK cú phạm vi ký chủ rộng, phõn bố rộng rói trờn thế giới. Vi sinh vật gõy bệnh tồn tại trong tàn dư cõy bệnh, trong ủất và trong vật liệu giống bị
nhiễm bệnh. Những yếu tố sinh thỏi như nhiệt ủộ, ẩm ủộ và kỹ thuật canh tỏc, ảnh hưởng rất lớn ủến sự phỏt sinh, phỏt triển của bệnh ngoài ủồng ruộng.
Vụ thu ủụng sớm cà chua ủược gieo trồng vào cuối thỏng 7 ủầu thỏng 8, thu hoạch vào cuối thỏng 10 ủến thỏng 12. Qua ủiều tra tỡnh hỡnh gõy hại và mức ủộ phổ biến của bệnh HXVK hại cà chua tại một số vựng trồng rau và vựng nguyờn liệu cà chua của Hải Phũng và vựng phụ cận vụ thu ủụng sớm 2008, kết quả trỡnh bày ở bảng 4.1 Bảng 4.1. Tỷ lệ bệnh HXVK trờn cỏc giống trồng phổ biến vụ thu ủụng sớm 2008 STT địa ủiểm ủiều tra Giống TLB trung bỡnh (%) Savior 52,8 1 đồ Sơn Gandeeva 48,6 Savior 2,6 2 An Dương Gandeeva 1,5 Savior 2,7 3 Tiờn Lóng Gandeeva 15,5 Savior 14,5 4 Thuỷ Nguyờn Gandeeva 13,9 Savior 0,7 5
* Ghi chỳ : + địa ủiểm ủiều tra : 1. Bàng La - đồ Sơn - Hải Phũng 2. Tõn Tiến - An Dương Ờ Hải Phũng 3. Hợp Thành - Thuỷ Nguyờn Ờ Hải Phũng 4. Quyết Tiến - Tiờn Lóng Ờ Hải Phũng 5. Hải Tõy - Hải Hậu - Nam định
+ Giai ủoạn sinh trưởng : Thu quả lứa 1.
Vụ thu ủụng sớm năm 2008, ủiều tra tỡnh hỡnh bệnh HXVK gõy hại trờn cà chua tại một số vựng thuộc Hải Phũng và vựng phụ cận qua kết quả
bảng 4.1 chỳng tụi nhận thấy, bệnh HXVK gõy hại rất phổ biến cỏc vựng trồng cà chua. Tựy theo từng vựng sinh thỏi, tuỳ từng chõn ủất, phương thức canh tỏc, từng giống mà tỷ lệ gõy hại khỏc nhau. điều tra tại vựng chuyờn canh cõy cà chua tại Bàng La (đồ Sơn) chỳng tụi nhận thấy bệnh hộo xanh xuất hiện sớm nhất và tỷ lệ bị hại là nặng nhất. Trờn giống Savior tỷ lệ nhiễm bệnh hộo xanh là 52,8%, trờn giống Gandeeva tỷ lệ nhiễm bệnh là 48,6%. Cựng thời ủiểm vụ thu ủụng sớm chỳng tụi ủiều tra tại xó Hải Tõy (Hải Hậu) và Tõn Tiến (An Dương) bệnh hộo xanh gần như khụng xuất hiện, tỷ lệ nhiễm bệnh trờn giống Savior và Gandeeva ở Tõn Tiến (An Dương) theo thứ tự là 2,6% và 1,5%, cũn ở Hải Tõy (Hải Hậu) chỉ cú 0,7% và 0%. Trong khi ủú trờn cựng vựng trồng cà chua tại xó Quyết Tiến Ờ Tiờn Lóng thỡ ở ruộng luõn canh với cõy lỳa nước tỷ lệ nhiễm bệnh rất ớt chỉ là 2,7%, cũn ở ruộng trước
ủú trồng khoai tõy ủó bị nhiễm bệnh HXVK và vụ trước ủú trồng cà chua bệnh hộo xanh gõy hại nặng hơn rất nhiều tỷ lệ bệnh là 15,5%.
điều tra bệnh HXVK trờn cỏc giống chỳng tụi thấy bệnh xuất hiện và