III. Phương phỏp nghiờn cứ u
2. Xỏc ủị nh cỏc chỉ tiờu sinh hoỏ
2.1. Phương phỏp thu mẫu và xử lý mẫu phõn tớch thành phần dinh dưỡng
* Thu mẫu
Tiến hành thu cỏc mẫu cỏ ngẫu nhiờn thuộc kớch cỡ thương phẩm từ 0,2 - 1,5g/con. Phõn thành hai nhúm: nhúm cỏ nhỏ (từ 40 - 60mm) và nhúm cỏ lớn ( > 60mm) * Xử lý mẫu: Tiến hành xử lý mẫu theo sơủồ sau Hỡnh 3.2: Sơủồ xử lý mẫu phõn tớch sinh húa cỏ Tiểu bạc 2.2. Phõn tớch cỏc thành phần dinh dưỡng 2.2.1. Chuẩn bị mẫu - ðể cỏ giải ủụng khi bỏ từ tủ lạnh ra
- Mẫu ủược ủem xay nhỏ bằng mỏy nghiền mẫu
Thu cỏ Bảo quản cỏ ở thựng
ủỏ lạnh
Phõn tớch mẫu ðưa về phũng thớ nghiệm cất giữ trong tủ lạnh
- Phõn tớch cỏc thành phần: Hàm lượng nước, protein, lipit, khoỏng, axớt amin
2.2.2. Xỏc ủịnh hàm lượng protein tổng số
Xỏc ủịnh hàm lượng protein bằng phương phỏp Kjeldahl qua hệ thống 2100 KjeltecTM, TCVN 4328 - 2001.
Nguyờn lý: Vụ cơ hoỏ mẫu bằng axit H2SO4 ủậm ủặc và hỗn hợp xỳc tỏc ủể
tạo thành muối (NH4)2SO4. Dựng kiềm mạnh (NaOH) giải phúng NH3 từ muối (NH4)2SO4 ra thể tự do rồi ủịnh lượng NH3 bằng axớt tiờu chuẩn.
Cụng thức tớnh: Hàm lượng Nitơ tổng sốủược tớnh theo cụng thức V x 0,00142
Nts = x 100 m
Hàm lượng protein tổng số (Pts) ủược tớnh: Pts(%) = Nts x 6,25
Trong ủú: V: Số ml H2SO4 0,1N dựng khi chuẩn ủộ. m: Trọng lượng lượng mẫu (g).
0,00142: Số g Nitơ tương ủương với 1ml dung dịch H2SO4 0,1N. 6,25: Hệ số protein.
Nts: Ni tơ tổng số.
2.2.3. Xỏc ủịnh hàm lượng lipit tổng số
Xỏc ủịnh theo phương phỏp chiết phõn ủoạn ete, TCVN 4331- 2001 Nguyờn lý: Mỡ ủược chiết rỳt ra khỏi nguyờn liệu bằng Ether petroleum nhờ hệ thống Soxhlet, cõn mỡ ủến trọng lượng khụng ủổi.
Cụng thức tớnh: Lượng mỡ tổng số (Mts) ủược tớnh: G1 – G Mts = x 100 m Trong ủú: G1: Trọng lượng khụng ủổi của bỡnh chứa lipit (g). G: Trọng lượng khụng ủổi của bỡnh khụng (g). m: Trọng lượng mẫu (g). 2.2.4 Xỏc ủịnh hàm lượng nước Dựng phương phỏp sấy khụ, TCVN 4326 - 2001
Nguyờn lý: Sấy khụ mẫu ở 105oC, cõn trọng lượng mẫu sao cho giữa 2 lần cõn sai khỏc khụng quỏ 0,002g. Hiệu số của khối lượng mẫu trước và sau khi sấy khụ là lượng nước cú trong mẫu.
Cụng thức tớnh: Hàm lượng nước (W) trong mẫu tớnh theo cụng thức:
G + m – G1 W (%) = x 100 m Trong ủú: G: Trọng lượng khụng ủổi của chộn cõn (g). G1: Trọng lượng khụng ủổi của chộn cõn và mẫu (g). m: Trọng lượng mẫu (g). 2.2.5. Xỏc ủịnh hàm lượng khoỏng tổng số Xỏc ủịnh theo phương phỏp ủốt khụ, TCVN 4327 - 86
Nguyờn lý: ðốt chỏy hoàn toàn cỏc hợp chất hữu cơ ở nhiệt ủộ 550 - 6000C trong mẫu, phần cũn lại của mẫu (tro trắng) cõn ủến trọng lượng khụng
Cụng thức tớnh: Hàm lượng khoỏng tổng số (Kts %) : G1 – G Kts (%) = x 100 m Trong ủú: G: Trọng lượng khụng ủổi của chộn nung (g).
G1 Trọng lượng khụng ủổi của chộn nung và tro trắng (g). m: Trọng lượng mẫu (g)