Phương pháp nghiên cứu sức sản xuất của lợn ựực giống

- Lợn nái: Lợn nái F1(Landrac ex Yorkshire) ở lứa ựẻ thứ 45 cho phối giống bằng tinh dịch của lợn ựực giống kiểm tra: Sử dụng 30 lợn nái cho mỗ i nhóm

3.3.1.Phương pháp nghiên cứu sức sản xuất của lợn ựực giống

Lợn ựực giống ựược ựảm bảo ựồng ựều về các yếu tố như tuổi sử dụng, khối lượng, thức ăn, chăm sóc và nuôi dưỡng. Cụ thể như sau:

+ Thức ăn: thức ăn nuôi lợn ựực giống là thức ăn hỗn hợp có hàm lượng protein 14-15%, năng lượng trao ựổi 2900 - 3.000 kcal/kg thức ăn.

+ Chếựộ sử dụng: Lợn ựực trong thời gian thắ nghiệm ựược bố trắ 3 ngày lấy tinh một lần, thời gian khai thác tinh lúc sáng sớm. Mùa hè từ 4 giờ ựến 4 giờ 30, mùa ựông từ 4 giờ 30 - 5 giờ. Việc khai thác tinh ựều thông qua nhảy giá (giá nhảy ựược ựúc bằng xi măng) và khai thác tinh bằng tay.

+ Phương pháp kiểm tra: sau khi khai thác tinh, tiến hành kiểm tra các chỉ tiêu như V (ml); A; C; VACẦ

+ Kiểm tra vào hai giai ựoạn: mùa hè và mùa ựông. Mỗi mùa kiểm tra trong 3 tháng, mỗi tháng kiểm tra 10 lần/một ựực kiểm tra.

+ So sánh các chỉ tiêu nghiên cứu phẩm chất tinh dịch giữa các lợn ựực giống và giữa các mùa trong năm.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 37

* Phương pháp kiểm tra các chỉ tiêu ựánh giá phẩm chất tinh dịch như sau:

Thể tắch tinh dịch (V, ml): Thể tắch tinh dịch là lượng tinh dịch của lợn

ựực trong một lần xuất tinh sau khi ựó lọc bỏ keo phèn. Thể tắch tinh dịch ựược xác ựịnh bằng cốc ựong, có phân ựịnh mức ml, trên miệng ựặt 3-4 lớp vải gạc ựó khử trùng ựể lọc chất keo nhầy trước khi tinh dịch chảy vào cốc trên mặt phẳng nằm ngang. đọc kết quảở mặt cong dưới.

Hoạt lực của tinh trùng (A): Kiểm tra ngay sau khi tinh dịch vừa lấy ra

khỏi cơ thể lợn ựực giống trong vòng 5-10 phút, ở nhiệt ựộ 38-400 C trên kắnh hiển vi quang học (PZ0 - WARSZAWA - Made in Poland) có ựộ phóng ựại 500 lần.

Dùng ựũa thuỷ tinh sạch, lấy một giọt tinh nguyên ựặt trên phiến kắnh sạch và ấm (30 Ờ 350 C). Dùng 1 lá kắnh khô sạch, ựậy lên giọt tinh dịch sao cho giọt tinh dịch ựược giàn ựều ra 4 cạnh của lá kắnh, ựặt tiêu bản lên kắnh hiển vi ựể ựếm với ựộ phóng ựại 500 lần. Trong khi kiểm tra, tiêu bản ựược sưởi ấm ở 38- 400 C (dùng hòm sưởi ấm hoặc hệ thống sưởi ấm lắp trên mâm kắnh hiển vi). Tiến hành ước lượng tỷ lệ tinh trùng tiến thẳng có trong vi trường.

Hoạt lực tinh trùng ựược xác ựịnh theo thang ựiểm của Milôvalốp . Bảng thang ựiểm ựánh giá sức hoạt ựộng của tinh trùng như sau:

Hoạt lực (A) 1,0 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 % TT tiến thẳng 95- 100 85- 95 75- 85 65- 75 55- 65 45- 55 35- 45 25- 35 15- 25 5- 15

Nồng ựộ tinh trùng (C, 106/ml): được xác ựịnh bằng phương pháp trực

tiếp ựếm tinh trùng hiện diện ựó pha loãng trong buồng ựếm hồng bạch cầu. Sử dụng phương pháp trực tiếp bằng buồng ựếm Newbauer.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 38 Cách tiến hành như sau:

+ Dùng lá kắnh khô sạch của buồng ựếm lắp lên mặt buồng ựếm.

+ Dựng ống hút bạch cầu (khôvà sạch) hút tinh dịch ựến vạch 0,5 sau ựó hút tiếp dung dịch NaCL 3% (ựể giết chết tinh trùng) ựến vạch 11. Trong quá trình hút tinh dịch hoặc NaCL 3% cần chỳ ý sao cho không gây hiện tượng sủi bọt trong ống pha loãng bạch cầu (nếu có bọt, phải rửa sạch, sấy khụ trước khi tiếp tục) ựảo nhẹ 3-4 lần trong ống hút. Như vậy tinh dịch ựược pha loãng 20 lần. Sau ựó bỏ vài giọt ựi (khoảng 4-5 giọt) rồi nhỏ hỗn hợp này vào buồng ựếm. Lưu ý: chỉ cần ựặt miệng của ống hút bạch cầu vào mép của lam kắnh ở khu vực buồng ựếm, hỗn hợp tinh dịch sẽựược hút vào ựầy trong buồng ựếm. đặt buồng ựếm lên kắnh hiển vi có ựộ phóng ựại 125 lần. đếm tinh trùng có trong 80 ô bé nhất hay 5 ô nhỡ (4 ô ở 4 góc và 1ô ở giữa). Mỗi ô bé có diện tắch 1/400mm2và sâu 1/10mm. Nguyên tắc ựếm: đếm tinh trùng theo ựầu. đếm tinh trùng lần lượt theo hàng, hết hàng nọ ựến hàng kia theo hình chữ chi. Không ựếm lặp lại và không bỏ sót. Những tinh trùng nằm trên cạnh ô nhỡ chỉ ựếm hai cạnh (thường là cạnh trên và cạnh phải). Chỉựếm số tinh trùng có trong 80 ô con.

Kết quảựược tắnh theo công thức: C = n.106

Trong ựó:

C: Là nồng ựộ tinh trùng (106/ml) n: Là số lượng tinh trùng ựếm ựược 106 : Là chỉ số quy ựổi C về 1 ml tinh nguyên Như vậy 1 tinh trùng ựếm ựược ựại ựiện cho 1 triệu tinh trùng trong 1 ml tinh dịch

Chỉ tiêu tổng hợp (VAC, tỷ): Cách xác ựịnh tổng số tinh trùng tiến thẳng

trong một lần xuất tinh (VAC), nó ựược tắnh bằng tắch của 3 chỉ tiêu: Thể tắch (V), sức hoạt ựộng của tinh trùng(A) và nồng ựộ (C), là chỉ tiêu ựánh giá tổng hợp nhất ựểựánh giá phẩm chất của tinh dịch, chỉ tiêu này càng cao, phẩm chất tinh dịch càng tốt, thời gian bảo tồn tinh dịch càng dài.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 39

Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K, %): Tinh trùng kỳ hình là tinh trùng có

hình dạng khác thường so với tinh trùng bình thường. Cách xác ựịnh tỷ lệ kỳ hình như sau: Nhỏ một giọt tinh nguyên lên phiến kắnh khô sạch ựó tẩy mỡ. Nếu tinh dịch ựặc, có thể pha loãng bằng vài ba giọt dung dịch nước sinh lý 0,9%, dựng ựầu ựũa thuỷ tinh sạch trộn ựều hỗn hợp này. Dùng cạnh của phiến kắnh khác (hoặc lam kắnh) phiết nhẹ giọt tinh dịch ựể dàn mỏng ra trên phiến kắnh (ựẩy nhẹ 1 lần ựều tay, không chà xát ựẩy tới kéo lui nhiều lượt). để cho lớp tinh dịch tự khô trong không khắ, sau khi tinh dịch ựó khô, hơ qua ngọn lửa ựèn cồn. Sau ựó dùng thuốc nhuộm bằng xanh metylen ựể nhỏ ựều lên mặt lớp tinh dịch ựó khô, ựợi cho thuốc nhuộm ngấm (mùa hè 5-7 phút, mùa ựông từ 10- 15 phút). Dùng nước cất rửa sạch tiêu bản, ựể tiêu bản tự khô hoặc hơ lên ngọn lửa ựèn cồn, rồi ựưa lên kắnh hiển vi quan sát với ựộ phóng ựại 500 lần. Lần lượt quan sát ựều khắp tiêu bản, ựếm N tinh số trùng kỳ hình và số tinh trùng không kỳ hình rồi xác ựịnh số tinh trùng kỳhình và tắnh theo công thức:

n

K (%)= ỜỜỜỜỜỜỜỜỜỜỜỜ x 100 N (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

Trong ựó K (%): Là tỷ lệ tinh trùng kỳhình n: Số tinh trựng kỳhình ựếm ựược

N: Tổng số tinh trùng quan sát ựược trên vi trường